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Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell

參   考   價(jià): 990

訂  貨  量: ≥1  件

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品       牌其他品牌

廠(chǎng)商性質(zhì)生產(chǎn)商

所  在  地上海

更新時(shí)間:2020-09-02 16:11:42瀏覽次數(shù):797次

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純度 99.99% 供貨周期 現(xiàn)貨
規(guī)格 100μl/支 貨號(hào) XY9058
應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) 主要用途 Rosetta 2(DE3)菌株來(lái)源于BL21,是BL21的衍生菌株,為L(zhǎng)on蛋
Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell來(lái)源于BL21,是BL21的衍生菌株,為L(zhǎng)on蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株,這兩種酶的缺失有效防止異源蛋白在大腸桿菌體內(nèi)的降解。將具有氯霉素抗性的pRARE2質(zhì)粒導(dǎo)入BL21 (DE3)細(xì)胞中即是Rosetta 2(DE3),pRARE2質(zhì)??裳a(bǔ)充大腸桿菌缺乏的7種稀有密碼子

Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell

產(chǎn)品規(guī)格 

 

Rosetta 2(DE3):                                               100μl/支

pUC19 (control vector,10pg/μl):                           10μl

保存條件(保質(zhì)期):                                   -80℃(6個(gè)月) 

基因型

 

F- ompT hsdSB(rB- mB-gal dcm (DE3) pRARE2 (CamR)

 

 

Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell產(chǎn)品說(shuō)明

Rosetta 2(DE3)菌株來(lái)源于BL21,是BL21的衍生菌株,為L(zhǎng)on蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株,這兩種酶的缺失有效防止異源蛋白在大腸桿菌體內(nèi)的降解。將具有氯霉素抗性的pRARE2質(zhì)粒導(dǎo)入BL21 (DE3)細(xì)胞中即是Rosetta 2(DE3),pRARE2質(zhì)??裳a(bǔ)充大腸桿菌缺乏的7種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)對(duì)應(yīng)的tRNA,提高外源基因的表達(dá)水平。該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(qū) (DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶),可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。Rosetta 2(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率達(dá)10cfu/μg DNA。

 

操作方法

1. Rosetta 2(DE3)感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的質(zhì)粒并用手EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。

2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。

3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的LB無(wú)菌培養(yǎng)液,37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。

4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取50 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上。

5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。

 

 

 

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