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農(nóng)藥殘留量快速檢測(cè)-酶抑制率法(分光光度法)
閱讀:1551 發(fā)布時(shí)間:2015-11-10農(nóng)藥殘留量快速檢測(cè)-酶抑制率法(分光光度法)
在一定條件下,有機(jī)磷和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用,其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正比。正常情況下,酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物(乙酰膽堿)水解,其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng),產(chǎn)生黃色物質(zhì),用分光光度計(jì)在412nm處測(cè)定吸光度隨時(shí)間的變化值,計(jì)算出抑制率,通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的存在。
試劑
*pH8.0緩沖溶液分別取11.9g無(wú)水磷酸氫二鉀與3.2g磷酸二氫鉀,用1000mL蒸餾水溶解。
*顯色劑分別取160mg二硫代二硝基苯甲酸(DTNB)和15.6mg碳酸氫鈉,用20mL緩沖溶液溶解,4℃冰箱中保存。
*底物:取25.0mg硫代乙酰膽堿,加3.0mL蒸餾水溶解,搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>
*乙酰膽堿酯酶根據(jù)酶的活性情況,用緩沖溶液溶解,3min的吸光度變化ΔA0值應(yīng)控制在0.3以上。搖勻后置4℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>