生物污染的主要類型:
1
細(xì)菌污染
檢測:在被感染后的幾天內(nèi),通過肉眼檢查培養(yǎng)物很容易檢測到細(xì)菌污染;受感染的培養(yǎng)物通常出現(xiàn)渾濁(即渾濁),有時表面有一層薄膜。培養(yǎng)基的 pH 值突然下降也經(jīng)常遇到。在低倍顯微鏡下,細(xì)菌表現(xiàn)為細(xì)胞間微小的移動顆粒,在高倍顯微鏡下觀察可以分辨出單個細(xì)菌的形狀。
2
霉菌污染
檢測:與酵母菌污染類似,培養(yǎng)物的 pH 值在污染的初始階段保持穩(wěn)定,然后隨著培養(yǎng)物受到更嚴(yán)重的感染并變得渾濁而迅速增加。在顯微鏡下,菌絲體通常表現(xiàn)為細(xì)絲狀,有時表現(xiàn)為更密集的孢子團(tuán)。許多霉菌物種的孢子在其休眠階段可以在極其惡劣和不適宜居住的環(huán)境中生存,只有在遇到合適的生長條件時才會被激活。
3
病毒污染
檢測:細(xì)胞培養(yǎng)物的病毒感染可以通過電子顯微鏡、使用一組抗體的免疫染色、ELISA 測定或使用適當(dāng)病毒引物的 PCR擴(kuò)增來檢測。
4
支原體污染
一些生長緩慢的支原體可能會在培養(yǎng)物中持續(xù)存在而不會導(dǎo)致細(xì)胞死亡,但它們可以改變培養(yǎng)物中宿主細(xì)胞的行為和新陳代謝。
檢測:慢性支原體感染可能表現(xiàn)為細(xì)胞增殖率降低、飽和密度降低和懸浮培養(yǎng)中的凝集;然而,可靠的檢測支原體污染的方法是定期使用熒光染色(例如,Hoechst 33258)、ELISA、PCR、免疫染色、放射自顯影或微生物測定對培養(yǎng)物進(jìn)行檢測。
5
酵母菌污染
檢測:與細(xì)菌污染一樣,被酵母菌污染的培養(yǎng)物會變得渾濁,尤其是當(dāng)污染處于晚期時。被酵母菌污染的培養(yǎng)物的 pH 值幾乎沒有變化,直到污染變得嚴(yán)重,在此階段 pH 值通常會增加。在顯微鏡下,酵母表現(xiàn)為單個卵形或球形顆粒。
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