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菌莢膜的鑒定對的分型和鑒別有至關重要的作用,莢膜是在生存過程中在細胞壁外面形成的粘液性物質,具有保護抵抗吞噬和消化的作用,可增加的侵襲力。莢膜不易被普通染色法染色,需經(jīng)染色法染色后才能著色,易于觀察,莢膜染色液(Hiss法)又稱硫酸銅染色液,經(jīng)該染色液染色后,莢膜被染成藍紫色,被染成深藍色。
用途:用于菌體莢膜的染色。
操作步驟
1.涂片:在潔凈無油膩的玻片中央放一小滴蒸餾水(或用接種環(huán)挑1-2滴水),用無菌的接種環(huán)挑取少量菌種與水滴充分混勻,涂成極薄的菌膜,涂布面積約1cm2 。
2.干燥:涂片在室溫下使其自然干燥,也可以小心地在酒精燈上高處微微加熱,使水分蒸發(fā),但切勿緊靠火焰或加熱時間過長,以防標本烤枯而變形。
3.固定:手執(zhí)玻片一端,有菌膜的一面朝上,通過微火三次(手指觸摸反面不燙手為宜),待玻片冷卻后,再加染色液。
4.染色:玻片置于玻片擱架上,加適量(以蓋滿菌膜為度)草酸銨結晶紫(或石炭酸復紅染液)于菌膜部位,染色1-2min。
5.水洗:斜置載玻片,在自來水(或洗瓶)下用小股水流沖洗,直至洗下的水呈無色為止。
6.干燥:自然干燥或用吸水紙吸去涂片上的水,用吸水紙時切勿將菌體擦掉。
7.鏡檢:用高倍鏡和油鏡觀察并繪形態(tài)并繪圖于記錄表中。
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