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詳細介紹
【友情提示】：本產品僅供科研研究使用，不得用于人體臨床直接檢測。避免給您帶來不必要的損失，請仔細閱讀購買說明！
產品名稱：谷胱甘肽S-轉移酶（GST）測試盒品牌
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號：YS-01S6385
測定意義
GST是一種具有多種生理功能的蛋白質家族，主要存在于細胞質內。GST是體內解毒酶系統(tǒng)的重要組成部分，主要催化各種化學物質及其代謝產物與GSH的巰基共價結合，使親電化合物變?yōu)橛H水物質，易于從膽汁或尿液中排泄，達到將體內各種潛在或具備毒性的物質降解并排出體外的目的。因此，GST在保護細胞免受親電子化合物的損傷中發(fā)揮著重要的生物學功能。此外，因為GST具有GSH-Px活性，亦稱為non-Se GSH-Px，具有修復氧化破壞的大分子如DNA、蛋白質等的功能。注意，GST催化的反應減少GSH含量，但是不增加GSSG含量。
測定原理：
GST催化GSH與CDNB結合，其結合產物的光吸收峰波長為340nm；通過測定340nm波長處吸光度上升速率，即可計算出GST活性。
需自備的儀器和用品：
紫外-可見分光光度計、低溫離心機、水浴鍋、可調節(jié)移液器、1ml石英比色皿、雙蒸水。
樣品制備：
1）. 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品，體積可達2.000ml。
2）. 過濾混濁溶液。
3）. 除去樣品中的CO 2 。
4 ）. 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調至8.0。
5 ）. 調整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。
6 ）. 用空白樣品做對照測定有色樣品（如有必要調整PH值至8.0）。
7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經稀釋或體積更大的樣品。
8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。
9 ）. 用Carrez試劑將含有蛋白質的樣品去蛋白。
10）.含脂肪的樣品用熱水提取。
特點:
(1)應用廣泛
由于各種各樣的無機物和有機物在紫外可見區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測定。到目前為止,幾乎化學元素周期表上的所有元素(除少數放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應學科的發(fā)展,使新的有機顯色劑的合成和研究取得可喜的進展,從而對元素測定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡合物和各種表面活性劑的應用研究,使許多元素的摩爾吸光系數由原來的幾萬提高到幾十萬。相對于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準確度一致*是比較高的。不但在實際工作中光度法被廣泛采用,在標準參考物質的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標準方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當的顯色條件就可直接進行光度法測定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測定,已有比較滿意的方法了。
(4)準確度高
對于一般的分光光度法來說,其濃度測量的相對誤差在1-3%范圍內,如采用示差分光度法測量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經預富集后)。
(6)分析成本低、操作簡便、快速
Anti-phospho-JNK1/2(pThr183/pTyr185)/FITC 熒光素標記抗磷酸化氨基末端激酶1/2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-human IgM/Gold 金標記兔抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
Fe65 蛋白抗體 Anti-Fe65 protein 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗豚鼠IgM 0.1ml
FOXD1 英文名稱： 叉頭蛋白D1抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-SYN1(Ser62+Ser67) 磷酸化神經突觸素1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit Anti-human IgM/Gold 金標記兔抗人IgM (10nm/15nm)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5ml
MGr1-Ag/37LRP(P37-kDa laminin receptor precursor) 層粘連蛋白受體1抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
Anti-beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
Rhesus antibody Rh Phospho-BLNK(Tyr491) 磷酸化T細胞連接蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
多聚賴酸溶液0.1%(Poly-L-Lysine)10X 10ml 組化用
Vimentin 英文名稱： 波形蛋白抗體 0.1ml
DNAH7 英文名稱： 軸絲動力蛋白7抗體 0.2ml
Anti-beta-Amyloid(1-28) β淀粉樣肽(1-28)抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
mSin3A 英文名稱： 同源轉錄調節(jié)蛋白Sin3A抗體 0.2ml
EPOR 英文名稱： 紅細胞生成素受體抗體 0.1ml
新的抑癌基因Brg1抗體 Anti-Brg1 0.1ml
Anti- Beta-Actin/HRP 辣根過氧化物酶標記β-肌動蛋白(抗體)Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-IFNAR1(Ser535+Ser539) 磷酸化干擾素α受體抗體 規(guī)格 0.1ml
Cav-1/ETM1 peptide 細胞質膜微囊蛋白-1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg
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操作步驟:
實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標準品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應120分鐘。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100μl（在使用前一小時內配制），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鐘。
3. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 100μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鐘。
5. 溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內液體拍干）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
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