生化法檢測(cè)試劑盒:分光光度法、微量法、比色法、酶標(biāo)法、高液相色譜法,自主,技術(shù)團(tuán)隊(duì),操作簡便快捷,規(guī)格合理、系列成套,價(jià)格合理,公司產(chǎn)品僅用于科研是廣大科研工作者的好選擇,詳細(xì)產(chǎn)品咨詢:
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 測(cè)試方法 | 貨號(hào) |
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒價(jià)格 | 100管/96樣 | 熒光法 | YS-01S6368 |
測(cè)定意義
活性氧(Reactive oxygen species, ROS)包括超氧自由基、過氧化氫、及其下游產(chǎn)物過氧化物和羥化物等,研究表明,機(jī)體95%以上的活性氧(ROS)都來自于線粒體,其失衡所致的氧化應(yīng)激與細(xì)胞生長增殖、發(fā)育分化、衰老和凋亡以及許多生理和病理過程有關(guān)。
正常情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化防御系統(tǒng)與氧自由基處于平衡狀態(tài),細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平維持在較低的生理范圍;在病理情況下,細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)與氧自由基的平衡被打破,細(xì)胞內(nèi)活性氧水平過多,就可破壞線粒體酶類、脂類和核酸,使機(jī)體出現(xiàn)氧化應(yīng)激,同時(shí),活性氧還可攻擊線粒體DNA產(chǎn)生氧化損傷,導(dǎo)致線粒體ATP合成減少、線粒體膜電位破壞等結(jié)構(gòu)和功能變化。
因此,通過檢測(cè)活性氧的變化來判斷線粒體的功能是否正常具有重要意義。
測(cè)定原理:
熒光探針-還原型二氯熒光素 (2', 7'-dichlorodihy drofluorescin diacetate, DCFH-DA)可擴(kuò)散通過線粒體膜,在線粒體內(nèi)被酯酶水解,形成無熒光的DCFH,DCFH迅速與ROS反應(yīng)生成熒光物—氧化型二氯熒光素(2', 7'-dichlo rofluorescin, DCF)。 根據(jù)上述原理設(shè)計(jì)了利用熒光法直接定量檢測(cè)線粒體ROS產(chǎn)生速率的方法。將熒光強(qiáng)度隨時(shí)間變化的數(shù)據(jù)點(diǎn)擬合,線性回歸直線斜率與ROS產(chǎn)生的速率呈正比。
需自備的儀器和用品:
多功能酶標(biāo)儀、恒溫培養(yǎng)箱、分析天平、可調(diào)式移液器、冰、蒸餾水。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:操作時(shí)間短,48-50T,可測(cè)40例樣本左右,96-100T,可測(cè)80例樣本左右;
2、取樣量微:常規(guī)操作取樣量50l, 酶標(biāo)儀操作僅需5l即可檢測(cè),部分試劑盒取樣多少請(qǐng);
3、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放3個(gè)月有效;
4、再現(xiàn)性好:20倍稀釋線性仍然良好;
5、回收試驗(yàn): X =99%;
6、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng);
7、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血清(漿)、組織、各種體液、灌流液、各種培養(yǎng)細(xì)胞以及細(xì)胞培養(yǎng)上清液等,部分試劑盒適用于檢測(cè)植物。
操作注意事項(xiàng):
1. 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。
2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。
3. 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
4. 使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。
5. 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6. 洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
7. 底物A應(yīng)揮發(fā),避免長時(shí)間打開蓋子。底物B對(duì)光敏感,避免長時(shí)間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。
8. 加入試劑的順序應(yīng)一致,以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時(shí)間一樣。
9. 按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。
常見樣本處理方法:
1、血清(漿)樣品:直接檢測(cè)。
2、細(xì)菌、細(xì)胞或組織樣品的制備: 細(xì)菌或培養(yǎng)細(xì)胞:先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;按照細(xì)菌或細(xì)胞數(shù)量
(104個(gè)):提取液體積(mL)為500~1000:1 的比例(建議 500萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL提取液) ,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率20%或200W,超聲 3s,間隔10s,重復(fù)30 次)8000g 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。
組織:按照組織質(zhì)量(g) :提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例(建議稱取約 0.1g組織,
加入 1mL提取液),進(jìn)行冰浴勻漿。8000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測(cè)。
Anti-PAFR/FITC 熒光素標(biāo)記抗血小板活化因子受體抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit IgG/Biotin 生物素化兔IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 1ml
周期素D2抗體 Anti-Cyclin D2 0.1ml
Rabbit anti-mouse Kappa light chain/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗小鼠k鏈 0.1ml
FXYD1 英文名稱: 磷酸神經(jīng)膜抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-VAV1(Tyr160) 磷酸化鳥苷酸轉(zhuǎn)換因子VAV1抗體 規(guī)格 0.1ml
Rabbit IgG/Biotin 生物素化兔IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 1ml
Inhibin Alpha 抑制素α抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cdc25B (Ser149) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25B抗體 規(guī)格 0.1ml
溴化已錠染色液 -紅色 1ml Sigma原料,自產(chǎn)
Wnt1 英文名稱: 信號(hào)通路Wnt1抗體 0.1ml
Dynorphin A 英文名稱: 腦啡肽A抗體 0.2ml
Anti-AEV(Avian Encephalomyelitis virus) 禽腦脊髓炎病毒AEV抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
SPARC 英文名稱: 富含半胱酸的酸性分泌蛋白抗體 0.1ml
ENPP7 英文名稱: 堿性鞘磷脂酶7抗體 0.1ml
抗B細(xì)胞粘附分子CD22抗體 Anti-CD22/fpc1/blcam 0.1ml
Anti-CD14/Biotin 生物素化CD14抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-GSK-3 Beta(Ser21) 磷酸化葡萄糖合成激酶3β抗體 GSK3α(Phospho-Ser21) 規(guī)格 0.1ml
CD5 CD5 多肽抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
線粒體活性氧產(chǎn)生速率(ROS)測(cè)試盒價(jià)格EDTA,乙二乙酸豨薟草βAMYLOID蛋白共沉淀分析試劑盒
咪唑籬欄網(wǎng)βAMYLOID蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒
L(+)-阿拉伯糖金果欖 RUNX3蛋白表達(dá)流式儀檢測(cè)試劑盒
去離子甲酰板栗殼載玻片RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
石蠟油九里香凍切片組織RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
乙酸火炭母石蠟切片組織RUNX3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒
無水乙酸鈉廣天仙子 載玻片βRUNX3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒
氯化蒲葵子 凍切片組織RUNX3蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測(cè)試劑盒