組織分散酶 DISPASE® I、DISPASE® II
DISPASE® 是切斷肽鏈的中性、非極性氨基酸N 末端的金屬蛋白酶,能夠把上皮細(xì)胞從組織上剝離成片狀。以前技術(shù)人員一直把它用于原代培養(yǎng)的細(xì)胞分離以及分散。近年,在再生醫(yī)學(xué)和組織工程的領(lǐng)域上也有廣泛應(yīng)用,可以和膠原酶配合使用。此酶分離細(xì)胞迅速有效又溫和,細(xì)胞能保持完整,不會(huì)給細(xì)胞膜帶來傷害,無動(dòng)物源原料,不含支原體或動(dòng)物病毒污染,對(duì)于血清成分、酶濃度、處理事件、溫度、pH非常穩(wěn)定。
| DISPASE®Ⅰ | DISPASE® Ⅱ |
特性 | 結(jié)晶酶,無菌產(chǎn)品 | 粉末酶,非無菌產(chǎn)品 |
包裝 | 6小瓶 | 1 g |
酶活性 | 10,000-13,000 PU/小瓶 | 300,000-360,000 PU/g |
添加劑等 | 含有醋酸鈣 | 含有糊精和醋酸鈣 |
儲(chǔ)存·有效期 | 生產(chǎn)后在2~10℃下可儲(chǔ)存2年(未開封); 開封溶解后請(qǐng)凍存在-20℃以下,并在6個(gè)月內(nèi)使用。 |
◆優(yōu)點(diǎn)、特色
● DISPASE® 是來源于Paenibacillus sp. (舊名:Bacillus polymyxa )的中性金屬蛋白酶?;钚灾行?/span>
● 有Zn2+,比Ca2+ 穩(wěn)定。
● 酶活性幾乎不受血清成分影響,因此不論是否有血清,都可以使用本產(chǎn)品。同時(shí)可簡(jiǎn)單地通過添加EDTA
● 或者稀釋反應(yīng)液來停止酶反應(yīng)。
● 可以很好地分解構(gòu)成基底膜的Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白,讓上皮細(xì)胞從組織上剝離成片狀。
● 與胰蛋白酶、膠原酶等蛋白酶的作用不同,造成的細(xì)胞損傷更少,可溫和地分散細(xì)胞。
● 由于作用條件的范圍廣泛,可以在不同的酶濃度、處理時(shí)間、溫度以及pH 條件下,使酶發(fā)生作用。
● 細(xì)胞培養(yǎng)溫度一般在37℃,酶在此溫度下非常穩(wěn)定。根據(jù)細(xì)胞種類的不同,可以往培養(yǎng)基里添加本產(chǎn)品,
● 進(jìn)行懸浮培養(yǎng)。
● 本產(chǎn)品不含支原體。
● 本產(chǎn)品沒有使用動(dòng)物源原料。
◆案例、應(yīng)用
酶濃度 | 100 ~ 2,000 PU/mL |
溶解液 | 含有Ca2+ 的緩沖液或者培養(yǎng)基(可含有血清) |
反應(yīng)時(shí)間 | 30 分鐘~幾天 |
反應(yīng)溫度 | 室溫~ 37℃ |
反應(yīng)pH | 6.5 ~ 9.0 |
抑制因子 | EDTA, Fe3+, Fe2+, Ni2+, Cu2+, Al3+, Zn2+ |
※ 1PU 的定義是使用酪蛋白分解法1 分鐘內(nèi)分離1 微克酪氨酸的酶活性。
◆產(chǎn)品列表
產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 包裝 |
386-02271 | DISPASE®Ⅰ 分散酶® | 1 g |
383-02281 | DISPASE® Ⅱ 分散酶®Ⅱ | 1 g |