關(guān)于固相萃取(SPE)，有三大zui常見的問題，分別是：回收率低、重現(xiàn)性差和樣品提取物不夠純凈。

　　要解決回收率和重現(xiàn)性的問題，首先我們要驗證分析系統(tǒng)的運(yùn)行情況是否正常。

　　重現(xiàn)性的問題可能由以下幾種情況引起：

　　樣品的殘留，檢測器問題或有缺陷的自動進(jìn)樣器。

　　可以通過將含有已知標(biāo)準(zhǔn)樣品的提取溶劑注入儀器，來驗證分析儀器的響應(yīng)因子是否發(fā)生了改變。重復(fù)進(jìn)樣純標(biāo)準(zhǔn)可以驗證進(jìn)樣的重現(xiàn)性，而重復(fù)進(jìn)樣不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)（濃度由高到底，甚至到非常低的水平)可以驗證殘留問題。

　　然后需要對SPE操作的每一步進(jìn)行評估，因為如果分析物在任何地方發(fā)生了損失都會導(dǎo)致較低的回收率。

　　該評估首先需要制定萃取過程的標(biāo)準(zhǔn)流程，然后收集每一個擬定步驟中的餾分，zui后進(jìn)行分析以確定分析物是否正在流失。如果發(fā)現(xiàn)是在載樣過程或清洗步驟的話，就要檢查這些步驟中所使用的溶劑、采用的條件或預(yù)平衡等是否正確，因為這些因素的影響都具有保留性。

　　嘗試改變樣品溶劑或洗滌步驟，以提高吸附劑的保留機(jī)制。

　　如果分析物是被保留在柱上但不能很好地被洗脫，那需要表明溶劑是正確的，然后需要增加洗脫劑的洗脫強(qiáng)度。此外，分析物與吸附劑兩者可能存在二次相互作用，所以應(yīng)選擇合適的洗脫溶劑來解決這一問題。zui后，也許有必要更換一種對目標(biāo)成分保留性弱的吸附劑。

　　如果SPE操作過程一切正確，那很可能被分析物并未吸附在柱上或進(jìn)入柱后直接被破壞掉了，所以在餾分中檢測不到分析物。

　　前者的問題可能是由于樣品中的分析物不穩(wěn)定導(dǎo)致；同時假如樣品預(yù)處理過程涉及到蛋白質(zhì)沉淀而目標(biāo)分析物會與蛋白質(zhì)發(fā)生結(jié)合，那么分析物就隨蛋白質(zhì)一同沉淀也會導(dǎo)致上述問題。

　　另外，生成的與蛋白結(jié)合的分析物可能直接通過固相萃取柱而不被吸附，故也不可能在后續(xù)的分析步驟中被檢測到。

　　當(dāng)使用液相色譜-質(zhì)譜法（LC-MS）時，基質(zhì)會抑制或增強(qiáng)目標(biāo)分析物的信號。因此如果干擾物質(zhì)不能使用SPE技術(shù)很好的消除的話，那么其他的預(yù)處理步驟就顯得尤為必需了，如：液-液萃取技術(shù)常用來去除油、脂肪或油脂；離子交換技術(shù)常用來脫鹽，或使用非極性吸附劑去除無機(jī)鹽；通過調(diào)節(jié)pH值、超濾或沉淀等操作來去除那些會結(jié)合分析物的蛋白質(zhì)等。

　　如果出現(xiàn)回收率較之前下降或波動較大的情況，你應(yīng)該檢查一下使用的吸附劑，這可能是由于使用的吸附劑批次不同導(dǎo)致的。

　　當(dāng)出現(xiàn)重現(xiàn)性變差、柱故障（如高背壓或保留時間發(fā)生改變）以及定量不準(zhǔn)等現(xiàn)象，那就需要進(jìn)一步對樣品進(jìn)行凈化。

　　解決這個問題可采用的方法是改變原來的洗滌方案，或使用具有相同萃取機(jī)理的其它吸附劑，或*改變萃取方法。

　　洗滌溶劑應(yīng)該具有這樣的機(jī)制：可洗脫zui大量的干擾物質(zhì)而分析物不被洗脫。

　　淋洗步驟也可以通過使用分析物不可溶的溶劑來改善——然而,驚人的凈化效果則可能是通過使用非極性的與水不互溶的溶劑，如二氯甲烷、乙酸乙酯或己烷來實現(xiàn)。

　　這些溶劑具有很強(qiáng)的非極性機(jī)制的洗脫特性（如它們可以洗脫許多干擾物），而分析物將被牢牢地保留在吸附劑表面。洗脫溶劑也可以調(diào)整，較弱的溶劑也可能獲得更純凈的提取物，但同時需要關(guān)注對分析物回收率是否造成影響。

　　如果即使改變了洗滌溶劑但仍然不能獲得理想的純凈的分析物，可以嘗試改變吸附劑。 例如，如果采用C8吸附劑、低保留力的C4或C2吸附劑等，它們對基質(zhì)成分的吸附能力都比較差。然而，同時你也必須確保樣品能充分地吸附在固定相上。

　　提高樣品純凈度的zui后一個方法是*改變萃取機(jī)理。

　　合適的替代品可以用來開發(fā)和確定具有潛在的可用機(jī)制的方法。目前有一種很有效的技術(shù)就是采用混合機(jī)制的提取技術(shù)來替代傳統(tǒng)的單一機(jī)制的提取技術(shù)。這種方法用于提取既含有極性基團(tuán)又含有非極性基團(tuán)的分析物。