關(guān)于超聲波細(xì)胞粉碎機的用法,以下有著詳細(xì)介紹
閱讀:788 發(fā)布時間:2022-5-20
超聲波細(xì)胞粉碎機是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的的產(chǎn)物成分釋放出來的技術(shù),是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)的基礎(chǔ),由于細(xì)菌、酵母、真菌、植物細(xì)胞壁的組成成分不同,且同類細(xì)胞竭誠的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)也不同,所以其細(xì)胞壁的堅固程度不同。
而動物細(xì)胞雖沒有細(xì)胞壁,但具有細(xì)胞膜,也需要一定的細(xì)胞破碎方法來破膜,以此達到提取產(chǎn)物的目的。下面就列舉了幾個重要的方法,可供參考:
1、化學(xué)及生物化學(xué)法:
?、僮匀芊ǎ涸谝欢≒H和適當(dāng)?shù)臏囟认?,利用組織細(xì)胞內(nèi)自身的酶系統(tǒng)將細(xì)胞破碎的方法。此過程需較長時間,常用少量防腐劑如甲苯、氯仿等防止細(xì)胞的污染;
?、诿溉芊ǎ豪酶鞣N水解酶,如溶菌酶、纖維素酶、蝸牛酶、半纖維素酶、脂酶等,將細(xì)胞壁分解,使細(xì)胞內(nèi)含物釋放出來。有些細(xì)菌對溶菌酶不敏感,加入少量巰基試劑或8摩爾尿素處理后,使之轉(zhuǎn)為對溶菌酶敏感而溶解;
?、刍瘜W(xué)滲透法:某些有機溶劑、抗生素、表面活性劑、金屬螯合劑、變性劑等化學(xué)藥品都可以改變細(xì)胞壁或膜的通透性從而使內(nèi)合物有選擇地滲透出來。其作用機理;化學(xué)滲透取決于化學(xué)試劑的類型以及細(xì)胞壁和膜的結(jié)構(gòu)與組成。
2、物理法:
?、俜磸?fù)凍溶法:
原理:因突然冷凍,細(xì)胞內(nèi)冰晶的形成及胞內(nèi)外溶劑濃度的突然改變而破壞細(xì)胞;
方法:將待破碎的細(xì)胞在-20度以下冰凍,室溫融解,反復(fù)幾次,由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩余細(xì)胞液的鹽濃度增高引起溶脹,使細(xì)胞結(jié)構(gòu)破碎。
?、诩睙狍E冷法:
將材料投入沸水中,維持85-90分鐘,至水浴中急速冷卻,此法可用于細(xì)菌及病毒材料;
就目前超聲波儀器主要有超聲波振蕩器以及超聲波粉碎儀等。
其優(yōu)點是保持細(xì)胞活性,省時,樣品損失少,可以處理大量樣品。因此超聲波細(xì)胞粉碎機的不斷發(fā)展和改進,對大規(guī)模生產(chǎn)的貢獻是十分可觀的。超聲波細(xì)胞粉碎機進行超聲粉碎破碎是目前在生物生產(chǎn)中常用的破碎方法。對不同菌種的發(fā)酵液。超聲破碎的效果差別較大。一般地,桿菌比球菌較易破碎,革蘭氏陰性細(xì)菌細(xì)胞比革蘭氏陽性細(xì)菌細(xì)胞較易破碎,對酵母菌的效果較差。