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關于細胞凍存你了解多少呢?

閱讀:3184發(fā)布時間:2020-8-26

背景介紹

   細胞凍存是將細胞放在低溫環(huán)境,減少細胞代謝,以便長期儲存的一種技術。細胞凍存是細胞保存的主要方法之一,起到了細胞保種的作用。

   連續(xù)培養(yǎng)的細胞系容易發(fā)生遺傳漂變,有限細胞系終會發(fā)生衰老,所有培養(yǎng)的細胞都易受到微生物污染。
   已建立的細胞系是一種寶貴資源,更換細胞系成本高昂,而且耗費時間。
   可以利用細胞凍存的形式來購買、寄贈、交換和運送某些細胞。

細胞凍存流程

凍存操作步驟:

1.用移液器吸走原培養(yǎng)基,加入適量PBS洗1-2遍;

2.加入適量胰酶,置于培養(yǎng)箱中消化;

3.待消化到位后加入適量血清或*培養(yǎng)基終止消化,800-1000rpm離心3-5min;

4.配制凍存液,待細胞離心后去上清,加入凍存液重懸,調(diào)整細胞濃度為3×106~1×107 cells/mL,轉(zhuǎn)移到凍存管中;

5.將凍存管放入程序降溫盒中,-80度過夜,然后轉(zhuǎn)移到液氮中保存。

6.凍存細胞后應取出一管復蘇,檢測細胞的存活率。理論上細胞可在液氮內(nèi)長期保存,為穩(wěn)妥起見可在細胞凍存半年后復蘇培養(yǎng),觀察細胞生長情況,再繼續(xù)凍存。

細胞凍存產(chǎn)品

 

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