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分析型液相色譜系統(tǒng)是有五大部分構(gòu)成

時間:2016-3-25 閱讀:1008
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     分析型液相色譜系統(tǒng)是有五大部分構(gòu)成:動力系統(tǒng),進(jìn)樣系統(tǒng),分離系統(tǒng),檢測系統(tǒng),數(shù)據(jù)分析和記錄系統(tǒng)構(gòu)成。其中動力系統(tǒng)是指泵;進(jìn)樣系統(tǒng)是指六通閥和進(jìn)樣針,或者自動進(jìn)樣器;分離系統(tǒng)是指色譜柱;檢測系統(tǒng)是指檢測器,一般有紫外檢測器,熒光檢測器,示差折光檢測器,MS檢測器等等;記錄系統(tǒng)是指電腦工作站等,而連接這些設(shè)備的都是由一根根不銹鋼管或者PEEK管構(gòu)成。
    1、動力系統(tǒng):
    分析型液相色譜系統(tǒng)的動力,實際上是鋼瓶中氣體的壓力。而液體,它只有通過泵的轉(zhuǎn)動而使之流動。我們做一個類比:血液類比成流動相,心臟類比成泵。血管類比成各不銹鋼管。那么,血液在心臟作為動力系統(tǒng),流經(jīng)著身體的各個系統(tǒng)。如果心臟跳得快點,那么血流量加大,那么血壓升高。同樣,泵流速提高,流動相流量增大,那么色譜系統(tǒng)壓力增高;如果血管被壓迫半堵了,那么同樣的心跳速度,壓力也會增高。同樣道理,如果色譜系統(tǒng)被污染,那么污染物堵在色譜柱頭,或者各連接口等,那么泵同樣的流速,就有可能壓力變大。液相色譜主要出問題的就是壓力莫名地增大,一般認(rèn)為是色譜系統(tǒng)被污染而堵,解決的方法就是查看各個部件,或者用過濾過的異丙醇清洗流路等。
    2、進(jìn)樣系統(tǒng):
    現(xiàn)在很少用到手動進(jìn)樣了吧。大部分都用自動進(jìn)樣。自動進(jìn)樣確實方便,只要安排好配制過的樣品的位次,那么開動sequence run 就一個個地分析了。要不說說手動進(jìn)樣吧。進(jìn)樣設(shè)備是一個六通閥。其中要進(jìn)樣的時候,需要將六通閥轉(zhuǎn)到load狀態(tài),由于六通閥后面裝了一根定量環(huán),所以,樣品一定以大于三倍定量環(huán)體積地進(jìn)去,這樣,保證定量環(huán)中充滿著樣品,可以避免進(jìn)樣誤差。打個比方,如果定量環(huán)是20μl的,那么我們打入>60μl的樣品。然后轉(zhuǎn)到inj狀態(tài),即可。還有需要注意的是,HPLC 的進(jìn)樣針是平頭針,而GC的進(jìn)樣針一定是尖頭針。因為氣相進(jìn)樣要刺穿隔墊,需呀尖頭,而尖頭容易劃傷金屬,所以分析型液相色譜系統(tǒng)用的是平頭針。
    3、分離系統(tǒng):
    分離系統(tǒng)是分析型液相色譜系統(tǒng)的核心。我們現(xiàn)實生活中需要分析的樣品都是混合物。所以,分離后在分析。比如我們分析醬油中肌苷酸鳥苷酸,那么醬油進(jìn)行稀釋處理,注入色譜儀,肌苷酸,鳥苷酸由于性質(zhì)不同被分離成兩個峰。同時醬油中其他物質(zhì)也被分離。使得肌苷酸,鳥苷酸兩個峰十分清楚地呈現(xiàn)。我們需要清楚的是,樣品的測試要保證測試的物質(zhì)被有效地分離,而不需要測試的物質(zhì),沒有必要讓其分離,這可以節(jié)省分析時間。
    4、檢測系統(tǒng):
    HPLC的檢測器有紫外-可見檢測器,(UV-VIS),熒光檢測器(FD),示差折光檢測器(RI),MS檢測器等等對于這些檢測器,簡單來說,是兩點:被檢測和濃度越大面積越大。對于示差折光,它是通用性檢測器,但是靈敏度不夠。測試一些沒有紫外基團的物質(zhì),比如如糖等。
    5、記錄系統(tǒng):
    分析型液相色譜系統(tǒng)記錄系統(tǒng)主要記錄色譜圖,并且對色譜圖進(jìn)行面積計算(積分)。同時可以用軟件計算出其他,比如峰寬,塔板數(shù),拖尾因子等。同時也可以通過輸入稱樣量和稀釋倍數(shù),計算出測試樣品中各組分的含量。

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