產(chǎn)品簡介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Catechol-O-Methyltransferase (COMT) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實業(yè)有限公司 |
—— 銷售熱線 ——
15201736385 |
參考價 | 面議 |
更新時間:2023-03-23 08:39:33瀏覽次數(shù):272
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研研究實驗 | 英文名稱 | Active Catechol-O-Methyltransferase (COMT) |
物種 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱:Active Catechol-O-Methyltransferase (COMT)
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人) 緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300) 性狀:凍干粉 純度:> 90% 等電點:5.6 應用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關產(chǎn)品:
過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白Recombinant Polymerase DNA Directed Beta (POLb)
果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)重組蛋白Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 6 (PSMC6)
果糖胺-3-激酶(FN3K)重組蛋白Recombinant Phosphodiesterase 4B, cAMP Specific (PDE4B)
果糖-1,6-二磷酸酶2(FBP2)重組蛋白Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 7 (MAPK7)
標簽選擇:
親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達載體的構建
c. 無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細胞瞬時轉染
e. 表達小試,條件優(yōu)化
f. 表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達
h. 親和純化
i. 檢測和鑒定
原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:
a. 選擇表達載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉化表達菌株
e. 蛋白表達小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測
誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。
b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。
c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點:
標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結合是一種非常簡便、直接的標記方法。
酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結果即時可見、敏感性高。
熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。
PAGE4產(chǎn)品名稱: 前列相關蛋白4抗體交叉反應: Human
CD1E產(chǎn)品名稱: T細胞表面糖蛋白CD1E抗體交叉反應: Human
PI-15產(chǎn)品名稱: 肽mei劑15抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep
SerpinB8產(chǎn)品名稱: 絲氨suan蛋白mei劑B8抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig, Cat
HRSP12產(chǎn)品名稱: 熱反應蛋白12抗體交叉反應: Human
LENG1產(chǎn)品名稱: LENG1蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
CNKSR3產(chǎn)品名稱: Ras激mei因子連接增強蛋白3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
FAM80A產(chǎn)品名稱: FAM80A蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow
AADACL4產(chǎn)品名稱: 芳香乙酰胺脫乙?;鵰ei樣蛋白4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit
ACKR3產(chǎn)品名稱: 型趨化因子受體3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白兔子低氧誘導因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒HIF-1α低氧誘導因子1αelisamei聯(lián)免疫試劑盒 Rabbit hypoxia-inducible factor 1α(HIF-1α) ELISA Kit
兔子白介su9(IL-9)ELISA試劑盒IL-9白介su9elisa檢測試劑盒Rabbit Interleukin 9,IL-9 ELISA Kit
兔子白介su1可溶性受體I(IL-1sR Ⅰ)ELISA試劑盒IL-1sR Ⅰ白介su1可溶性受體Ielisa kitRabbit soluble interleukin-1 receptor Ⅰ,IL-1sR Ⅰ ELISA Kit
兔子α2巨球蛋白(A2M)ELISA試劑盒A2Mα2巨球蛋白ELISA試劑盒Rabbit alpha-2-macroglobulin,A2M ELISA kit
兔子L選擇su(L-Selectin)ELISA試劑盒L-SelectinL選擇suelisamei聯(lián)免疫試劑盒Rabbit L-Selectin ELISA Kit