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標準品的稀釋原則: 2 瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至 1ml ,蓋好后靜置 10 分鐘以上,然后反復顛倒 / 搓動以助溶解,其濃度為 300 pg/ml ,做系列倍比稀釋后,分別稀釋 300 pg/ml , 150 pg/ml , 75 pg/ml , 37.5 pg/ml , 18.5 pg/ml , 9 pg/ml , 4.5 pg/ml ,樣品稀釋液直接作為標準濃度 0 pg/ml ,臨用前 15 分鐘內(nèi)配制。 如配制 150 pg/ml 標準品:取 0.5ml (不要少于 0.5ml ) 300 pg/ml 的上述標準品加入含 0.5ml 樣品稀釋液的 Eppendorf 管中,混勻即可,其余濃度以此類推。 生物素標記抗體的稀釋原則: 臨用前以生物素標記抗體稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔 100 μ l ),實際配制時應多配制 0.1-0.2ml 。如 10 μ l 生物素標記抗體加 990 μ l 生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。 辣根過氧化物酶標記親和素的稀釋原則: 臨用前以辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(每孔 100 μ l ),實際配制時應多配制 0.1-0.2ml 。如 10 μ l 辣根過氧化物酶標記親和素加 990 μ l 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
人類成纖維細胞(多種種屬)實驗科研認可品牌
脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白ELISA試劑盒
檢測范圍:歡迎QQ或電話索取原版說明書.
產(chǎn)品規(guī)格:96T/48T。
主要成分:酶標板,試劑,標準品等
經(jīng)營種類:進口分裝和原裝、國產(chǎn)
性狀:盒裝液體
試劑盒保存:2-8℃低溫保存。
標本:血清、、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA常用的方法:雙抗體夾心法、間接法、競爭法以及BAS-ELISA等。
預期應用:ELISA法定量測定血清、、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。
選購要點:一、經(jīng)濟性對于選擇進口品牌的試劑盒還是國產(chǎn)品牌的試劑盒,可以根據(jù)實驗室課題經(jīng)費以及各品牌的產(chǎn)品質(zhì)量和美譽度來自行選擇。一般質(zhì)量可靠,文獻引用多。建議大家通過閱讀SCI文獻,了解同行所使用的品牌。但品牌由于進口和運輸?shù)瘸杀据^高,因此售價也較高。 二、美譽度不論選擇品牌還是國產(chǎn)品牌時,都要注意產(chǎn)品的質(zhì)量、度和美譽度。不是說所有的國外品牌質(zhì)量都可靠,有些品牌其實是OEM貼牌的,質(zhì)量不一定有保障。還有一些公司提供的試劑盒,就更不靠譜了,相關(guān)指標的抗體,找遍都沒有,如何開發(fā)出相應的ELISA試劑盒呢? 所以對于新手而言,一定要謹慎選擇。 三、靈敏度和檢測范圍靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的zui低限,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標水平很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的ELISA試劑盒。如果待檢指標的濃度高于試劑盒標準曲線的zui高值,則需要適當倍數(shù)稀釋樣本,計算結(jié)果時,乘以相應的系數(shù)倍數(shù)即可,如果樣本中待檢指標含量較低,一般不建議再做稀釋。 四、重復性科學實驗講求重復性,一般ELISA試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應該控制在15%以內(nèi)。在選擇試劑盒時,要通過閱讀相應的說明書或電話咨詢廠家試劑盒的相關(guān)技術(shù)參數(shù)。 五、試劑盒特異性 ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分--抗體對有關(guān),若抗體對中之一為多抗,另一個必須為單抗,建議使用雙單抗。在選擇市面上的試劑盒時,先閱讀相關(guān)產(chǎn)品的說明書,了解試劑盒的特異性和交叉反應性。 六、文獻引用選ELISA試劑盒時,SCI文獻的引用有參考價值。這也是業(yè)界對產(chǎn)品認可的一個非常重要的指標。重尤其選擇國內(nèi)品牌時,一定要多了解下該品牌的文獻引用情況以及在業(yè)內(nèi)的口碑。大家可以在Google scholar 里檢驗下。也可以到一些行業(yè)論壇上去了解相關(guān)品牌的信息,如丁香通、小木蟲等。
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編輯:小檀20181010
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