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二磷酸肌醇戊基磷酸激酶1(PPIP5K1)重組蛋白

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更新時間:2023-03-22 20:30:49瀏覽次數(shù):297

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應用領域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研研究實驗 英文名稱 Recombinant Diphosphoinositol Pentakisphosphate Ki
物種 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
二磷酸肌醇戊基磷酸激酶1(PPIP5K1)重組蛋白的相關產(chǎn)品:堿性鞘磷脂磷suan二酯mei(Alk-Smase)重組蛋白英文名稱:Recombina Alkaline Sphingomyelinase (Alk-Smase)蛋白激meiC相互作用蛋白1(PICK1)重組蛋白英文名稱:Recombina Protein Ieracting With C Kinase 1 (PICK1)磷suan烯

詳細介紹

商品介紹:

HISPPD2A; IPS1; VIP1; Histidine Acid Phosphatase Domain Containing 2A; InsP6/PP-IP5 kinase 1; Inositol hexakisphosphate and diphosphoinositol-pentakisphosphate kinase 1

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細胞定位::分泌

預測分子量:40.3kDa

實際分子量:44kDa(差異分析請參閱說明書)

片段與標簽:Met1~Gly326 with N-terminal His Tag

緩沖液成份:PBS, pH7.4, containing 0.01% SKL, 5% Trehalose.

性狀:凍干粉

純度:> 90%

等電點:5.0

應用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

二磷酸肌醇戊基磷酸激酶1(PPIP5K1)重組蛋白

Recombinant Diphosphoinositol Pentakisphosphate Kinase 1 (PPIP5K1)

Homo sapiens (Human,人)

蛋白表達及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細胞中,通過瞬時表達產(chǎn)生目標蛋白。

2.收集含有目標蛋白的部分(細胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關產(chǎn)品:

組織蛋白酶F(CTSF)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cathepsin F (CTSF)Mus musculus (Mouse,小鼠)

組織蛋白酶H(CTSH)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cathepsin H (CTSH)Homo sapiens (Human,人)

組織蛋白酶K(CTSK)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cathepsin K (CTSK)Bos taurus; Bovine (Cattle,牛)

組織蛋白酶S(CTSS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Cathepsin S (CTSS)Homo sapiens (Human,人)   
操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細胞或用細胞刮子刮下的貼壁細胞,將細胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復凍融。

HLA-DOA產(chǎn)品名稱: 組織相容性復合體2DOA抗體交叉反應: Human

DEFB114產(chǎn)品名稱: 防御suβ-114/β-defensin 114抗體交叉反應: Human

PD-L1產(chǎn)品名稱: 程序性死亡配體1(CD274)抗體交叉反應: Mouse, Rat

ZNF835產(chǎn)品名稱: 鋅指蛋白835抗體交叉反應: Human

ASB5產(chǎn)品名稱: 含錨蛋白重復序列-細胞因子信號物盒蛋白家族5抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Rabbit

SDS3產(chǎn)品名稱: 缺陷沉默因子3抗體交叉反應: Human, Mouse, Cow, Monkey

MMP24產(chǎn)品名稱: 基質(zhì)金屬蛋白mei-24抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Dog, Horse, Rabbit, Sheep

MRPS15產(chǎn)品名稱: 線粒體核糖體蛋白S15抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

MMP12產(chǎn)品名稱: 基質(zhì)金屬蛋白mei-12抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat

phospho-ATG9A (Ser735)產(chǎn)品名稱: 自噬相關蛋白9A抗體交叉反應: Human, Mouse, Rat, Pig, Cow   

二磷酸肌醇戊基磷酸激酶1(PPIP5K1)重組蛋白IgA-Fc斷片受體(FcaR)ELISA試劑盒FcaRIgA-Fc斷片受體elisa kitHuman Fc Fragment Of IgA Receptor(FcaR)ELISA Kit

Hyccin蛋白(HCC)ELISA試劑盒HCCHyccin蛋白ELISA試劑盒Human Hyccin(HCC)ELISA Kit

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HtrA絲氨suan肽mei1(HTRA1)ELISA試劑盒HTRA1HtrA絲氨suan肽mei1elisa檢測試劑盒Human HtrA Serine Peptidase 1(HTRA1)ELISA Kit

Hornerin蛋白(HRNR)ELISA試劑盒HRNRHornerin蛋白elisa kitHuman Hornerin(HRNR)ELISA Kit  
注意事項:

1、不同細胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應當根據(jù)細胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復,然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作 

 


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