自噬
自噬是真核細(xì)胞在受到某些敵對條件（例如營養(yǎng)剝奪）時(shí)所觸發(fā)的溶酶體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)大規(guī)模降解途徑，并觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)含物的消化和再循環(huán)。各種細(xì)胞質(zhì)成分，包括細(xì)胞器、聚集蛋白和長壽命蛋白，被隔離至雙層膜自噬體后與溶酶體發(fā)生融合，致使溶酶體含量降低。自噬活性對于維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和能量平衡至關(guān)重要。盡管通常在基礎(chǔ)條件下較少發(fā)生，但是自噬可以被多種生理刺激，如營養(yǎng)不足、缺氧、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激以及免疫和激素刺激，從而

自噬?

通過創(chuàng)新檢測方法更清楚地了解自噬和疾病

 

◆自噬分析工具

自噬定義

自噬是真核細(xì)胞在受到某些敵對條件（例如營養(yǎng)剝奪）時(shí)所觸發(fā)的溶酶體介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)大規(guī)模降解途徑，并觸發(fā)細(xì)胞內(nèi)含物的消化和再循環(huán)。各種細(xì)胞質(zhì)成分，包括細(xì)胞器、聚集蛋白和長壽命蛋白，被隔離至雙層膜自噬體后與溶酶體發(fā)生融合，致使溶酶體含量降低。自噬活性對于維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)和能量平衡至關(guān)重要。盡管通常在基礎(chǔ)條件下較少發(fā)生，但是自噬可以被多種生理刺激，如營養(yǎng)不足、缺氧、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激以及免疫和激素刺激，從而顯著上調(diào)。越來越多的證據(jù)表明自噬過程中的功能失常與許多臨床相關(guān)疾病有關(guān)，包括癌癥、神經(jīng)退行性疾病、糖尿病、自身免疫性疾病和心血管疾病。更深入了解自噬活性的好處和潛在后果，有助于開發(fā)自噬靶向療法。

 

◆自噬囊泡形成

自噬途徑

◆自噬檢測

活細(xì)胞檢測試劑盒

強(qiáng)大的活細(xì)胞分析試劑盒，用于定量檢測自噬，聚集小體，溶酶體攝動(dòng)等。

Enzo CELLESTIAL^® 產(chǎn)品系列是基于細(xì)胞的測定的強(qiáng)大的試劑，包括用于測量自噬，聚集小體聚集和溶酶體擾動(dòng)，所有這些均適用于自噬分析。

CYTO-ID^® 自噬檢測試劑盒是一種用于監(jiān)測活細(xì)胞自噬的無轉(zhuǎn)染定量測定方法。該檢測適用于流式細(xì)胞術(shù)和顯微鏡檢查，有助于高通量篩選自噬激活劑和抑制劑。CYTO-ID^® 自噬檢測試劑盒包括一種選擇性地染色前自噬體，自噬體和自溶酶體（自噬體），而對溶酶體的染色相對較少的染料。

●　選擇性染色自噬囊泡，無需耗時(shí)的LC3融合蛋白轉(zhuǎn)染

●　在天然異質(zhì)細(xì)胞群體中的快速大量的自噬

●　在多種條件下進(jìn)行驗(yàn)證，并使用已知會(huì)影響自噬途徑的小分子調(diào)節(jié)劑

●　溶酶體基本不會(huì)染色，減少了其他染料（例如MDC）所見的背景

 

無需轉(zhuǎn)染即可進(jìn)行自噬 與點(diǎn)狀細(xì)胞（底部）相比，點(diǎn)狀細(xì)胞質(zhì)結(jié)構(gòu)的存在（頂部）證明饑餓導(dǎo)致綠色熒光強(qiáng)度增加。細(xì)胞核用Hoechst染料復(fù)染（藍(lán)色）。

 

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
ENZ-51031-K200	CYTO-ID自噬檢測試劑盒	200 tests
ENZ-51031-0050		50 tests
ENZ-51034-K500	溶酶體綠色檢測試劑盒（顯微鏡）	500 tests
ENZ-51034-0100		100 tests
ENZ-51015-KP002	溶酶體細(xì)胞毒理檢測試劑盒（紅色熒光）（綠色細(xì)胞系）（微孔板）	1 Kit
ENZ-51035-0025	ProteoStat 蛋白聚集小體檢測試劑盒（流式細(xì)胞儀和熒光顯微鏡）	25 tests
ENZ-51035-K100		100 tests
ENZ-52252	MM 4-64	1 mg

 

自噬ELISA試劑盒

靈敏的NBR1和p62 ELISA試劑盒可對人、大鼠和小鼠細(xì)胞裂解物中的自噬生物標(biāo)記物NBR1和p62（Sequestosome 1）進(jìn)行定量免疫檢測。NBR1和p62充當(dāng)支架蛋白，有助于自噬蛋白的運(yùn)輸和降解。該ELISA試劑盒可定量測量自噬，而無需昂貴的設(shè)備或漫長的過程。

●　可靈敏地分別檢測低至66 pg/mL和100 pg/mL的NBR1和p62

●　結(jié)果*定量，優(yōu)于半定量蛋白質(zhì)印跡分析

●　高通量格式可在不到3小時(shí)內(nèi)分析多達(dá)40個(gè)樣品

●　操作簡單和試劑標(biāo)識(shí)不同的顏色，節(jié)省了實(shí)驗(yàn)時(shí)間并減少實(shí)驗(yàn)誤差

 

用自噬誘導(dǎo)藥物或賦形劑處理人乳腺癌細(xì)胞。處理6和12小時(shí)后收獲細(xì)胞，裂解細(xì)胞并用p62 ELISA試劑盒分析，并通過Westernblottingp62和LC3-II。藥物治療與自噬的誘導(dǎo)相關(guān)，如p62水平的降低（A和B）和LC3-II水平的升高（C）所示。

 

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
ADI-900-212-0001	P62酶聯(lián)免疫試劑盒	96 wells
ADI-900-214-0001	葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78/結(jié)合免疫球蛋白酶聯(lián)免疫試劑盒	96 wells

 

自噬抗體與蛋白

Enzo Life Sciences提供了大量自噬相關(guān)的純化蛋白，以及肽段、全長/部分蛋白、修飾多肽/蛋白、經(jīng)過大量驗(yàn)證的單克隆和多克隆抗體。許多抗體也可以提供酶或熒光標(biāo)記的偶聯(lián)物，擴(kuò)大了應(yīng)用范圍，包括Western blot，流式細(xì)胞術(shù)，IHC，ICC，IF，IP等。

 

單泛素/多泛素偶聯(lián)物單抗（FK2）

●　檢測K²⁹，K⁴⁸和K⁶³連接的單泛素化和多泛素化蛋白

●　經(jīng)過WB，IP，IHC和ELISA應(yīng)用驗(yàn)證

●　可用于HRP、生物素、ATTO 488和熒光素標(biāo)記的結(jié)合物使用

 

圖1：Polyubiquitinylated conjugates monoclonal antibody (FK1)（產(chǎn)品編號(hào)：BML-PW8805）（泳道 A-C）與Mono-and polyubiquitinylated conjugates monoclonal antibody (FK2)（產(chǎn)品編號(hào)：BML-PW8810）（泳道 D-F）進(jìn)行蛋白質(zhì)印跡。Lane A與D：K48連接。Lane B與E：K29連接。Lane C與F：K63連接

 

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
BML-SE491-0005	AM蛋白激酶 （人）, （重組） （His-標(biāo)簽）	5 μg
ALX-803-080-C100	LC3B, 單抗 （5F10）	100 μg
BML-PW8810-0500	單泛素/多泛素偶聯(lián)物單抗（FK2）	500 μg
BML-PW8810-0100		100 μg
ADI-SPA-820-F	熱休克同源蛋白70/熱休克蛋白70, 單抗 （N27F3-4）	200 µg
ADI-SPA-820-D		50 µg
ADI-905-721-100	自噬基因Beclin1多抗	100 μg
ADI-APR-100-0200	重組人LC3-I蛋白（His標(biāo)簽）	200 µg
ADI-APR-100-0050		50 µg
ADI-905-687-100	mTOR多抗	100 μg
BML-PW9860-0100	P62（人）多抗	100 µL
BML-PW9860-0025		25 µL
ALX-215-065-1	mTOR （人 FRB 結(jié)構(gòu)域）, 多抗	1 Vial

 

◆自噬調(diào)控

自噬庫與途徑調(diào)節(jié)劑

Enzo自噬化合物庫是精選的96種自噬激活劑與抑制劑的集合。我們的化學(xué)家對現(xiàn)成的篩選庫進(jìn)行了全面研究，所含的所有單個(gè)化合物均可單獨(dú)訂購。此外，許多常見的自噬抑制劑和活化劑，如下面所列產(chǎn)品，也可以作為標(biāo)準(zhǔn)目錄產(chǎn)品購買。

產(chǎn)品列表

產(chǎn)品編號(hào)	產(chǎn)品名稱	包裝
BML-2837-0500	SCREEN-WELL 自噬化合物庫	1 library
BML-2837-0100		1 library
BML-CM110-0100	巴弗洛霉素A1	100 μg
ALX-550-253-G005	利多卡因 鹽酸鹽	5 g
BML-PI102-0025	MG-132	25 mg
BML-PI102-0005		5 mg
BML-A275-0005	雷帕霉素	5 mg
BML-A275-0025		25 mg
BML-EI397-0025	SMER28	25 mg
BML-EI397-0005		5 mg
ALX-550-095-G001	他莫昔芬檸檬酸鹽	1 g
ALX-550-306-G005	鹽酸維拉帕米	5 g
ALX-550-306-G001		1 g