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詳細(xì)介紹
新標(biāo)準(zhǔn) 抗體純化樹脂
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KANEKA KanCapA™
本產(chǎn)品為Protein A親和層析樹脂。用于從活體樣本及細(xì)胞培養(yǎng)上清.純化免疫球蛋白及包含F(xiàn)c段的重組抗體。
本產(chǎn)品由高交聯(lián)纖維素微珠及新研發(fā)的耐堿Protein A配體構(gòu)成，可用于IgG的親和純化。
◆特點(diǎn)
• 耐堿
• 良好洗脫條件
• 高抗體結(jié)合能力
• 可循環(huán)使用
• 便于擴(kuò)增
◆關(guān)于改良Protein A
KanCapA™采用的不是天然Protein A，而是使用變異型C域5聚物的新型Protein A。
天然Protein A的C域結(jié)合于Fc段，也結(jié)合于Fab段，其中與VH3亞家族抗體的反應(yīng)性較高。該類型的解離需要弱酸條件下洗脫。
為改善該問題，使用分子設(shè)計(jì)系統(tǒng)重新設(shè)計(jì)分子，研發(fā)了保持耐堿性、改善Fab段的非特異性結(jié)合及洗脫曲線的Protein A。
本產(chǎn)品采用的Protein A
1.C5聚體蛋白質(zhì) |  | 良好pH條件下清晰地洗脫抗體 |
2.較高的耐堿性 | ||
3.減少Fab段的非特異性結(jié)合 |
◆產(chǎn)品特性
KANEKA KanCapA™ 產(chǎn)品特性
矩陣 | 高交聯(lián)纖維 | ※ 1) 平均粒度為累積體積分布的中間粒度 2) 5%動(dòng)態(tài)結(jié)合容量為前端分析測(cè)定（停留時(shí)間3分鐘） 3) 可在強(qiáng)堿條件下清洗，但請(qǐng)避免長(zhǎng)時(shí)間的清洗 4) 請(qǐng)勿冷凍 |
平均粒度1) | 65-85μm | |
配體 | Protein A，重組(抗強(qiáng)堿) | |
結(jié)合 | 化學(xué)結(jié)合（還原胺化） | |
動(dòng)態(tài)結(jié)合容量2) | ≧35mg 人多克隆IgG／mL載體 | |
化學(xué)穩(wěn)定性3) | 使用親和層析通用可溶性溶媒時(shí)較穩(wěn)定 | |
pH范圍3) | pH 2-13 | |
靜止清洗條件3) | 0.1-0.5 mol/L氫氧化鈉 | |
流量 | 大500cm/h（層高: 20-25cm） | |
停留時(shí)間 | ≧3分鐘（建議：4-6分鐘） | |
保存條件4) | 20%乙醇渾濁液，1～10℃ |
◆應(yīng)用
1、Fab段純化應(yīng)用
• 利用KANEKA KanCapA™的特點(diǎn)，可從經(jīng)木瓜蛋白酶處理后的IgG溶液分餾Fc段及Fab段。
2、IgG洗脫曲線（pH3.5 & pH3.0）
• 洗脫范圍已優(yōu)化，可清晰地分餾提純。
3、通過強(qiáng)堿清洗進(jìn)行樹脂循環(huán)
• 進(jìn)行300次循環(huán)處理后（0.1M氫氧化鈉溶液，15分鐘），IgG的結(jié)合容量的減少率仍低于20%，表明其循環(huán)性能較高。
使用0.1 M氫氧化鈉溶液進(jìn)行循環(huán)處理后的IgG結(jié)合活性曲線數(shù)據(jù) | 循環(huán)處理后（0.1M氫氧化鈉溶液 15分鐘）的IgG回收率及ProteinA配體的滲濾量的曲線數(shù)據(jù) |
4、動(dòng)態(tài)結(jié)合容量 曲線數(shù)據(jù)
• 在4-6分鐘停留時(shí)間過程中，DBC較高。
※ 動(dòng)態(tài)結(jié)合容量表示純化樣本在流動(dòng)的狀態(tài)下，回收程度的數(shù)值。動(dòng)態(tài)結(jié)合容量較高的載體的流速較快，可回收大量目標(biāo)分子，因此可以認(rèn)為在短時(shí)間內(nèi)有效純化目標(biāo)分子的優(yōu)質(zhì)載體。
KANEKA KanCapA™的Dynamic Binding Capacity (DBC; 動(dòng)態(tài)結(jié)合容量) 曲線數(shù)據(jù)
5、不同大小的樹脂填充裝柱的壓力/流速繪圖數(shù)據(jù)
填充依賴壓力的計(jì)算方法是從整體壓力減去系統(tǒng)壓力。
6、KANEKA KanCapA™于各種大小的柱的填充效果
• KANEKA KanCapA™適用于各種大小的柱。
充填方法 | L. D.(厘米) | 高度(毫米) | 培養(yǎng)皿/米 | 非對(duì)稱性 |
流動(dòng)填充 | 4.4 | 200 | 5710 | 1.14 |
軸向力填充 | 7 | 199 | 6063 | 1.06 |
流動(dòng)填充 | 10 | 201 | 5276 | 1.18 |
流動(dòng)填充 | 30 | 200 | 5208 | 1.17 |
軸向力填充 | 45 | 233 | 4712 | 1.09 |
以下是脈沖注入數(shù)據(jù)：
可溶性溶媒：1(v/v)% 丙酮
注入量：1% 柱容量
流速：60 cm/h
◆產(chǎn)品列表
| 產(chǎn)品編號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 |
| 114-01071 | KANEKA KanCapA™ | 2mL (net 1mL) |
| 110-01073 | 10mL (net 5mL) | |
| 118-01074 | 50mL (net 25mL) |
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