詳細介紹
細胞特性:
1)】組織來源于實驗動物的正常眼組織。
2)細胞鑒定:細胞免疫熒光染色為陽性。
3)經鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
5)細胞生長方式:上皮樣,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
產品名稱:肺扁平上皮癌細胞;QG-56
規(guī)格:1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號:YS-02X9923
細胞生長實驗 :細胞生長良好,形態(tài)正常
儲存條件:2℃-8℃,避光儲存
運輸條件:冰袋冷藏運輸
公司產品僅用于科研
細胞培養(yǎng)步驟
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1) 準備RPMI-1640 培養(yǎng)基;優(yōu)質胎牛血清,10%;Glutamax(invitrogen 35050061),1%;Sodium pyruvate(invitrogen 11360070),1%;雙抗,1%。
2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。
二. 細胞處理:
1) 復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入250px皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
注意事項:
(1)凍存前細胞狀態(tài),細胞最好在對數生長期,細胞密度適合,剛剛發(fā)生細胞融合,過密或連成片的細胞狀態(tài)不好,而且消化時不容易分散;
(2)凍存的密度不宜過低,10的6次方-7次方的數量級比較好,我凍存的細胞一般T25培養(yǎng)瓶(5*107),一瓶凍一管(1.5ml凍存管),10cm培養(yǎng)皿(大概10的8次方個細胞)分成兩管。
(3)消化和吹打,切忌胰酶消化過度,吹打不可太用力,最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦,不是加入凍存液再吹打。
(4)離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對于腫瘤細胞株而言要求不是很嚴格,我從10%-90%都用過,問題不大,個人認為10%-20%可以了,能節(jié)約處就節(jié)約點嘛!另外,凍存液可以在處理細胞前配置,放在4度冰箱預冷。細胞離心后直接用預冷的凍存液重懸,移入凍存管。
(5)關于“慢凍",傳統的方法,LLC細胞凍存管用棉花包好,4度2h,-20度2h或更長,-80度過夜,最后液氮。對于條件較好的實驗室和細胞凍存數量多的實驗室,推薦使用程序降溫盒,內裝異丙醇,在-80度并內可以逐漸降溫,很方便,省了包棉花、4度、-20度了。
使用步驟:
一)準確稱量試劑:根據不同的菌類和用途,選擇適宜的培養(yǎng)基,培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
(二)校正pH值:將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內,標記劃線,加熱溶解,補充水分,測定酸堿度,常用pH6.8~8.0的精密試紙或酸度計測定。用1N NaOH和1N HCl調節(jié)pH值到適宜范圍內。
(三)過濾:將玻璃漏斗置鐵架上,再用人子宮成纖維細胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中,將上述培養(yǎng)基倒入其中過濾至透明。
(四)分裝:將過濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶內(試管內每支裝5mL;三角瓶中裝100~150ml),塞好棉塞用牛皮紙包扎好,準備滅菌。
(五)滅菌:培養(yǎng)基的滅菌,常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營養(yǎng)細胞在水中煮沸后即被殺死,但細菌的芽胞有較強的抗熱性,須經高壓蒸汽滅菌才能達到*滅菌的目的。根據蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理,即壓力越大,蒸汽溫度就越高。因此,在同一溫度條件下,采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下,菌體吸收水分后,其蛋白質易于凝固變性,因為蒸汽的穿透力強,殺菌效果好。
VEGF-B/FITC 熒光素標記血管內皮生長因子B抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
CD82/KAI1 peptide 轉移抑制蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
CD38抗體(人) CD38 0.1ml
Substance P 英文名稱: P物質抗體 0.1ml
EIF5 英文名稱: 真核翻譯起始因子5抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Gria2 (Ser880) 磷酸化谷受體2抗體 規(guī)格 0.1ml
CD82/KAI1 peptide 轉移抑制蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
IL-10 ELISA KIT 大鼠白介素-10Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
DDB2 損傷DNA結合蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh NEDD4 神經前體細胞發(fā)育下調蛋白4抗體 規(guī)格 0.2ml
Human Leukemia inhibitory factor,LIF ELISA kit 人白血病抑制因子 96T
TBCE 英文名稱: 微管蛋白特定伴侶蛋白E抗體 0.2ml
Carbonic anhydrase 3 英文名稱: 碳酸酐酶3抗體 0.2ml
DDB2 損傷DNA結合蛋白2抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Donkey Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的驢抗豚鼠IgG 0.1ml
FGF1 英文名稱: 酸性成纖維細胞生長因子抗體 0.1ml
大腸埃希桿菌O抗體 EPEC-IgG O 0.2ml
PEA15/FITC 熒光素標記星形膠質細胞PEA15抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Tau protein(Thr181) 磷酸化微管相關蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml
rec Protein A/FITC 熒光素標記重組純化蛋白AMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
肺扁平上皮癌細胞;QG-56凍切片組織P27蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次人普通急性白血病抗原(CALLA)ELISA試劑盒, CALLA ELISA kit
石蠟切片組織P27蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次人BH3結構域凋亡誘導蛋白(Bid)ELISA試劑盒,Bid ELISA kit
載玻片細胞P27蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒,AACT ELISA kit
凍切片組織P27蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人低密度脂蛋白(LDL)ELISA試劑盒,LDL ELISA
石蠟切片組織P27蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒,sRANKL ELISA
細胞P27蛋白表達比色法定量檢測試劑盒10/50 次人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試劑盒,
細胞P27蛋白表達熒光定量檢測試劑盒10/50 次人蛋白酶3特異性抗中性粒胞質抗體(PR3-ANCA)ELISA試劑盒,
P27蛋白表達西方雜交分析試劑盒5次人金葡菌腸素(SE)ELISA試劑盒,
P27蛋白共沉淀分析試劑盒5次人堿性胎兒蛋白(BFP)ELISA試劑盒,
P27蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒25次小鼠17羥皮質類固醇(17-OHCS)ELISA試劑盒,
細胞P35蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒10/20次小鼠白介素6(IL-6)ELISA試劑盒,
載玻片細胞P35蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶活肽(PACAP)ELISA試劑盒,
凍切片組織P35蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠腫瘤特異生長因子/腫瘤相關因子(TGSF)ELISA試劑盒,
石蠟切片組織P35蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠β葡萄糖醛酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒,
載玻片細胞P35蛋白表達NBT顯色光學顯微鏡檢測試劑盒10/20次小鼠促卵泡素(FSH)ELISA試劑盒,