產(chǎn)品簡(jiǎn)介
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
---|---|---|---|
主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Active Calpain 3 (CAPN3) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
上海研生實(shí)業(yè)有限公司 |
—— 銷(xiāo)售熱線 ——
15201736385 |
參考價(jià) | 面議 |
更新時(shí)間:2023-03-23 08:34:57瀏覽次數(shù):265
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
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主要用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) | 英文名稱(chēng) | Active Calpain 3 (CAPN3) |
種屬 | Homo sapiens (Human,人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
品牌 | 研生 |
公司產(chǎn)品僅供科研實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱(chēng):鈣蛋白酶3(CAPN3)活性蛋白
物種:Homo sapiens (Human,人)
英文名稱(chēng):Active Calpain 3 (CAPN3)
CANPL3; p94; LGMD2; LGMD2A; nCL1; Calcium-activated neutral proteinase 3; Muscle-specific calcium-activated neutral protease 3; New calpain 1
酶與激酶
物種:Homo sapiens (Human,人) 緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose. 性狀:凍干粉 純度:> 95% 等電點(diǎn):5.5 應(yīng)用:Cellculture;ActivityAssays. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
相關(guān)產(chǎn)品:
核糖核酸酶A13(RNASE13)重組蛋白R(shí)ecombinant Steroid 5 Alpha Reductase 2 (SRD5a2)
核糖核酸酶A12(RNASE12)重組蛋白R(shí)ecombinant N-Acetyltransferase 8 Like Protein (NAT8L)
核糖核酸酶A11(RNASE11)重組蛋白R(shí)ecombinant Nei Endonuclease VIII Like Protein 3 (NEIL3)
核糖核酸酶A10(RNASE10)重組蛋白R(shí)ecombinant Coupling Factor 6 (CF6)
標(biāo)簽選擇:
親和標(biāo)簽:蛋白重組表達(dá)過(guò)程中采用親和標(biāo)簽融合表達(dá)有兩方面的作用:一方面是為了使蛋白純化過(guò)程變得更加容易;另一方面是為了促進(jìn)某些不溶性蛋白可溶。蛋白標(biāo)簽可分兩類(lèi):一類(lèi)是短肽類(lèi)標(biāo)簽;一類(lèi)是長(zhǎng)肽以融合蛋白(fused partner)形式共表達(dá)。使用不同的蛋白標(biāo)簽需要根據(jù)具體案例來(lái)分析。
不同的系統(tǒng)步驟稍微有些不同的,大致步驟如下:
真核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體和宿主細(xì)胞(常用的CHO和HEK293)
b. 表達(dá)載體的構(gòu)建
c. 無(wú)內(nèi)毒素的質(zhì)粒抽提
d. 細(xì)胞瞬時(shí)轉(zhuǎn)染
e. 表達(dá)小試,條件優(yōu)化
f. 表達(dá)分析和鑒定(SDS-PGAE和WB)
g. 大量表達(dá)
h. 親和純化
i. 檢測(cè)和鑒定
原核表達(dá)系統(tǒng)的重組蛋白表達(dá)步驟:
a. 選擇表達(dá)載體
b. 密碼子優(yōu)化
c. 基因合成/亞克隆
d. 轉(zhuǎn)化表達(dá)菌株
e. 蛋白表達(dá)小試分析
f. 如果蛋白可溶,蛋白親和純化
g. 如果蛋白不可溶,則需要變復(fù)性來(lái)制備可溶蛋白。
h. 鑒定,包括SDS-PAGE和WB鑒定
GZMH蛋白;表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)
誘導(dǎo)表達(dá)成功后,表達(dá)蛋白的分析、純化、檢測(cè)應(yīng)該順當(dāng),按一般的實(shí)驗(yàn)步驟做沒(méi)太大的問(wèn)題。
操作步驟 :
根據(jù)使用量,取每 1mL RIPA 加入 10uL PMSF,使 PMSF 的zui終濃度為 1mM?;靹騻溆茫≒MSF 現(xiàn)用現(xiàn)加)。
1、樣品前處理:
a)對(duì)于貼壁細(xì)胞:去除培養(yǎng)液,用 PBS、生理鹽水或無(wú)血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下,使裂解液和細(xì)胞充分接觸。
b)對(duì)于懸浮細(xì)胞:離心收集細(xì)胞,用手指把細(xì)胞用力彈散。按照6孔板每孔細(xì)胞量加入150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液,再用手指輕彈以充分裂解細(xì)胞。充分裂解后應(yīng)沒(méi)有明顯的細(xì)胞沉淀。如果細(xì)胞量較多,必需分裝成 50-100 萬(wàn)細(xì)胞/管,然后再裂解。
c)對(duì)于組織樣品: 把切成細(xì)小的碎片。按照每 20mg 組織加入 150-250 uL 裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以適當(dāng)添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當(dāng)減少裂解液的用量)。用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。
2、后處理:
將裂解后的樣品 10000-14000g 離心 3-5 分鐘,取上清,即可進(jìn)行后續(xù)的蛋白濃度測(cè)定、SDS-PAGE、Western blotting 和免疫沉淀等操作
特點(diǎn):
標(biāo)記:標(biāo)記反應(yīng)簡(jiǎn)單、溫和且很少抑制抗體活性,將與抗體共價(jià)結(jié)合是一種非常簡(jiǎn)便、直接的標(biāo)記方法。
酶標(biāo)記:酶標(biāo)記抗體是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成,其應(yīng)用范圍非常廣泛,結(jié)果即時(shí)可見(jiàn)、敏感性高。
熒光標(biāo)記:熒光基團(tuán)AbFluorTM是新型的熒光標(biāo)記物之一,產(chǎn)品覆蓋350-770nm。不同的AbFluor基團(tuán)經(jīng)恰當(dāng)?shù)募す饪砂l(fā)光, 從而得知抗體的定位和待測(cè)抗原的分布情況,主要用于細(xì)胞分選或高分辨率免疫染色,是一種非常好的亞細(xì)胞水平定位的方法。
OGDH產(chǎn)品名稱(chēng): 酮戊二suan脫氫meiOGDH抗體交叉反應(yīng): Human, Pig, Cow, Horse, Sheep
SLC9A6產(chǎn)品名稱(chēng): 溶質(zhì)載體家族蛋白9成員6抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep
Reelin產(chǎn)品名稱(chēng): 絡(luò)絲蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Horse, GuineaPig
應(yīng)用類(lèi)型: Other英文名稱(chēng): CRALBP標(biāo)記: Unconjugated
RNF135產(chǎn)品名稱(chēng): 環(huán)指蛋白135抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Cow
ZNF749產(chǎn)品名稱(chēng): 鋅指蛋白749抗體交叉反應(yīng): Human
IZUMO4產(chǎn)品名稱(chēng): IZUMO4蛋白抗體交叉反應(yīng): Human
CYP4A11產(chǎn)品名稱(chēng): 細(xì)胞色suP450 4A1抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, Rabbit
GCSF Receptor產(chǎn)品名稱(chēng): 粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子3受體抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat
鈣蛋白酶3(CAPN3)活性蛋白大鼠成纖維生長(zhǎng)因子受體底物2(FRS2)ELISA試劑盒FRS2成纖維生長(zhǎng)因子受體底物2elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat Fibroblast Growth Factor Receptor Substrate 2(FRS2)ELISA Kit
大鼠丙二酰輔meiA脫羧mei(MLYCD)ELISA試劑盒MLYCD丙二酰輔meiA脫羧meielisa檢測(cè)試劑盒Rat Malonyl Coenzyme A Decarboxylase(MLYCD)ELISA Kit
大鼠半乳糖-1-磷suan尿苷酰轉(zhuǎn)移mei(GALT)ELISA試劑盒GALT半乳糖-1-磷suan尿苷酰轉(zhuǎn)移meielisa kitRat Galactose-1-Phosphate Uridylyltransferase(GALT)ELISA Kit
大鼠白介su10受體β(IL10Rβ)ELISA試劑盒IL10Rβ白介su10受體βELISA試劑盒Rat Interleukin 10 Receptor Beta(IL10Rb)ELISA Kit
大鼠白蛋白啟動(dòng)子D位點(diǎn)結(jié)合蛋白(DBP)ELISA試劑盒DBP白蛋白啟動(dòng)子D位點(diǎn)結(jié)合蛋白elisamei聯(lián)免疫試劑盒Rat D Site Of Albumin Promoter Binding Protein(DBP)ELISA Kit