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有哪些技術(shù)可以在細(xì)胞中直接檢測(cè)RNA？
閱讀：748發(fā)布時(shí)間：2023-12-28
可以直接用于細(xì)胞中檢測(cè)RNA的實(shí)驗(yàn)技術(shù)有很多，這些技術(shù)也各有優(yōu)缺點(diǎn)，應(yīng)根據(jù)具體的研究需求選擇最合適的技術(shù)：
RNA熒光原位雜交技術(shù)技術(shù)（RNA-FISH）的原理基于探針與靶序列的特異性結(jié)合。首先，研究人員會(huì)設(shè)計(jì)出與目標(biāo)RNA序列互補(bǔ)的熒光探針。這些探針在雜交緩沖液中與細(xì)胞中的目標(biāo)RNA結(jié)合，形成探針-靶RNA復(fù)合物。然后，通過(guò)洗滌步驟去除未結(jié)合的探針，最后用熒光顯微鏡觀察雜交信號(hào)的位置和數(shù)量。RNA-FISH的實(shí)驗(yàn)流程包括樣品制備、雜交、洗滌及分析等步驟。首先，研究人員需要準(zhǔn)備樣品，這通常涉及將組織或細(xì)胞固定在載玻片上，并進(jìn)行適當(dāng)?shù)念A(yù)處理以暴露出RNA。然后，將探針與樣品雜交，這一步驟需要控制溫度和濕度以確保探針與目標(biāo)RNA的有效結(jié)合。接下來(lái)是洗滌步驟，目的是去除未結(jié)合的探針，最后對(duì)樣品進(jìn)行熒光顯微鏡觀察和分析。
聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）：這是一種高通量、高靈敏、可重復(fù)性高的分子生物學(xué)技術(shù)，可以快速精確檢測(cè)感興趣的基因片段，用于檢測(cè)基因的有無(wú)以及變異的存在。
Northern Blotting：這是一種傳統(tǒng)的RNA分析方法，可用于檢測(cè)特定RNA分子的大小和豐度。它可用于確定已知基因的轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)、轉(zhuǎn)錄結(jié)束位點(diǎn)以及轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的處理情況。
反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）：這是一種常用的RNA定量方法，它首先通過(guò)反轉(zhuǎn)錄將RNA轉(zhuǎn)化為cDNA，然后使用PCR進(jìn)行擴(kuò)增。RT-PCR可以用于檢測(cè)和定量特定基因的表達(dá)水平。
核糖體展示（Ribosome Display）：這是一種用于篩選蛋白質(zhì)的方法，通過(guò)將目標(biāo)蛋白質(zhì)與核糖體結(jié)合，然后進(jìn)行翻譯和展示。該技術(shù)可以用于篩選具有特定功能的蛋白質(zhì)或檢測(cè)細(xì)胞中表達(dá)的特定RNA。
細(xì)胞內(nèi)原位雜交（In Situ Hybridization）：這是一種用于檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)特定RNA的技術(shù)，通過(guò)使用標(biāo)記的探針與目標(biāo)RNA雜交，然后通過(guò)顯微鏡觀察雜交信號(hào)的位置和數(shù)量。
紅榮微再專(zhuān)注于分子診斷領(lǐng)域，早期技術(shù)團(tuán)隊(duì)包含多名國(guó)內(nèi)大學(xué)生物與遺傳學(xué)科博士，從多樣本核酸提取保存技術(shù)、自主研發(fā)緩沖體系、抑制非特異性擴(kuò)增技術(shù)逐步完成了紅榮微再PCR實(shí)驗(yàn)方案，實(shí)現(xiàn)PCR擴(kuò)增效率以及檢測(cè)靈敏度的重大突破，也奠定了紅榮微再以技術(shù)為根本，客戶(hù)為導(dǎo)向的研發(fā)模式，建立以創(chuàng)新為驅(qū)動(dòng)的技術(shù)發(fā)展平臺(tái)。
2019年以來(lái)，經(jīng)歷社會(huì)、市場(chǎng)的多種變化革新，紅榮微再公司內(nèi)部也應(yīng)運(yùn)完成組織架構(gòu)更新與產(chǎn)業(yè)布局的調(diào)整。公司確立“RNA、NGS、ctDNA、qPCR"四大方向并齊發(fā)展模式，技術(shù)部門(mén)新設(shè)NIPT、伴隨診斷、腫瘤早篩、傳染病監(jiān)測(cè)、實(shí)驗(yàn)自動(dòng)化設(shè)備等相關(guān)團(tuán)隊(duì)，組織海外留學(xué)博士、高新技術(shù)企業(yè)核心骨干完成新產(chǎn)品線(xiàn)的研發(fā)工作，面對(duì)快速增長(zhǎng)的市場(chǎng)下游需求，紅榮微再已初步完成多線(xiàn)產(chǎn)品的核心研發(fā)與標(biāo)準(zhǔn)化生產(chǎn)，主要包括核酸提取試劑盒、qPCR試劑盒、測(cè)序試劑盒以及分子診斷類(lèi)產(chǎn)品的基礎(chǔ)儀器耗材等多個(gè)類(lèi)別。
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