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產(chǎn)品簡介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
|---|---|---|---|
| 主要用途 | 僅供科研實驗 | 英文名稱 | Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic II (NT5C2) |
| 種屬 | Homo sapiens (Human，人) | 規(guī)格 | 10μg50μg200μg1mg5mg |
| 品牌 | 研生 |
詳細介紹
公司產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于臨床！
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 物種 |
5'-核苷酸酶Ⅱ(NT5C2)重組蛋白 | Recombinant 5'-Nucleotidase, Cytosolic II (NT5C2) | Homo sapiens (Human，人) |
商品介紹：
NT5B; PNT5; GMP; cN-II; NT5CP; Purine 5' Nucleotidase; 5'-Nucleotidase(Purine),Cytosolic Type B; Cytosolic purine 5'-nucleotidase 酶與激酶 物種：Homo sapiens (Human，人) 來源：原核表達 宿主E.coli 內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測定) 亞細胞定位：：n/a 預測分子量：28.5kDa 實際分子量：-(差異分析請參閱說明書) 片段與標簽：Met1~Gly212 with 緩沖液成份：磷酸鹽緩沖液（pH7.4，含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.） 性狀：凍干粉 純度：> 90% 等電點：- 應用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB. 規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg |
蛋白表達及純化：
1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞，然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中，通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。
2.收集含有目標蛋白的部分（細胞或培養(yǎng)上清）。
3.通過親和，離子交換，疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。
4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。
5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。
相關(guān)產(chǎn)品：
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)活性蛋白英文名稱：Active Carbonic Anhydrase II (CA2)Rattus norvegicus (Rat，大鼠)
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)天然蛋白英文名稱：Native Carbonic Anhydrase II (CA2)Homo sapiens (Human，人)
碳酸酐酶Ⅱ(CA2)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase II (CA2)Chicken (Gallus，雞)
碳酸酐酶Ⅲ(CA3)重組蛋白英文名稱：Recombinant Carbonic Anhydrase III, Muscle Specific (CA3)Homo sapiens (Human，人)
注意事項：
1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同，應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。
2、雖然作用溫和，但能硬化組織，固定時間過久會導致組織變脆，切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。
3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基，使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇，使之不能充分暴露，可造成假陰性的染色，影響免疫組化結(jié)果。因此，4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時，有時需要對抗原先進行修復，然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。
4、本產(chǎn)品對人體有害，操作時請小心，并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。
5、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作
操作步驟：
Ⅰ 實體組織蛋白的提取
1． 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑， 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
2． 每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中，剪碎成3mm×3mm左右的小塊，加入0.5～1 mL冷 Lysis Buffer，玻璃勻漿器上下手動勻漿15次，注意低溫操作；
3． 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管，離心10000轉(zhuǎn)/分，4℃離心5 min；
4． 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中，即為全蛋白提取物，蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
5． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取
1． 貼壁培養(yǎng)的細胞，吸去培養(yǎng)基后，加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次，每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液；
2． 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞，將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中， 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min，再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS，1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次；
3． 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑， 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF，混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。
4． 細胞洗滌后，轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中，加入上述配制好的冷Lysis Buffer，加入量如下表所示：
細胞數(shù)量 | Lysis Buffer加入量 |
107個 | 0.5 mL～1 mL |
5×106個 | 0.2 mL～0.5 mL |
5．置于4℃搖床平臺上，溫和振蕩15 min；
6． 14,000rpm，4℃離心15min，取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量（Bradford法、BCA法）；
7． 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。
phospho-Parvin alpha (Ser8)產(chǎn)品名稱: 基質(zhì)重塑相關(guān)蛋白PARVA抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow, Rabbit
KAT2A/GCN5產(chǎn)品名稱: 組蛋白乙?；D(zhuǎn)移meiGCN5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Cow, Horse, Sheep
Tapasin Related Protein產(chǎn)品名稱: TAP結(jié)合蛋白樣抗體交叉反應: Human, Mouse, Horse
GPCR LOC51210產(chǎn)品名稱: G蛋白偶聯(lián)受體LOC51210蛋白抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse
ZNF521產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白521抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit
Cornulin產(chǎn)品名稱: 熱休克蛋白58抗體交叉反應: Human
PBX4產(chǎn)品名稱: B淋巴細胞白前體蛋白轉(zhuǎn)錄因子4抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit
Tetranectin產(chǎn)品名稱: 四連接suTN抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat
SIGLEC1產(chǎn)品名稱: CD169抗體交叉反應: Mouse, Rat
CHMP6產(chǎn)品名稱: 染色質(zhì)修飾蛋白CHMP6抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Cow
5'-核苷酸酶Ⅱ(NT5C2)重組蛋白人Toll樣受體10(TLR10)ELISA試劑盒TLR10Toll樣受體10elisa kitHuman Toll Like Receptor 10(TLR10)ELISA Kit
人Tolloid樣蛋白1(TLL1)ELISA試劑盒TLL1Tolloid樣蛋白1ELISA試劑盒Human Tolloid Like Protein 1(TLL1)ELISA Kit
人TNF受體關(guān)聯(lián)因子6(TRAF6)ELISA試劑盒TRAF6TNF受體關(guān)聯(lián)因子6elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human TNF Receptor Associated Factor 6(TRAF6)ELISA Kit
人TNF受體關(guān)聯(lián)因子5(TRAF5)ELISA試劑盒TRAF5TNF受體關(guān)聯(lián)因子5elisa檢測試劑盒Human TNF Receptor Associated Factor 5(TRAF5)ELISA Kit
人TNF受體關(guān)聯(lián)因子3(TRAF3)ELISA試劑盒TRAF3TNF受體關(guān)聯(lián)因子3elisa kitHuman TNF Receptor Associated Factor 3(TRAF3)ELISA Kit
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