產品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Eukaryotic Glucose-6-Phosphatase, Catalytic (G6PC) |
種屬 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-22 21:35:45瀏覽次數:337
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Eukaryotic Glucose-6-Phosphatase, Catalytic (G6PC) |
種屬 | Mus musculus (Mouse,小鼠) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產品僅供科研使用,不得用于臨床!
產品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
葡萄糖-6-磷酸酶催化亞基(G6PC)真核蛋白 | Eukaryotic Glucose-6-Phosphatase, Catalytic (G6PC) | Mus musculus (Mouse,小鼠) |
商品介紹:
G6PT; GSD1a; Glycogen Storage Disease Type I,von Gierke Disease; Glucose-6-phosphatase alpha 酶與激酶 物種:Mus musculus (Mouse,小鼠) 來源:真核表達 宿主sf21 Cell 內毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位::細胞膜 預測分子量:41.6kDa 實際分子量:41kDa(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽:Met1~Leu357 with N-terminal His Tag 緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:9.3 應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化:
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質粒轉染到細胞中,通過瞬時表達產生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。
3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結果并控制最終產品質量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
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葡萄糖磷酸變位酶5(PGM5)重組蛋白Recombinant Peroxiredoxin 5 (PRDX5)
葡萄糖磷酸變位酶3(PGM3)重組蛋白Recombinant Peroxiredoxin 6 (PRDX6)
注意事項:
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調整固定時間。
2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網格結構可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內。
5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟:
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。
2. 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;
3. 取組織勻漿液轉移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉/分,4℃離心5 min;
4. 取上清轉移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);
5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數次以盡量去除培養(yǎng)液;
2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉/分離心5 min洗兩次;
3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數分鐘待用。
4. 細胞洗滌后,轉至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:
細胞數量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL~1 mL |
5×106個 | 0.2 mL~0.5 mL |
5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;
6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);
7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
OSR1 + OSR2產品名稱: OSR1/OSR2蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
MAP-9產品名稱: 微管相關蛋白9抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
FGF18產品名稱: 成纖維細胞生長因子18抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Rabbit, Sheep, Goat
TUSC2產品名稱: 小板源性生長因子A相關蛋白2抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
BTR1產品名稱: 鈣粘蛋白相關蛋白受體BTR1抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
SHARPIN產品名稱: 線性泛su鏈相關蛋白SHARPIN抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog
Histone H1.4產品名稱: 組蛋白H1.4樣蛋白抗體交叉反應: Human, Dog, Rabbit
HOXB9產品名稱: 同源盒蛋白B9抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Cat
Bcl-2 alpha產品名稱: Bcl2 alpha蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
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