產(chǎn)品名稱:3-磷酸甘油酸激酶(PGK)測(cè)試盒品牌
規(guī)格 : 50管/48樣、100管/96樣
測(cè)試方法:微量法、紫外分光光度法
貨號(hào):YS-01S6469
測(cè)定意義
3-磷酸甘油酸激酶是糖酵解的關(guān)鍵酶,廣泛存在于動(dòng)植物和微生物體內(nèi),催化1,3-二磷酸甘油酸轉(zhuǎn)變?yōu)?-磷酸甘油酸,產(chǎn)生1分子ATP,具有影響DNA復(fù)制和修補(bǔ)及刺激病毒RNA合成等生物學(xué)功能,廣泛應(yīng)用于藥物靶標(biāo)設(shè)計(jì)。
測(cè)定原理
3-磷酸甘油酸激酶催化3-磷酸甘油酸和ATP產(chǎn)生1,3-二磷酸甘油酸和ADP,1,3-二磷酸甘油酸在3-磷酸甘油醛脫氫酶和NADH作用下產(chǎn)生3-磷酸甘油醛、NAD和磷酸,340nm處的吸光度變化反映了3-磷酸甘油酸激酶的活性的高低。
自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器
天平、低溫離心機(jī)、研缽、紫外分光光度計(jì)、1 mL石英比色皿。
【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來(lái)不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購(gòu)買(mǎi)說(shuō)明!
樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過(guò)濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 。
4 ). 加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
特點(diǎn):
(1)應(yīng)用廣泛
由于各種各樣的無(wú)機(jī)物和有機(jī)物在紫外可見(jiàn)區(qū)都有吸收,因此均可借此法加以測(cè)定。到目前為止,幾乎化學(xué)元素周期表上的所有元素(除少數(shù)放射性元素和惰性元素之外)均可采用此法。
(2)靈敏度高
由于相應(yīng)學(xué)科的發(fā)展,使新的有機(jī)顯色劑的合成和研究取得可喜的進(jìn)展,從而對(duì)元素測(cè)定的靈敏度大大提高了一步。特別是由于多元絡(luò)合物和各種表面活性劑的應(yīng)用研究,使許多元素的摩爾吸光系數(shù)由原來(lái)的幾萬(wàn)提高到幾十萬(wàn)。相對(duì)于其它痕量分析方法而言,光度法的精密度和準(zhǔn)確度一致*是比較高的。不但在實(shí)際工作中光度法被廣泛采用,在標(biāo)準(zhǔn)參考物質(zhì)的研制中,它更受重視,很多光度分析法已制定成為標(biāo)準(zhǔn)方法。
(3)選擇性好
目前已有些元素只要利用控制適當(dāng)?shù)娘@色條件就可直接進(jìn)行光度法測(cè)定,如鈷、鈾、鎳、銅、銀、鐵等元素的測(cè)定,已有比較滿意的方法了。
(4)準(zhǔn)確度高
對(duì)于一般的分光光度法來(lái)說(shuō),其濃度測(cè)量的相對(duì)誤差在1-3%范圍內(nèi),如采用示差分光度法測(cè)量,則誤差往往可減少到千分之幾。
(5)適用濃度范圍廣
可從常量(1-50%)(尤其是使用示差法)到痕量(10-6-10-8%)(經(jīng)預(yù)富集后)。
(6)分析成本低、操作簡(jiǎn)便、快速
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,各試劑均應(yīng)平衡至室溫(試劑不能直接在37℃溶解);試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。實(shí)驗(yàn)前應(yīng)預(yù)測(cè)樣品含量,如樣品濃度過(guò)高時(shí),應(yīng)對(duì)樣品進(jìn)行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍,計(jì)算時(shí)再乘以相應(yīng)的稀釋倍數(shù)。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl(在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液(同檢測(cè)A工作液) 100μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干(也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng),此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
Anti-TPO/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
PP-2B alpha 1 蛋白磷酸酯酶-2B 催化亞單位(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
抗甲狀腺過(guò)氧化物酶抗體 Anti-TPO 0.1ml
AP180 英文名稱: 裝配銜接蛋白180抗體 0.2ml
EGR3 英文名稱: 早期生長(zhǎng)反應(yīng)蛋白3抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh phospho-ITGB4(Tyr1530) 磷酸化整合素β4抗體 規(guī)格 0.1ml
PP-2B alpha 1 蛋白磷酸酯酶-2B 催化亞單位(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
pre-X protein[Hepatitis B virus]N-Terminus 乙肝病毒pre-X蛋白抗原(N端)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
Anti-Aurora A/B/C 有絲分裂激酶A/B/C抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Akt(Thr308) 磷酸化蛋白激酶B抗體 規(guī)格 0.1ml
MBP 濃縮液 0.1ml 進(jìn)口分裝
UNC93B 英文名稱: 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜蛋白UNC93B抗體 0.2ml
Choline kinase alpha 英文名稱: 乙醇胺激酶α抗體 0.1ml
Anti-Aurora A/B/C 有絲分裂激酶A/B/C抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
S100A11 英文名稱: S100鈣結(jié)合蛋白A11抗體 0.1ml
EpCAM 英文名稱: 上皮特異性抗原抗體 0.1ml
信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子2抗體 Anti-STAT2 0.2ml
anti-Rarres2/TIG2/FITC 熒光素標(biāo)記視黃酸受體應(yīng)答蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-MAP2 (Thr1620/1623) 磷酸化微管相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格 0.1ml
Nociceptin receptor 孤菲肽受體(痛敏肽受體)(抗原)Multi-class antibodies規(guī)格: 0.5mg
3-磷酸甘油酸激酶(PGK)測(cè)試盒品牌氧化鎂碳酸鈉合劑獐牙菜苷 IL-9(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
苯乙(>98%,BR)豆腐果苷 IL-10(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
L-乳酸乙酯(>99%,GC)石杉?jí)A甲 IL-11(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
溴乙烷(>98%,BR)川陳皮素 IL-12 P35(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
月桂酸乙酯(>98%,BR)告達(dá)亭苷元 IL-12 P40(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
乙基曙紅(>95%,BS)青陽(yáng)參苷元A IL-13(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
沒(méi)食子酸乙酯青陽(yáng)參苷元B IL-14(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)
煙酸乙酯(>98%,BR)補(bǔ)骨脂酚 IL-15(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)