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肥大細(xì)胞(甲苯胺藍(lán)Toluidine Blue O)染色液的操作步驟

時(shí)間:2021-1-22閱讀:5042
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

肥大細(xì)胞(Mast cell)是疏松結(jié)締內(nèi)常見(jiàn)的細(xì)胞,常成群的沿著小和淋巴管分布,也常見(jiàn)于支氣管和胰腺的小葉間導(dǎo)管周圍,一般細(xì)胞較大,直徑約為20-30μm,呈圓形或橢圓形,胞核較小、胞質(zhì)內(nèi)充滿粗大且具有異染性嗜酸性顆粒。

甲苯胺藍(lán)(Toluidine Blue O)中的陽(yáng)離子有染色作用, 細(xì)胞的酸性物質(zhì)與其中的陽(yáng)離子相結(jié)合而被染色。甲苯胺藍(lán)還含有兩個(gè)助色團(tuán),能促使染料產(chǎn)生電離成鹽類, 幫助發(fā)色團(tuán)對(duì)產(chǎn)生染色力, 使切片上的細(xì)胞著色,可染細(xì)胞核使之呈藍(lán)色。肥大細(xì)胞顆粒呈紫紅色,其他呈藍(lán)色。

操作步驟

取新鮮立即固定于10%中性固定液中,常規(guī)脫水包埋。

切片厚度4-5μm,常規(guī)脫蠟至水。

系列乙醇各1min,自來(lái)水洗2min。

Toluidine Blue O Stain,浸染1530min。

自來(lái)水稍洗。

TBO分化液分化,直至細(xì)胞核和顆粒清晰,可在顯微鏡下控制。

自來(lái)水稍洗,濾紙吸干或吹風(fēng)機(jī)吹干水分。

95%乙醇1min,無(wú)水乙醇2次,每次2min。

二甲苯透明,中性樹膠封固。

 染色結(jié)果:

肥大細(xì)胞顆粒 紫藍(lán)色

背景 淡藍(lán)色

注意事項(xiàng):

針對(duì)于胃粘膜、軟骨等較難著色的染色,浸染于甲苯胺藍(lán)染色液的時(shí)間應(yīng)相應(yīng)延長(zhǎng)。

應(yīng)注意要新鮮,取出后立即固定。

甲苯胺藍(lán)染色后不宜采用低濃度乙醇脫水,否則容易導(dǎo)致褪色。

分色后應(yīng)入95%乙醇、無(wú)水乙醇、二甲苯的時(shí)間不宜過(guò)久,否則容易導(dǎo)致褪色。

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