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上海申知心生物科技有限公司
主營產品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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主營產品： 高血脂癥動物模型,心血管疾病動物模型,缺血性心臟病動物模型 |
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| 參考價 | 面議 |
更新時間：2023-08-29 10:37:03瀏覽次數：2480
聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息，謝謝!
| 產地類別 | 國產 | 應用領域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產業(yè) |
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平板克隆形實驗步驟
1、細胞懸液制備:取對數生長期的單層培養(yǎng)細胞，用0. 25%胰蛋白酶消化并吹打成單個細胞，離后用*培養(yǎng)基重懸,制成細胞懸液。
2、細胞種板:將細胞懸液作梯度倍數稀釋，以每皿50、100、 200、 500、1000、 2000個細胞的梯度密度分別接種含1 ml 37 C預熱培養(yǎng)液的皿中，并輕輕轉動，使細胞分散均勻。置37 C 5% Co2的環(huán)境下，靜置培養(yǎng)。
3、細胞觀察:顯微鏡下觀察到單個細胞長到20個以上細胞克隆，培養(yǎng)皿中出現肉眼可見的克隆時，終止培養(yǎng)。棄去.上清液，用PBS小心浸洗2次。加純甲醇1ml,固定15分鐘。然后去固定液,加適量Giemsa應用染色液染10分鐘，然后用流水緩慢洗去染色液，空氣干燥，手記拍照采集圖像。
4、克隆計數:用肉眼直接計數克隆數，后計算克隆形成率。
結果分析
平板克隆克隆形成率=克隆數接種細胞數x100%
