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線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白

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更新時間:2023-03-22 15:20:34瀏覽次數(shù):246

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
主要用途 僅供科研實驗 英文名稱 Recombinant 5'-Nucleotidase, Mitochondrial (NT5M)
種屬 Homo sapiens (Human,人) 規(guī)格 10μg50μg200μg1mg5mg
品牌 研生    
線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白的相關(guān)產(chǎn)品:基質(zhì)金屬3(MMP3)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)基質(zhì)金屬3(MMP3)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metalloproteinase 3 (MMP3)基質(zhì)金屬3(MMP3)重組蛋白英文名稱:Recombina Matrix Metallopro

詳細(xì)介紹

商品介紹:

dNT-2; dNT2; mdN; 5'(3')-deoxyribonucleotidase, mitochondrial

酶與激酶

物種:Homo sapiens (Human,人)

來源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測分子量:25.9kDa

實際分子量:-(差異分析請參閱說明書)

片段與標(biāo)簽:Val38~Cys228 with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點:-

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格10μg50μg200μg1mg5mg   

公司產(chǎn)品僅供科研使用,不得用于臨床!

產(chǎn)品名稱

英文名稱

物種

線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白

Recombinant 5'-Nucleotidase, Mitochondrial (NT5M)

Homo sapiens (Human,人)

蛋白表達(dá)及純化:

1.培養(yǎng)500ml哺乳動物細(xì)胞,然后將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染到細(xì)胞中,通過瞬時表達(dá)產(chǎn)生目標(biāo)蛋白。

2.收集含有目標(biāo)蛋白的部分(細(xì)胞或培養(yǎng)上清)。

3.通過親和,離子交換,疏水及凝膠過濾等多種層析方法純化表達(dá)的重組蛋白。

4.通過SDS-PAGE電泳檢測每步結(jié)果并控制最終產(chǎn)品質(zhì)量。

5.通過Western-blot驗證目標(biāo)蛋白正確性。

圖片5.png

圖片1.png


相關(guān)產(chǎn)品:

羧肽酶B1(CPB1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase B1, Tissue (CPB1)Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

羧肽酶E(CPE)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase E (CPE)Homo sapiens (Human,人)

羧肽酶M(CPM)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase M (CPM)Mus musculus (Mouse,小鼠)

羧肽酶N1(CPN1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Carboxypeptidase N1 (CPN1)Homo sapiens (Human,人)   
操作步驟:

Ⅰ 實體組織蛋白的提取

1. 在每1mL 冷Lysis Buffer加入10 μL磷酸酶抑制劑, 1 μL蛋白酶抑制劑和 5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

2.  每100mg固體組織置于培養(yǎng)皿中,剪碎成3mm×3mm左右的小塊,加入0.5~1 mL冷 Lysis Buffer,玻璃勻漿器上下手動勻漿15次,注意低溫操作;

3. 取組織勻漿液轉(zhuǎn)移到1.5mL預(yù)冷的離心管,離心10000轉(zhuǎn)/分,4℃離心5 min;

4. 取上清轉(zhuǎn)移至新的預(yù)冷的離心管中,即為全蛋白提取物,蛋白定量(Bradford法、BCA法);

5. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

Ⅱ 培養(yǎng)細(xì)胞蛋白提取

1. 貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,吸去培養(yǎng)基后,加入10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS洗兩次,每次振搖數(shù)次以盡量去除培養(yǎng)液;

2. 懸浮培養(yǎng)的細(xì)胞或用細(xì)胞刮子刮下的貼壁細(xì)胞,將細(xì)胞及培養(yǎng)液移至離心管中, 1000轉(zhuǎn)/分離心10 min,再用10mL/150mm培養(yǎng)板的冷PBS,1000轉(zhuǎn)/分離心5 min洗兩次;

3. 在每 1mL冷 Lysis Buffer加入10μL磷酸酶抑制劑, 1μL蛋白酶抑制劑和5μL 100mM PMSF,混勻。冰上保存數(shù)分鐘待用。

4. 細(xì)胞洗滌后,轉(zhuǎn)至新的預(yù)冷的離心管中,加入上述配制好的冷Lysis Buffer,加入量如下表所示:

細(xì)胞數(shù)量

Lysis Buffer加入量

107個

0.5 mL~1 mL

5×106個

0.2 mL~0.5 mL

5.置于4℃搖床平臺上,溫和振蕩15 min;

6. 14,000rpm,4℃離心15min,取上清為全蛋白提取物, 蛋白定量(Bradford法、BCA法);

7. 分裝保存于-70℃,避免反復(fù)凍融。

GPR180產(chǎn)品名稱: G蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

TRF41產(chǎn)品名稱: DNA聚合meiΚ抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit

CYP1A2產(chǎn)品名稱: CYP1A2單克隆抗體交叉反應(yīng): Human

VCAM1產(chǎn)品名稱: 內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子(CD106)抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Pig, Rabbit, Sheep

BMP8b產(chǎn)品名稱: 骨形態(tài)發(fā)生蛋白8b抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Sheep

OA1產(chǎn)品名稱: 眼部白化相關(guān)蛋白OA1/蛋白偶聯(lián)受體143抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Sheep

DNAJC22產(chǎn)品名稱: DNAJC22蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Horse

PSF2產(chǎn)品名稱: PSF2蛋白抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Dog, Pig

應(yīng)用類型: Other英文名稱: PDHA1英文別名: Pyruvate dehydrogenase E1 component subunit alpha, somatic form, mitochondrial; ODPA_HUMAN; EC:1.2.4.1; PDHE1-A type I; pyruvate dehydrogenase E1 subunit alpha 1; PDHA; PDHAD; PHE1A; E1alpha; PDHCE1A; PDH-E1α;

GABRA5產(chǎn)品名稱: γ1受體α5/GABRα5抗體交叉反應(yīng): Human, Mouse, Rat, Chicken, Pig, Horse, Rabbit   

線粒體-5'-核苷酸酶(NT5M)重組蛋白T-細(xì)胞可誘導(dǎo)共刺激分子(ICOS)ELISA試劑盒ICOST-細(xì)胞可誘導(dǎo)共刺激分子elisa檢測試劑盒Human Inducible T-Cell Co Stimulator(ICOS)ELISA Kit

T-框蛋白6(TBX6)ELISA試劑盒TBX6T-框蛋白6ELISA試劑盒Human T-Box Protein 6(TBX6)ELISA Kit

T-框蛋白5(TBX5)ELISA試劑盒TBX5T-框蛋白5elisamei聯(lián)免疫試劑盒Human T-Box Protein 5(TBX5)ELISA Kit

T-框蛋白4(TBX4)ELISA試劑盒TBX4T-框蛋白4elisa檢測試劑盒Human T-Box Protein 4(TBX4)ELISA Kit

T-框蛋白3(TBX3)ELISA試劑盒TBX3T-框蛋白3elisa kitHuman T-Box Protein 3(TBX3)ELISA Kit  
注意事項:

1、不同細(xì)胞或組織樣品所需的固定時間有所不同,應(yīng)當(dāng)根據(jù)細(xì)胞或組織的種類以及組織塊的大小來調(diào)整固定時間。

2、雖然作用溫和,但能硬化組織,固定時間過久會導(dǎo)致組織變脆,切片時易碎。因此固定時間通常不宜超過 24 小時。

3、醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián)形成羧甲基,使抗原決定簇的三維構(gòu)象出現(xiàn)空間障礙。分子間交聯(lián)形成的網(wǎng)格結(jié)構(gòu)可能部分或 掩蓋某些抗原決定簇,使之不能充分暴露,可造成假陰性的染色,影響免疫組化結(jié)果。因此,4%固定的細(xì)胞或組織樣品在進行免疫組化檢測時,有時需要對抗原先進行修復(fù),然后才能進行免疫染色等后續(xù)操作。

4、本產(chǎn)品對人體有害,操作時請小心,并注意有效防護以避免直接接觸人體或吸入體內(nèi)。

5、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作 

 


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