豬口蹄疫病毒抗體間接ELISA檢測(cè)試劑盒的研制

目的:研制以原核表達(dá)蛋白作為 包被抗原檢測(cè)口蹄疫病毒(FMDV)抗體的ELISA試劑盒,為豬口蹄疫病毒抗體的監(jiān)測(cè)提供幫助。方法:利用包含有O型口蹄疫病毒VP1上主要抗原表位的 原核表達(dá)蛋白作為包被抗原,采用間接ELISA方法確定抗原的*包被濃度和血清稀釋度,優(yōu)化各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件,在此基礎(chǔ)上研制ELISA檢測(cè)試劑盒并對(duì)試劑 盒的特異性、重復(fù)性等方面進(jìn)行了研究。結(jié)果:經(jīng)過(guò)研究確定抗原包被濃度為20.75μg/mL,待檢血清*稀釋度為1:40,陰陽(yáng)性判定界限為 0.34。穩(wěn)定性試驗(yàn)表明批內(nèi)變異系數(shù)和批間變異系數(shù)均小于10%。應(yīng)用該ELISA方法和上海優(yōu)耐特FMDV VP1 ELISA同時(shí)檢測(cè)220份臨床血清,結(jié)果顯示兩者總符合率達(dá)87.27%。結(jié)論:該ELISA試劑盒可用于口蹄疫血清學(xué)流行病調(diào)查和抗體水平的監(jiān)測(cè).