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肝素酶(HPSE)活性蛋白

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更新時間:2023-03-23 08:40:00瀏覽次數(shù):305

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Active Heparanase (HPSE)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
肝素酶(HPSE)活性蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:內(nèi)皮su轉(zhuǎn)化mei2(ECE2)重組蛋白英文名稱:Recombina Endothelin Converting Enzyme 2 (ECE2)肽基精氨suan脫亞氨meiⅢ(PADI3)重組蛋白英文名稱:Recombina Peptidyl Arginine Deiminase Type III (PADI3)凋亡關(guān)聯(lián)酪氨suan激mei(AATK)重組蛋白

詳細介紹

商品介紹:

HPA; HPR1; HPSE1; HSE1; Endo-glucoronidase;

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 97%

等電點:9.9

應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

肝素酶(HPSE)活性蛋白

Active Heparanase (HPSE)

Homo sapiens (Human,人)

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

胱天蛋白酶9(CASP9)重組蛋白Recombinant Protein Kinase C Iota (PKCi)

胱天蛋白酶8關(guān)聯(lián)蛋白2(CASP8AP2)重組蛋白Recombinant ATP Dependent DNA ligase I (LIG1)

胱天蛋白酶8(CASP8)重組蛋白Recombinant Adenylate Cyclase 4 (ADCY4)

胱天蛋白酶7(CASP7)重組蛋白Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 1 (PSMC1)   
操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

DOK2產(chǎn)品名稱: D酪氨suan激mei衰減蛋白2抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

SLC6A18產(chǎn)品名稱: 溶質(zhì)載體家族6成員18抗體交叉反應(yīng): Human

PCCB交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse

C21orf88產(chǎn)品名稱: 21號染色體開放閱讀框88抗體交叉反應(yīng): Human

Ceruloplasmin產(chǎn)品名稱: 銅藍蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Rabbit

TMEM106B交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Goose, Zebrafish, Sheep, GPV, Firefly, Bee, Belt Jellyfish, Fish, GuineaPig, Hamster, Shrimp, Fruit Fly, Goat, Monkey, Cat, Donkey, Duck, Chimpanzee, Arabidopsis Thalian抗體來源: Mouse

phospho-MST1R (Tyr1353)產(chǎn)品名稱: 原基因c-Met相關(guān)酪氨suan激mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse

SCARA3產(chǎn)品名稱: 細胞應(yīng)激反應(yīng)蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat

PHD3產(chǎn)品名稱: 脯氨suan羥化mei抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

PNPLA3產(chǎn)品名稱: 脂肪營養(yǎng)suPNPLA3抗體交叉反應(yīng): Human   

肝素酶(HPSE)活性蛋白兔子Ⅰ型膠原(Col Ⅰ)ELISA試劑盒Col ⅠⅠ型膠原elisa檢測試劑盒rabbit Collagen Type Ⅰ,Col Ⅰ ELISA Kit

兔轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFB3)ELISA試劑盒TGFB3兔轉(zhuǎn)化生長因子β3ELISA試劑盒Rabbit Transforming growth factor beta-3,TGFB3 ELISA kit

兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試劑盒TGFβ2兔轉(zhuǎn)化生長因子β2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit transforming growth factorβ2,TGFβ2 ELISA Kit

兔轉(zhuǎn)化生長因子β1(TGFβ1)ELISA試劑盒TGFβ1兔轉(zhuǎn)化生長因子β1elisa檢測試劑盒Rabbit TGFβ1 ELISA Kit

兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(MHCⅡ/RLAⅡ)ELISA試劑盒MHCⅡ/RLAⅡ兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類elisa kitRabbit major histocompatibility complexⅡ,MHCⅡ/RLAⅡ ELISA Kit   
注意事項:

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作 

 


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