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綠色熒光標(biāo)記人源乙?;兔芏戎鞍?/strong>產(chǎn)品簡介:
LDL是由極低密度脂蛋白(VLDL)轉(zhuǎn)變而來,主要功能是把Cholesterol運輸?shù)饺砀魈幖?xì)胞,運輸?shù)礁闻K合成膽酸,其可用于研究受體介導(dǎo)的內(nèi)吞作用過程,尤其是在動脈粥樣硬化等疾病中,其血漿來源的LDL可用于研究LDL在功能和代謝中的氧化作用。
乙酰化的LDL是修飾LDL中的一類,LDL含有未修飾的載脂蛋白,可以用來研究正常Cholesterol的轉(zhuǎn)運和內(nèi)吞作用。當(dāng)LDL載脂蛋白的賴氨酸殘基被乙?;揎椇?,LDL復(fù)合物不再與LDL受體結(jié)合,但是,修飾型LDL更容易與內(nèi)皮細(xì)胞和小膠質(zhì)神經(jīng)細(xì)胞的“scavenger"受體結(jié)合。因此,Ac-LDL可用來研究上述細(xì)胞的功能。
人源乙酰化低密度脂蛋白(Human Acetylated Low Density Lipoprotein, Human Ac-LDL),來自健康人源血漿LDL,Hepatitis C,HIV-I和HIV-II抗體檢測均為陰性。當(dāng)DiO-Ac-LDL標(biāo)記細(xì)胞后,在溶酶體酶的作用下,脂蛋白被降解,而DiO在細(xì)胞內(nèi)膜聚集,從而可以用來檢測修飾型LDL的吸收情況??梢杂脕順?biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞和內(nèi)皮祖細(xì)胞(EPC),可用來鑒定并分選這些細(xì)胞,以及用來研究不同細(xì)胞系對修飾化LDL的內(nèi)吞作用。我司提供的DiO-Ac-LDL,每個批次均經(jīng)過牛大動脈內(nèi)皮細(xì)胞和小鼠巨噬細(xì)胞的標(biāo)記檢測來評估產(chǎn)品的標(biāo)記特異性,從而保證結(jié)果的一致性。
本品為綠色熒光標(biāo)記人源乙?;兔芏戎鞍?/strong>(Human DiO-Ac-LDL)為無菌包裝,可以直接稀釋使用。除提供Human DiO-Ac-LDL,我們還提供不帶標(biāo)記的Ac-LDL,Ox-LDL(氧化修飾)以及不經(jīng)修飾的LDL等。
產(chǎn)品屬性:
純度:>98%
濃度:0.8-3.0 mg/ml
外觀:乳狀液體
緩沖液組分:0.02 mM EDTA in PBS, pH 7.4
運輸與保存方法:冰袋運輸。4℃保存,建議避光,6周穩(wěn)定。千萬不可凍存
實驗步驟:
1. 在生長培養(yǎng)基中將DiO-Ac-LDL稀釋至20-50ug/ml;
2. 將其加入到細(xì)胞中37 oC溫育4小時;
3. 去掉培養(yǎng)基;
4. 用無探針的緩沖液沖洗;
5. 通過熒光顯微鏡觀察并/或者將細(xì)胞通過Trypsin(或者EDTA)進(jìn)行分類;
6. 熒光顯微鏡:用標(biāo)準(zhǔn)FITC激發(fā)進(jìn)行觀察 (或者建議用波長激發(fā):484nm、發(fā)射:501nm)。如果需要,用3%甲醛在PBS中固定。切勿使用甲醇或丙酮進(jìn)行固定,因為DiO溶于有機溶劑。
注意事項:
1本品的稀釋工作液極不穩(wěn)定,建議即配即用;
2長期貯存可能會有沉淀析出,屬于正常現(xiàn)象,低速離心2 min去除沉淀即可使用;
3為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
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