詳細介紹
重組胰蛋白酶(RTrypsin)
◆概述
胰蛋白酶(Trypsin; EC 3.4.21.4)是一種絲氨酸蛋白酶,酶解賴氨酸及精氨酸C末端形成的肽鍵。重組豬胰蛋白酶是由畢赤酵母重組表達并采用層析色譜法純化獲得。氨基酸序列與豬胰腺來源的陽離子型胰蛋白酶*一致,分子量為24 kDa,適pH為7.0-9.0??商娲i胰腺來源胰蛋白酶應用于各種生物技術過程中,如:重組胰島素生產(chǎn);細胞培養(yǎng)、細胞發(fā)酵;蛋白質(zhì)的酶解、測序;各種組織的細胞分離等。活性受絲氨酸蛋白酶抑制劑如TLCK、PMSF等的抑制,金屬離子螯合劑如EDTA等抑制酶活。
◆優(yōu)勢
● 批量生產(chǎn)規(guī)模大,批間小
● 高純度,高比活性
● 重組表達生產(chǎn),無外源性病毒污染,生產(chǎn)過程不使用動物來源原料
◆純度
SDS-PAGE顯示純度>95%。
◆來源
重組畢赤酵母菌株,其克隆有來自豬的胰腺來源陽離子型胰蛋白酶基因。
◆使用方法
保存:10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2;溶解后分裝-15 ℃以下保存。
酶切體系:25 mmol/L Tris-HCl , pH 7.6~8.0。
推薦使用量:蛋白酶:融合蛋白質(zhì)量比1:20~1:100(肽圖或蛋白組學研究),
推薦使用量:1:200~1:2000(多肽/蛋白生產(chǎn)工藝)。
◆保存條件
儲存穩(wěn)定性:凍干粉存于-15 ℃以下,24個月穩(wěn)定;10 mmol/L HCl,20 mmol/L CaCl2溶解后分裝儲存于
儲存穩(wěn)定性:-15 ℃以下,反復凍融5次,未能觀察到活性損失;溶解后2~8 ℃保存建議不超過7 d。
運輸穩(wěn)定性:冰袋保溫運輸,活性穩(wěn)定
◆應用實例
RTrypsin特異性酶切合成短肽
合成多肽序列YGKRLWK,理論酶切位點酶切產(chǎn)物YGKR、LWK、YGK、R、RLWK,蛋白酶:合成多肽質(zhì)量比1:100,37 ℃酶切反應10 min,LC-MS驗證酶切反應特異性。
Peak# | R.T. | M.W. | Sequence |
Peak 1 | 6.70 min | 366.42 | YGK |
Peak 2 | 7.61 min | 552.6 | YGKR |
Peak 3 | 17.67 min | 445.56 | LWK |
Peak 4 | 19.53 min | 601.75 | RLWK |
Peak 5 | 19.97 min | 950.15 | YGKRLWK |
◆產(chǎn)品信息
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 比活 |
RTP0102 | RTrypsin | 10 mg | 3800 USP/mg |
RTP0103 | RTrypsin | 1 mg | 3800 USP/mg |
RTP0104 | RTrypsin | 10 μg | 3800 USP/mg |
◆相關產(chǎn)品
產(chǎn)品編號 | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 儲存溫度 | 其他信息 |
MDRK0101 | 重組胰蛋白酶檢測試劑盒 | 96 孔 | 2~8 ℃ | 檢測范圍 |
IRTP0101 | 固定化重組胰蛋白酶 | 1.0 mL | -15 ℃以下 | 1.0 mL含1.0 mg |