抗體的使用和保存方法

抗體廠家，無論是保存還是運(yùn)輸，都要避免反復(fù)凍融。反復(fù)凍融，冰晶會(huì)破壞抗體的空間結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致蛋白變性形成多聚體，從而降低抗體的結(jié)合能力，也加快了抗體球蛋白的降解速度?？贵w保存得當(dāng)與否，直接決定了抗體的活性和使用效果，如果抗體保存得當(dāng)，Bioss的抗體活性大部分都可以維持?jǐn)?shù)年。下面就給大家講解下，Bioss抗體的使用和保存方法：

一、收到抗體后的操作
收到抗體廠家后（大部分抗體是溶液態(tài)），請(qǐng)務(wù)必在 4℃，12000rpm，離心3分鐘，再打開管蓋進(jìn)行分裝、溶解和保存（如果抗體體積小于50ul，請(qǐng)延長(zhǎng)離心時(shí)間至5 分鐘，以保證全部抗體均離心下來，干粉狀態(tài)的同樣適用）。Bioss抗體使用特制的儲(chǔ)存管，只有在12000rpm 離心3分鐘，才能將附著在管壁或蓋內(nèi)的抗體全部離心下來（即使是在10000rpm離心也會(huì)離心不*，導(dǎo)致出現(xiàn)抗體的量不足的現(xiàn)象）。請(qǐng)按照說明書推薦的保存條件正確保存和使用抗體。

二、抗體的長(zhǎng)期保存
對(duì)于Bioss大部分抗體，比較合適的保存方式是：分裝后保存在-20℃或者-80℃。 
（1）對(duì)絕大多數(shù)Bioss抗體來說，保存在-20℃就*足夠了。 
（2）分裝可以zui大程度的降低反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害，同時(shí)也降低了由于多次從同一管中吸取抗體造成的污染可能性。 
（3）分裝的量以一次實(shí)驗(yàn)用完為好，zui少不能少于10ul每份。因?yàn)榉盅b體積越小，抗體的濃度越可能會(huì)受到蒸發(fā)以及管壁吸附的影響。 
（4）復(fù)融后的分裝抗體如果一次用不完，將剩余母液保存在4℃，避免再凍起來。 
（5）抗體工作液應(yīng)該當(dāng)天配制當(dāng)天用完，4℃保存盡量不要超過1天。

三、抗體的短期保存
大部分，在4℃短暫保存1~2 周對(duì)抗體活性沒有影響。如果抗體很快會(huì)使用（1~2 周內(nèi)），推薦在4℃保存，這是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害，如果要長(zhǎng)期保存，則是在-20℃或者-80℃。zui關(guān)鍵的一點(diǎn)是要根據(jù)說明書推薦的方式來正確的保存抗體。腹水形式的抗體產(chǎn)品請(qǐng)?jiān)谑盏胶罅⒓磧銎饋恚驗(yàn)樵擃惍a(chǎn)品含有大量的蛋白酶，長(zhǎng)期在4℃保存會(huì)導(dǎo)致抗體的降解。

四、抗體的運(yùn)輸條件
一般國(guó)內(nèi)的的運(yùn)輸過程需要2-5天的時(shí)間，是在低溫4℃的條件下來完成的。 4℃運(yùn)輸zui主要的目的是為了避免反復(fù)凍融對(duì)抗體活性的損害（如果使用干冰運(yùn)輸，那么收到時(shí)抗體是凍起來的，為了分裝就需要解凍，這就多了一次凍融的過程），所以抗體運(yùn)輸過程中避免干冰運(yùn)輸。

五、抗體的穩(wěn)定性
（1） 抗體的穩(wěn)定性是自然界長(zhǎng)期進(jìn)化的結(jié)果，抗體是免疫系統(tǒng)中zui重要的分子之一，其穩(wěn)定性是自然進(jìn)化篩選的結(jié)果，在眾多物種中，抗體分子形成了保守而穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。 
（2）抗體分子的高Tm值，在室溫下，甚至短時(shí)間溫度達(dá)到50~60℃，抗體分子都能維持正確折疊，保持其應(yīng)有的活性。 
（3）抗體的純度。Bioss采用*的抗體純化技術(shù)，確保抗體產(chǎn)品的高純度，保障其抗體產(chǎn)品的穩(wěn)定性。 
（4）抗體的濃度。高濃度的抗體產(chǎn)品可減少容器表面吸附造成的物質(zhì)損失，高濃度的抗體穩(wěn)定性更好。Bioss大部分抗體濃度為1mg/ml，抗體純度高，特異性好，效價(jià)更高。

六、關(guān)于加入甘油保存
有些人會(huì)加50%的甘油到抗體中來避免反復(fù)凍融，甘油在-20℃會(huì)降低冰點(diǎn)，這對(duì)很多抗體可能是可行的。加入甘油的溶液不建議在-80℃保存，因?yàn)檫@已經(jīng)超過了甘油的冰點(diǎn)。如果您要加入甘油來保存抗體的話，請(qǐng)謹(jǐn)慎注意無菌操作，避免污染。

七、關(guān)于蛋白保護(hù)劑

蛋白在高濃度時(shí)更不容易降解（1mg/ml 或者更高），這就是為什么在抗體中加入BSA 之類作為穩(wěn)定劑的原因了；另一方面，加入的蛋白也可以減少抗體由于管壁吸附所造成的損失。但是如果抗體要用來標(biāo)記的話，則不能加入蛋白穩(wěn)定劑，因?yàn)檫@些穩(wěn)定劑會(huì)和抗體一起競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合標(biāo)記物。

 八、關(guān)于Proclin300的使用

為了防止微生物污染，Proclin300經(jīng)常被加入到抗體中（終濃度0.03% (w/v)）。Bioss的絕大部分抗體已經(jīng)含有了0.03％的Proclin300，在說明書的儲(chǔ)存緩沖液中有標(biāo)明。

九、特殊抗體的保存條件
偶聯(lián)抗體：所有偶聯(lián)抗體都需要在棕色管中或使用錫箔紙避光 保存，尤其是熒光抗體，對(duì)光極為敏感，因此在所有的實(shí)驗(yàn)階段也是要避光操作的。