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兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白

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更新時間:2023-03-23 08:39:33瀏覽次數(shù):272

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Active Catechol-O-Methyltransferase (COMT)
物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:牛源性成分PCR試劑盒山羊源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒豬流感(SIV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)桃拉綜合癥病毒RT-PCR試劑盒牛錐蟲PCR檢測試劑盒膿腫分枝桿菌Mycobacterium abscessus complex膿腫分枝桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒Mycobacterium abscessus complex

詳細介紹

圖片6.png


公司產(chǎn)品僅供科研實驗產(chǎn)品屬性:

產(chǎn)品名稱:兒茶酚-O-甲基轉移酶(COMT)活性蛋白   

物種:Homo sapiens (Human,人)

英文名稱:Active Catechol-O-Methyltransferase (COMT)

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

緩沖液成份:20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液(pH8.0, 含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01% SKL, 5% Trehalose和Proclin300)

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:5.6

應用:Cellculture;ActivityAssays.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg

相關產(chǎn)品:
過氧蛋白同源物(PXDN)重組蛋白Recombinant Polymerase DNA Directed Beta (POLb)

果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)重組蛋白Recombinant Proteasome 26S Subunit, ATPase 6 (PSMC6)

果糖胺-3-激酶(FN3K)重組蛋白Recombinant Phosphodiesterase 4B, cAMP Specific (PDE4B)

果糖-1,6-二磷酸酶2(FBP2)重組蛋白Recombinant Mitogen Activated Protein Kinase 7 (MAPK7)

標簽選擇:

親和標簽:蛋白重組表達過程中采用親和標簽融合表達有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過程變得更加容易;另一方面是為了促進某些不溶性蛋白可溶。蛋白標簽可分兩類:一類是短肽類標簽;一類是長肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達。使用不同的蛋白標簽需要根據(jù)具體案例來分析。

不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:

真核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體和宿主細胞(常用的CHO和HEK293)

b.      表達載體的構建

c.      無內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提

d.      細胞瞬時轉染

e.      表達小試,條件優(yōu)化

f.       表達分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)

g.      大量表達

h.      親和純化

i.        檢測和鑒定

原核表達系統(tǒng)的重組蛋白表達步驟:

a.      選擇表達載體

b.      密碼子優(yōu)化

c.      基因合成/亞克隆

d.      轉化表達菌株

e.      蛋白表達小試分析

f.       如果蛋白可溶,蛋白親和純化

g.      如果蛋白不可溶,則需要變復性來制備可溶蛋白。

h.      鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定

GZMH蛋白;表達蛋白的分析、純化、檢測

  誘導表達成功后,表達蛋白的分析、純化、檢測應該順當,按一般的實驗步驟做沒太大的問題。

操作步驟

根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。

1、樣品前處理:

a)對于貼壁細胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細胞充分接觸。

b)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照6孔板每孔細胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 50-100 萬細胞/管,然后再裂解。

c)對于組織樣品: 把切成細小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。

2、后處理:

將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進行后續(xù)的蛋白濃度測定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作

特點:

標記:標記反應簡單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價結合是一種非常簡便、直接的標記方法。

酶標記:酶標記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當方法連接而成,其應用范圍非常廣泛,結果即時可見、敏感性高。

熒光標記:熒光基團AbFluorTM是新型的熒光標記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團經(jīng)恰當?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測抗原的分布情況,主要用于細胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細胞水平定位的方法。

PAGE4產(chǎn)品名稱: 前列相關蛋白4抗體交叉反應: Human

CD1E產(chǎn)品名稱: T細胞表面糖蛋白CD1E抗體交叉反應: Human

PI-15產(chǎn)品名稱: 肽mei劑15抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

SerpinB8產(chǎn)品名稱: 絲氨suan蛋白mei劑B8抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Cow, Horse, Rabbit, GuineaPig, Cat

HRSP12產(chǎn)品名稱: 熱反應蛋白12抗體交叉反應: Human

LENG1產(chǎn)品名稱: LENG1蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

CNKSR3產(chǎn)品名稱: Ras激mei因子連接增強蛋白3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

FAM80A產(chǎn)品名稱: FAM80A蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow

AADACL4產(chǎn)品名稱: 芳香乙酰胺脫乙?;鵰ei樣蛋白4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit

ACKR3產(chǎn)品名稱: 型趨化因子受體3抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
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