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導致ELISA測定過失的三大要素

時間:2017-10-31閱讀:902
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導致ELISA測定過失的三大要素

導致ELISA測定過失作用的要素主要有三大要素:標本要素;試劑要素;操作要素。
ELISA試劑盒的基本原理使抗原(或抗體)結合到某種固相載體外表,并堅持其免疫活性;使抗原(或抗體)與某種酶聯結成酶標抗原(或抗體),并且此酶標抗原(或抗體)既保存其免疫活性,又保存其酶活性;測守時將受檢標本(抗體或抗原)和酶標抗原(或抗體)按不同進程與固相載體外表的抗原或抗體進行反響。

再用洗刷辦法使固相載體上構成的抗原抗體復合物與其它物質分隔,畢竟結合在固相載體上的酶量與標本中受檢的抗體或抗原量成必定份額;再參加酶反響底物后,底物被酶催化后變?yōu)橛猩a品,根據其色彩反響的深淺進行定性或定量分析,以了解被測標本中抗體或抗原含量。

ELISA試劑盒辦法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但elisa試劑盒測定中影響要素較多,并且其操作中有必定的技能懇求,在臨床查驗中除正常反響外,有時??梢姷揭恍┻^失作用(即假陽性或假陰性作用)。
 
血清是zui常用的ELISA標本,血漿一般可視為與血清對等的標本,標本導致的假陽性和假陰性作用主要是干擾性物質所構成的,分為內源性物質和外源性物質兩種:
1、內源性物質
有人以為大約40%的人血清標本中含有非特異性干擾物質,可以不同程度影響查看作用。多見的干擾物質有:類風濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導的抗鼠 Ig (s)抗體、穿插反響物質和其它物質等。
2、外源性物質
外源性物質常常是因為用于ELISA試劑盒的測定血標本的收集、儲存等不妥所構成的。如標本溶血、標本被細菌污染、標本儲存過久、標本凝聚不全和采血管中添加物等影響。

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