大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品：核糖體RNA合成蛋白42抗體Anti-Fractalkine/CX3CL1 /FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)趨化蛋白抗體IgG
多發(fā)性外生骨疣樣蛋白3抗體Anti-Phospho-FRA1 (Ser265) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化FRA-1蛋白抗體IgG
轉(zhuǎn)錄因子EYA1抗體Anti-FSCN1/FITC 熒光素標(biāo)記纖維束蛋

細(xì)胞特性：

1)】組織來源于實(shí)驗動物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基

規(guī)格：100mL/125mL×4
貨號：YS-02X10119

細(xì)胞生長實(shí)驗 ：細(xì)胞生長良好，形態(tài)正常

儲存條件：2℃-8℃，避光儲存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對數(shù)生長期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過低，10的6次方-7次方的數(shù)量級比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶凍一管（1.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于細(xì)胞而言要求不是很嚴(yán)格，我從10%-90%都用過，問題不大，個人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長，-80度過夜，最后液氮。對于條件較好的實(shí)驗室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。

（四）分裝：將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因為蒸汽的穿透力強(qiáng)，殺菌效果好。

PI ELISA Kit 大鼠胰島素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 ZNF268 鋅指脂蛋白-1b抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Fumarate hydratase/FH 富馬酸水合酶抗體 規(guī)格 0.2ml

ADRA1A ELISA Kit 大鼠能a1A受體 96T

Neurogenin 1 英文名稱： 神經(jīng)元素1抗體 0.2ml

Apolipoprotein CI/APOC1 英文名稱： 載脂蛋白C1抗體 0.2ml

 ZNF268 鋅指脂蛋白-1b抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

E-selectin 大鼠可溶性E-選擇素Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

 Phospho-EEF2k (Ser366) 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh MYOM2 肌間蛋白2抗體 規(guī)格 0.2ml

SIgA(Human secretory immunoglobulin A) ELISA Kit 人分泌型球蛋白A(人唾液) 96T

SLC4A4 英文名稱： 碳酸氫鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白4-A4抗體 0.1ml

ICAM3 英文名稱： 細(xì)胞間粘附分子3抗體 0.1ml

 Phospho-EEF2k (Ser366) 磷酸化真核延伸因子激酶2抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Goat  Guinea pig IgG/FITC FITC標(biāo)記的羊抗豚鼠IgG 0.3ml

Frizzled 8 英文名稱： 卷曲蛋白8抗體 0.2ml

鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體  CaMK2a 0.2ml

 Nitric oxide/NO/FITC 熒光素標(biāo)記一氧化氮抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PON1 芳香酯酶1(對氧磷酶)抗體 規(guī)格 0.1ml

 Z-DEVD-FMK/FITC 熒光素標(biāo)記CASPASE3凋亡抑制劑IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
大鼠肺大動脈平滑肌細(xì)胞*培養(yǎng)基組織脊髓過氧化酶（MPO）活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒20次人神經(jīng)肽Y（NP-Y）ELISA試劑盒,NP-Y ELISA kit

組織脊髓過氧化酶（MPO）活性高質(zhì)敏感（DTNB）比色法定量檢測試劑盒20次人抗唾液腺導(dǎo)管組織抗體（SDA）ELISA試劑盒,SDA ELISA KIT

植物脊髓過氧化酶（MPO）活性比色法定量檢測試劑盒20次人EB病IgG（EBv IgG）ELISA試劑盒,EBv IgG ELISA

植物脊髓過氧化酶（MPO）活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒20次人結(jié)核菌桿抗體IgG（TB-Ab IgG）ELISA試劑盒,TB-Ab IgG ELISA

植物脊髓過氧化酶（MPO）活性高質(zhì)敏感（DTNB）比色法定量檢測試劑盒20次人超敏前列腺特異性抗原（PSA-U S）ELISA試劑盒,PSA-U S ELISA

細(xì)胞一氧化氮（NO）活性比色法定量檢測試劑盒50次大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3（NT-3）ELISA試劑盒,

組織一氧化氮（NO）活性比色法定量檢測試劑盒50次腫瘤壞死因子α（TNF-α）ELISA試劑盒--動物，人

血液一氧化氮（NO）活性比色法定量檢測試劑盒50次Half –Fraser 添加劑添加到HB4190中，用于李氏菌的選擇性增菌培養(yǎng)

體液一氧化氮（NO）活性比色法定量檢測試劑盒50次CBZ-L-異亮

細(xì)胞一氧化氮（NO）活性熒光定量檢測試劑盒50次γ-球蛋白（牛）

組織一氧化氮（NO）活性熒光定量檢測試劑盒50次羧甲基纖維素CM-32

血液一氧化氮（NO）活性熒光定量檢測試劑盒50次1，4-丁二醇

體液一氧化氮（NO）活性熒光定量檢測試劑盒50次碳酸鉛

細(xì)胞一氧化氮合成酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次人趨化因子（Lptn/LTN/XCL1）ELISA試劑盒,

組織一氧化氮合成酶總活性比色法定量檢測試劑盒20次人堿性成纖維生長因子（bFGF）ELISA試劑盒,