Fe3O4-NH2氨基化四氧化三鐵納米粒子的細(xì)胞性等級

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齊岳生物MTT法評價Fe3O4-NH2納米粒子的性分級

將配制好的五組不同濃度的Fe3O4溶液6.40、12.80、25.60、51.20、102.4 μg/mL以及對照組六組溶液各取100 μL加入到96孔板的中間60個孔中，每個不同的濃度都加6個復(fù)孔，培養(yǎng)20 h后，加入100 μL濃度為0.5 mg/mL MTT，培養(yǎng)4 h，將上層的培養(yǎng)液吸去之后，每個孔中分別加入110 μL的DMSO，振蕩5 min，將MTT與活細(xì)胞之間產(chǎn)生的甲臜*溶解，然后用酶標(biāo)儀在490 nm處測定不同濃度下的吸光度。計算細(xì)胞活力，評價Fe3O4溶液的性大小。

 Fe3O4-NH2的細(xì)胞性評價
根據(jù)酶標(biāo)儀測得的每孔細(xì)胞吸光度值(A)，按照公式計算細(xì)胞相對增殖率（RGR）：
RGR=實(shí)驗(yàn)組A/隱性對照組A×                 
依據(jù)得到的RGR值判斷納米材料的細(xì)胞性等級，RGR值：≥為0級，75%~99%為Ⅰ級，50%~74%為Ⅱ級，25%~49%為Ⅲ級，1%~24%為Ⅳ級，0時為Ⅴ級。0~1級沒有細(xì)胞性，2級具有輕度細(xì)胞性，3~4級為中度細(xì)胞性，5級則為重度細(xì)胞性。MTT法進(jìn)行細(xì)胞的活性檢測結(jié)果見表1，其結(jié)果同樣顯示Fe3O4的細(xì)胞性呈濃度依賴型，隨著0、6.40、12.80、25.60、51.20、102.4 μg/mL 六組濃度的依次上升， RGR值呈現(xiàn)出下降的趨勢，細(xì)胞活力逐漸降低。SPSS統(tǒng)計分析結(jié)果與性分級見表2，從表2中可以看出作用20 h后，與對照組相比，51.20、102.4 μg/mL兩組的細(xì)胞活力下降，細(xì)胞活力分別為65.73%和36.77%，將各個濃度的細(xì)胞性進(jìn)行分級之后發(fā)現(xiàn)，在6.40、12.80、25.60 μg/mL幾組較低濃度組的細(xì)胞性都為Ⅰ級，認(rèn)為在這幾組濃度值當(dāng)中，F(xiàn)e3O4-NH2不表現(xiàn)出細(xì)胞性；在51.20 μg/mL中分級為Ⅱ級，認(rèn)為具有較輕細(xì)胞性，應(yīng)結(jié)合細(xì)胞形態(tài)綜合評價；在102.4 μg/mL中分級為Ⅲ級，有較高的細(xì)胞性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明濃度低于51.20 μg/mL時，F(xiàn)e3O4-NH2具有較好生物相容性，在生物醫(yī)學(xué)應(yīng)用方面具有較高的性。

 結(jié)論：以共沉淀法制備了Fe3O4納米粒子，APTES經(jīng)水解，在 Fe3O4納米粒子表面修飾上了氨基，制備了Fe3O4-NH2納米粒子，經(jīng)TEM和FT-IR表征，納米粒子分散性，氨基成功修飾在了納米粒子的表面。以胃SGC-7901為目的細(xì)胞，依據(jù)RGR值考察了Fe3O4-NH2納米粒子的細(xì)胞性等級，結(jié)果顯示，在濃度范圍內(nèi)，細(xì)胞死亡率與Fe3O4-NH2納米粒子的濃度成正相關(guān)，F(xiàn)e3O4-NH2納米粒子的濃度越大，對細(xì)胞的性也越大，細(xì)胞的死亡率也越高，低劑量的情況下，F(xiàn)e3O4-NH2納米粒子的細(xì)胞性相對較小。低濃度的Fe3O4-NH2納米顆粒具有較好的生物相容性，可以被應(yīng)用在生物醫(yī)藥領(lǐng)域。

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