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產(chǎn)品型號(hào)
品 牌其他品牌
廠(chǎng)商性質(zhì)生產(chǎn)商
所 在 地上海
更新時(shí)間:2020-09-02 16:11:42瀏覽次數(shù):797次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來(lái)自 化工儀器網(wǎng)DH5α Chemically Competent Cell
XL10-Gold Chemically Competent Cell
DB3.1 Electroporation-Competent Cel
DB3.1 Chemically Competent Cell
純度 | 99.99% | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
---|---|---|---|
規(guī)格 | 100μl/支 | 貨號(hào) | XY9058 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)業(yè) | 主要用途 | Rosetta 2(DE3)菌株來(lái)源于BL21,是BL21的衍生菌株,為L(zhǎng)on蛋 |
Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell
產(chǎn)品規(guī)格
Rosetta 2(DE3): 100μl/支
pUC19 (control vector,10pg/μl): 10μl
保存條件(保質(zhì)期): -80℃(6個(gè)月)
基因型
F- ompT hsdSB(rB- mB-) gal dcm (DE3) pRARE2 (CamR)
Rosetta 2(DE3) Chemically Competent Cell產(chǎn)品說(shuō)明
Rosetta 2(DE3)菌株來(lái)源于BL21,是BL21的衍生菌株,為L(zhǎng)on蛋白酶和膜外蛋白酶OMPT的缺陷型菌株,這兩種酶的缺失有效防止異源蛋白在大腸桿菌體內(nèi)的降解。將具有氯霉素抗性的pRARE2質(zhì)粒導(dǎo)入BL21 (DE3)細(xì)胞中即是Rosetta 2(DE3),pRARE2質(zhì)??裳a(bǔ)充大腸桿菌缺乏的7種稀有密碼子(AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, GGA和CGG)對(duì)應(yīng)的tRNA,提高外源基因的表達(dá)水平。該菌株染色體整合了λ噬菌體DE3區(qū) (DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶),可同時(shí)表達(dá)T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEX,pMAL等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。Rosetta 2(DE3)感受態(tài)細(xì)胞由特殊工藝制作,pUC19質(zhì)粒檢測(cè)轉(zhuǎn)化效率達(dá)108 cfu/μg DNA。
操作方法
1. Rosetta 2(DE3)感受態(tài)細(xì)胞從-80℃拿出,迅速插入冰中,5分鐘后待菌塊融化,加入目的質(zhì)粒并用手打EP管底輕輕混勻(避免用槍吸打),冰中靜置25分鐘。
2. 42℃水浴熱激45秒,迅速放回冰中并靜置2分鐘,晃動(dòng)會(huì)降低轉(zhuǎn)化效率。
3. 向離心管中加入700 μl不含抗生素的LB無(wú)菌培養(yǎng)液,37℃,200 rpm復(fù)蘇60分鐘。
4. 5000 rpm離心一分鐘收菌,留取50 μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應(yīng)抗生素的LB培養(yǎng)基上。
5. 將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)。
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