腎癌Wilms細(xì)胞;G-401公司正在銷售的產(chǎn)品：凝集蛋白家族10抗體（肝）Anti- Beta-Actin/FITC 熒光素標(biāo)記β-肌動(dòng)蛋白抗體IgG
銅代謝結(jié)構(gòu)域蛋白7抗體Anti-F-Actin/FITC 熒光素標(biāo)記抗F-肌動(dòng)蛋白抗體
COMM結(jié)構(gòu)域蛋白4抗體Anti- Alpha-ACTN4/FITC 熒光素標(biāo)記抗α-輔肌動(dòng)蛋白4抗體IgG
Cordon bleu蛋白樣1抗體Anti

細(xì)胞特性：

1)】組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常眼組織。

2)細(xì)胞鑒定：細(xì)胞免疫熒光染色為陽(yáng)性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：上皮樣，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
產(chǎn)品名稱：腎癌Wilms細(xì)胞;G-401

規(guī)格：1×10?cells/T25培養(yǎng)瓶
貨號(hào)：YS-02X9845

細(xì)胞生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn) ：細(xì)胞生長(zhǎng)良好，形態(tài)正常

儲(chǔ)存條件：2℃-8℃，避光儲(chǔ)存

運(yùn)輸條件：冰袋冷藏運(yùn)輸
公司產(chǎn)品僅用于科研

 

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：

1） 準(zhǔn)備RPMI-1640 培養(yǎng)基；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%；Glutamax（invitrogen 35050061），1%；Sodium pyruvate（invitrogen 11360070），1%；雙抗，1%。

2） 培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3） 凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。

二． 細(xì)胞處理：

1） 復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入250px皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過(guò)夜）。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

2） 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

注意事項(xiàng)：

（1）凍存前細(xì)胞狀態(tài)，細(xì)胞最好在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，細(xì)胞密度適合，剛剛發(fā)生細(xì)胞融合，過(guò)密或連成片的細(xì)胞狀態(tài)不好，而且消化時(shí)不容易分散；

（2）凍存的密度不宜過(guò)低，10的6次方-7次方的數(shù)量級(jí)比較好，我凍存的細(xì)胞一般T25培養(yǎng)瓶（5*107），一瓶?jī)鲆还埽?.5ml凍存管），10cm培養(yǎng)皿（大概10的8次方個(gè)細(xì)胞）分成兩管。

（3）消化和吹打，切忌胰酶消化過(guò)度，吹打不可太用力，最好不要吹出好多泡泡。消化后立即加入*培養(yǎng)基吹打哦，不是加入凍存液再吹打。

（4）離心后加入凍存液。凍存液中FBS的用量對(duì)于腫瘤細(xì)胞株而言要求不是很?chē)?yán)格，我從10%-90%都用過(guò)，問(wèn)題不大，個(gè)人認(rèn)為10%-20%可以了，能節(jié)約處就節(jié)約點(diǎn)嘛！另外，凍存液可以在處理細(xì)胞前配置，放在4度冰箱預(yù)冷。細(xì)胞離心后直接用預(yù)冷的凍存液重懸，移入凍存管。

（5）關(guān)于“慢凍"，傳統(tǒng)的方法，LLC細(xì)胞凍存管用棉花包好，4度2h，-20度2h或更長(zhǎng)，-80度過(guò)夜，最后液氮。對(duì)于條件較好的實(shí)驗(yàn)室和細(xì)胞凍存數(shù)量多的實(shí)驗(yàn)室，推薦使用程序降溫盒，內(nèi)裝異丙醇，在-80度并內(nèi)可以逐漸降溫，很方便，省了包棉花、4度、-20度了。

使用步驟：

一）準(zhǔn)確稱量試劑：根據(jù)不同的菌類和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。

（二）校正pH值：將稱量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1N NaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。

（三）過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用人子宮成纖維細(xì)胞*培養(yǎng)基紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。

（四）分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)（試管內(nèi)每支裝5mL；三角瓶中裝100～150ml），塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。

（五）滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。

CD99/E2 antigen/FITC 熒光素標(biāo)記CD99抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結(jié)合蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

芳香烴受體抗體  AHR 0.1ml

ZNF239 英文名稱： 鋅指蛋白239抗體 0.2ml

DP1 英文名稱： 轉(zhuǎn)錄因子DP1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh phospho-FAK(Tyr925) 磷酸化粘著斑激酶抗體 規(guī)格 0.1ml

CTBP1(C-terminal binding protein 1) C端結(jié)合蛋白1抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor) 脫羧酶蛋白體36 cxorf36抗原Multi-class antibodies規(guī)格： 0.5mg

 CCR5 細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh PBEF1(CT) 內(nèi)脂素/內(nèi)臟脂肪素(C端抗體) 規(guī)格 0.1ml

LILRB3 Kit Human 人 LILRB3 ELISA配對(duì)抗體 ELISA

TG 英文名稱： 兔抗甲狀腺球蛋白 0.1ml

CXorf36 英文名稱： 脫羧酶蛋白體36抗體 0.2ml

 CCR5 細(xì)胞表面趨化因子受體5抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rabbit  Bov IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗IgG 0.1ml

FOLR2 英文名稱： 胎盤(pán)酸受體蛋白2抗體 0.1ml

胰高血糖素樣肽-1抗體  GLP-1 0.1ml

 phospho Histone H1,4(pSer27)/FITC 熒光素標(biāo)記抗磷酸化組蛋白H1,4樣蛋白抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-SHP2/SHIP2(Tyr477) 磷酸化蛋白酪磷酸酶2抗體 規(guī)格 0.1ml

Rabbit  Goat IgM 兔抗羊IgM (親和層析純化)Multi-class antibodies規(guī)格： 1mg
腎癌Wilms細(xì)胞;G-401聚乙二醇細(xì)胞融合試劑盒10次小鼠α2纖溶酶抑制物（α2-PI）ELISA試劑盒,

電擊法細(xì)胞融合試劑盒10次小鼠甲狀腺素抗體（TAb）ELISA試劑盒,

甲基纖維素細(xì)胞克隆試劑盒10/50/80次小鼠促性腺素釋放素（GnRH）ELISA試劑盒,

軟瓊脂細(xì)胞克隆試劑盒10/20次α-內(nèi)肽（α-EP）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

藍(lán)色熒光染色體核型分析試劑盒100次胰腺癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

熒光細(xì)胞流式儀分析試劑盒10次生長(zhǎng)素釋放多肽（GHRP） ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

線粒體試劑專題人肽釋放酶11（KLK 11）ELISA試劑盒, KLK 11 ELISA kit

名稱規(guī)格小鼠基質(zhì)衍生因子1a（SDF-1a/CXCL12）ELISA試劑盒,

純化線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測(cè)定試劑盒100次小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒胞質(zhì)抗體IgG（MPO-ANCA IgG）ELISA試劑盒,

活體細(xì)胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測(cè)定試劑盒20次小鼠T活化連接蛋白（LAT）ELISA試劑盒,

*線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測(cè)定試劑盒20次小鼠狀腺原（T3）ELISA試劑盒,

活體組織線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測(cè)定試劑盒10次腺病抗原（ADV-Ag）ELISA試劑盒--動(dòng)物，人

/酵母細(xì)胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測(cè)定試劑盒20次3,5-二溴-L-酪

凍切片線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRM）測(cè)定試劑盒20次L-脯芐酯鹽酸鹽

純化線粒體內(nèi)膜功能/膜電位紅色熒光（TMRE）測(cè)定試劑盒100次人丙（LPA）ELISA試劑盒,