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詳細(xì)介紹
Phos-tag™ 凝膠熒光染料
Phos-tag™ 凝膠熒光染料，是一種可在生理pH范圍內(nèi)，對凝膠中的磷酸化蛋白進(jìn)行染色的熒光染料。進(jìn)行了SDS-PAGE，用本產(chǎn)品處理聚丙烯酰胺凝膠，可以對磷酸化蛋白進(jìn)行特異性染色。
本系列有波長不同的Yellow（黃）、Magenta（品紅）、Cyan（藍(lán)綠）、Aqua（淺綠）四種顏色。每管規(guī)格為0.2 mg，可對約20個迷你凝膠進(jìn)行染色。
購買前請注意：
使用Phos-tag™ 凝膠熒光染料，需要用到Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5×（產(chǎn)品編號：383-15231）。請一同購買。
◆特點(diǎn)
● 高靈敏度
● 在生理pH下即可染色
● 選擇性與pSer、 pTyr、 pHis以及pAsp殘基結(jié)合
● 無需放射性物質(zhì)、化學(xué)物質(zhì)標(biāo)簽、抗體
● 2小時內(nèi)完成染色
◆產(chǎn)品對比
其他公司產(chǎn)品A
● 凝膠pH：2~4 ● 5個步驟（固定、清洗、染色、脫色、清洗） ● 所需時間：≧5小時 ● 溶液更換次數(shù)：11次 ● 卵清蛋白檢測上限：～5 ng/lane | Phos-tag™ Magenda（品紅）
● 凝膠pH：7~8（不進(jìn)行脫磷酸化） ● 3個步驟（固定、染色、清洗） ● 所需時間：≦2小時 ● 溶液更換次數(shù)：4次 ● 卵清蛋白檢測上限：～1 ng/lane |
◆應(yīng)用實(shí)例①
磷酸化蛋白與非磷酸化蛋白的染色Phos-tag™ Aqua（淺綠）
Lane.No.（）內(nèi)為磷酸基團(tuán)數(shù)目
1. Marker 2.α-酪蛋白（9P） 3.經(jīng)ALP處理的α-酪蛋白 4.β-酪蛋白（5P） 5.經(jīng)ALP處理的β-酪蛋白 6.卵清蛋白（2P） | 7.經(jīng)ALP處理的卵清蛋白 8.胃蛋白酶（1P） 9.經(jīng)ALP處理的胃蛋白酶 10.β-半乳糖苷酶 11.牛血清白蛋白 12.碳酸酐酶 |
Phos-tag™ Aqua（淺綠）染料選擇性：用Phos-tag™ Aqua（淺綠）對10％（w/v）的PAGE膠進(jìn)行染色，其中分別含有四組完整的以及經(jīng)ALP（堿性磷酸酶）處理的磷酸蛋白（α-酪蛋白，β-酪蛋白，卵清蛋白和胃蛋白酶各1 μg）（左），然后使用考馬斯亮藍(lán)CBB G-250染色（右）。
成功特異性地檢測出SDS-PAGE后的磷酸化蛋白。
數(shù)據(jù)提供：廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)學(xué)系科學(xué)研究科 醫(yī)藥分子機(jī)能科學(xué)研究室 木下惠美子老師、木下英司老師、小池透老師
◆應(yīng)用實(shí)例②
使用Phos-tag™ 熒光凝膠染料的組氨酸、天門冬氨酸的磷酸化分析
細(xì)菌通過將信息從組氨酸激酶EnvZ傳遞到應(yīng)答調(diào)控子OmpR來調(diào)節(jié)基因的表達(dá)。分別分析有自磷酸化能力的EnvZ激酶和被EnvZ催化的OmpR中組氨酸和天門冬氨酸的磷酸化。
可以確認(rèn)Phos-tag™ Magenta（品紅）和Phos-tag™ SDS-PAGE 這兩種試劑中的His和Asp的磷酸化隨激酶的處理時間經(jīng)過不斷增強(qiáng)。尤其是使用Phos-tag™ Magenta（品紅）時，可以僅檢測出His磷酸化或Asp磷酸化。
數(shù)據(jù)提供：廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)學(xué)系科學(xué)研究科 醫(yī)藥分子機(jī)能科學(xué)研究室 木下惠美子老師、木下英司老師、小池透老師
◆應(yīng)用實(shí)例③
用于篩選組氨酸激酶抑制劑（新型抗生素）
使用Phos-tag™熒光凝膠染料，篩選組氨酸激酶抑制劑。
證實(shí)磷酸化依賴組氨酸激酶抑制劑濃度被抑制。
數(shù)據(jù)提供：廣島大學(xué)研究生院 醫(yī)學(xué)系科學(xué)研究科 醫(yī)藥分子機(jī)能科學(xué)研究室 木下惠美子老師、木下英司老師、小池透老師
參考文獻(xiàn)
“Quantitativemonitoring of His and Asp phosphorylation in a bacterial signaling system byusing Phos-tag Magenta/Cyan fluorescent dyes”, Emiko Kinoshita-Kikuta, HiroshiKusamoto, Syogo Ono, Keisuke Akayama, Yoko Eguchi, Masayuki Igarashi, ToshihideOkajima, Ryutaro Utsumi, Eiji Kinoshita, Tohru Koike, Electrophoresis, 2019
◆使用方法
※調(diào)整平衡及清洗溶液以及染色溶液必須使用Mixed reagents for Phos-tag™ Common Solution 5× (產(chǎn)品編號：383-15231)。
◆激發(fā)波長/熒光波長
| Phos-tag™ Yellow（黃） | Phos-tag™ Magenta（品紅） |
 |  |
Ex/Em=505 nm/514 nm | Ex/Em=547 nm/561 nm |
| Phos-tag™ Cyan（藍(lán)綠） | Phos-tag™ Aqua（淺綠） |
 |  |
| Ex/Em=643 nm/661nm | Ex/Em=551 nm/564 nm |
◆產(chǎn)品列表
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 380-15241 | Phos-tag™ 黃色熒光染料 | 0.2 mg |
| 386-15221 | Phos-tag™ 品紅熒光染料 | 0.2 mg |
| 382-15201 | Phos-tag™ 淺綠熒光染料 | 0.2 mg |
| 389-15211 | Phos-tag™ 藍(lán)綠熒光染料 | 0.2 mg |
| 383-15231 | Phos-tag™ 5×染色通用混合溶液 | 1 EA |
◆相關(guān)產(chǎn)品
Phos-tag™ Acrylamide
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 304-93521 | Phos-tag™ 丙烯酰胺 | 10 mg |
| 300-93523 | 2 mg | |
| 304-93526 | Phos-tag™ 丙烯酰胺5 mM水溶液 | 0.3 mL |
SuperSep™ Phos-tag™
用于Bio-Rad伯樂電泳儀
貨號 | 品名 | 電泳儀 | 規(guī)格 |
198-17981 | SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 well, 83×100×3.9mm | Mini-PROTEAN® Tetra Cell (Bio-Rad Laboratories, Inc.) | 5 塊 |
195-17991 | SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well, 83×100×3.9 mm | 5 塊 |
用于Life Technologies伯樂電泳儀
貨號 | 品名 | 電泳儀 | 規(guī)格 |
192-18001 | SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 7.5%, 17 well, 100×100×6.6 mm | XCell SureLock® Mini-Cell (Life Technologies, Inc.)
| 5 塊 |
199-18011 | SuperSep™ Phos-tag™ (50 μmol/L), 12.5%, 17 well, 100×100×6.6 mm | 5 塊 |
Phos-tag™ Biotin
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 301-93531 | Phos-tag™ 生物素 | 10 mg |
| 308-97201 | Phos-tag™ 生物素1 mM水溶液 | 0.1 mL |
Phos-tag™ Agarose
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 302-93561 | Phos-tag™ 瓊脂糖 | 0.5 mL |
| 308-93563 | 3 mL |
Phos-tag™ Tip
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 387-07321-8P | Phos-tag™ 瓊脂糖槍頭 | 8 pcs |
| 387-07321 | 8 pcs×10 |
Phos-tag™ Mass Analytical Kit
| 產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 305-93551 | Phos-tag™ 質(zhì)譜分析試劑盒 | 1 set |
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