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產(chǎn)品名稱:淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒價(jià)格
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號(hào):YS-01S6504
測(cè)定意義
淀粉磷酸化酶(Starch Phosphorylase,SP)是淀粉代謝過(guò)程的可逆反應(yīng)酶,既可催化淀粉的合成,也可催化淀粉的分解。
在高等植物中,淀粉磷酸化酶(合成方向)主要存在于質(zhì)體中,負(fù)責(zé)延長(zhǎng)淀粉的 α-1,4-葡萄糖鏈的非還原末端;淀粉磷酸化酶(分解方向)主要存在于細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)中,催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵磷酸解產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,負(fù)責(zé)葡萄糖鏈的磷酸解,是淀粉代謝過(guò)程中的關(guān)鍵酶。
在植物體中,淀粉磷酸化酶分解方向的底物無(wú)機(jī)磷濃度比合成方向的底物葡萄糖-1-磷酸濃度幾乎高了兩個(gè)數(shù)量級(jí),一般認(rèn)為淀粉磷酸化酶只催化淀粉的分解,因此,分解方向的淀粉磷酸化酶具有重要測(cè)定意義。
測(cè)定原理:
淀粉磷酸化酶催化淀粉中的α-1,4-糖苷鍵與無(wú)機(jī)磷反應(yīng)產(chǎn)生葡萄糖-1-磷酸,葡萄糖-1-磷酸在磷酸葡萄糖變位酶的作用下產(chǎn)生葡萄糖-6-磷酸,并在6-磷酸葡萄糖脫氫酶催化下還原NADP+產(chǎn)生NADPH,使340nm下吸光值增加。
需自備的儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
Anti-Phospho-PKC gamma (Thr514)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化蛋白激酶C亞型G抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Human Mu chain Monoclonal 鼠抗人IgM μ鏈單克隆抗體(親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
鼠抗人β亞基人絨毛膜促性腺單抗 Anti-β-HCG 0.1ml
Dog IgM/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗犬IgM抗體 0.1ml
FAM150A 英文名稱: FAM150A蛋白抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-RPS6KB1(Thr 412) 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 規(guī)格 0.1ml
Mouse Anti-Human Mu chain Monoclonal 鼠抗人IgM μ鏈單克隆抗體(親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格: 1mg
ZNF300 (zinc finger protein ZNF300)- middle 鋅指蛋白300(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5ml
Anti-CD339/Jagged1 Jagged1/CD339抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh OPG 骨保護(hù)蛋白/護(hù)骨素抗體 規(guī)格 0.1ml
RELT Kit Human 人 RELT / TNFRSF19L ELISA配對(duì)抗體 ELISA
Tuftsin 英文名稱: Tuftsin蛋白抗體 0.2ml
CRMP1 英文名稱: 二氫嘧啶酶相關(guān)蛋白1抗體 0.1ml
Anti-CD339/Jagged1 Jagged1/CD339抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
14-3-3 gamma 英文名稱: 14-3-3γ抗體 0.2ml
EBF1 英文名稱: 早期B細(xì)胞因子1抗體 0.2ml
piwi樣1蛋白抗體 Anti-PIWIL1 0.1ml
Anti-phospho-STAT3 (Ser727) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MYL(Ser19) 磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體 規(guī)格 0.1ml
ANP(atrial natriuretic peptide) 心鈉肽(心鈉素)抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
淀粉磷酸化酶(SP)測(cè)試盒價(jià)格茜素黃GG聯(lián)苯菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):82657-04-3 100mg腺苷脫氨酶(ADA)定量檢測(cè)試劑盒
茜素黃R芐呋菊酯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):28434-01-7腺苷脫氨酶(ADA)定量檢測(cè)試劑盒
鋁試劑,玫紅三羧酸銨聯(lián)苯 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):92-52-4腺苷脫氨酶(ADA)定量檢測(cè)試劑盒
鋁試劑聯(lián)苯三唑 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):55179-31-2酵母腺苷脫氨酶(ADA)定量檢測(cè)試劑盒
酸性鉻藍(lán)K硫氯酚 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):97-18-75’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
酸性品紅啶酰菌 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):188425-85-6組織5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
茜素絡(luò)合指示劑(IND)溴鼠 標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào):56073-10-0血液5’-核苷酸酶(5’-NT)活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
茜素絡(luò)合指示劑(高純級(jí),98%)除草定標(biāo)準(zhǔn)品 CAS號(hào): 314-40-9α-L-巖藻糖苷酶(AFU)比色法定量檢測(cè)試劑盒
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。