技術(shù)文章
何促進(jìn)原代細(xì)胞生長(zhǎng)并抑制分化?
閱讀:392 發(fā)布時(shí)間:2018-1-9原代細(xì)胞為了保持hESC存活且具有多能性,研究人員通常在滋養(yǎng)層細(xì)胞(也就是一層小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)上培養(yǎng),或者在微載體上成簇培養(yǎng)。但是在這些基質(zhì)上培養(yǎng)干細(xì)胞是相當(dāng)昂貴的,而且培養(yǎng)物不能在很長(zhǎng)時(shí)間內(nèi)保持未分化狀態(tài),盡管所有必需的生長(zhǎng)因子都存在。這種培養(yǎng)基能夠在無滋養(yǎng)層的條件下長(zhǎng)時(shí)間維持神經(jīng)細(xì)胞的生長(zhǎng)和正常表型。在研究過程中,研究人員注意到并非所有細(xì)胞都分化了。他們懷疑是培養(yǎng)基的選擇導(dǎo)致了這種現(xiàn)象,于是他們開始集中精力研究培養(yǎng)基如何促進(jìn)干細(xì)胞生長(zhǎng)并抑制分化。
使用這種新的培養(yǎng)基,研究小組檢驗(yàn)了三種不同的hESC系。他們利用熒光激活細(xì)胞分選(FACS)在7周和20周后分析了培養(yǎng)物,發(fā)現(xiàn)90%的細(xì)胞仍維持多能性。這項(xiàng)突破為在計(jì)算機(jī)化的自動(dòng)系統(tǒng)中大規(guī)模擴(kuò)增胚胎干細(xì)胞創(chuàng)造了可能性。此外,通過改變培養(yǎng)條件,還可能進(jìn)一步指導(dǎo)干細(xì)胞長(zhǎng)成特定的細(xì)胞類型,用于研究或病人的移植。
為了驗(yàn)證他們的理論,研究小組定制了培養(yǎng)基。他們?cè)贜eurobasal培養(yǎng)基中加入了血清替代物,還加入了干細(xì)胞生長(zhǎng)所需的蛋白,包括原代細(xì)胞外基質(zhì)組分、神經(jīng)營養(yǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子2和活化素A。研究人員在常規(guī)的無血清培養(yǎng)基和定制培養(yǎng)基中培養(yǎng)了hESC。三個(gè)星期之后,定制培養(yǎng)基中存在更多的未分化hESC細(xì)胞。
Diosimin HPLC≥98% 20mg/支 地奧司明
Typhaneoside HPLC≥98% 20mg/支 香蒲新苷
Harpagoside HPLC≥98% 20mg/支 哈巴俄苷
harpgide HPLC≥98% 20mg/支 哈巴苷
Angoroside C HPLC≥98% 20mg/支 安格洛甙C
10-Deacetyl baccatin HPLC≥98% 20mg/支 10-脫乙酰巴卡亭
Timosaponin b- II HPLC≥98% 20mg/支 知母皂苷BII
原代細(xì)胞