ELISA方法從1970年代發(fā)展到現(xiàn)在,已經(jīng)是一項(xiàng)實(shí)驗(yàn)室基本的免疫檢測(cè)技術(shù),廣泛的應(yīng)用于基礎(chǔ)研究和臨床檢驗(yàn)。
那么對(duì)于剛進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的新手,或者準(zhǔn)備開展ELISA實(shí)驗(yàn)的人員,又該如何選擇ELISA試劑盒呢?
目前ELISA試劑盒在實(shí)驗(yàn)室已經(jīng)相當(dāng)普及,絕大多數(shù)ELISA試劑盒都是用于檢測(cè)未知樣本中抗原的濃度。用商業(yè)化試劑盒當(dāng)然比自己慢慢摸條件快得多,ELISA試劑盒不僅可以讓實(shí)驗(yàn)更便利,往往還更加?,F(xiàn)在市面上的ELISA試劑盒既有國(guó)產(chǎn)品牌也有進(jìn)口品牌,數(shù)量繁多令人目不暇接,怎樣才能選出適用的產(chǎn)品呢?
1.試劑盒特異性
ELISA試劑盒的特異性與試劑盒的關(guān)鍵組分--抗體對(duì)有關(guān),若抗體對(duì)中之一為多抗,另一個(gè)必須為單抗,建議使用雙單抗。在選擇市面上的試劑盒時(shí),先閱讀相關(guān)產(chǎn)品的說明書,了解試劑盒的特異性和交叉反應(yīng)性。
2.靈敏度和檢測(cè)范圍
靈敏度反映的是試劑盒檢出被檢物質(zhì)的低限,用戶可根據(jù)自己樣本中待檢指標(biāo)的量選擇合適的試劑盒,如果待檢指標(biāo)水平很低,一般的試劑盒不能滿足要求,可選擇高敏的ELISA試劑盒。如果待檢指標(biāo)的濃度高于試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的zui高值,則需要適當(dāng)倍數(shù)稀釋樣本,計(jì)算結(jié)果時(shí),乘以相應(yīng)的系數(shù)倍數(shù)即可,如果樣本中待檢指標(biāo)含量較低,一般不建議再做稀釋。
3.重復(fù)性
科學(xué)實(shí)驗(yàn)講求重復(fù)性,一般ELISA試劑盒,其板內(nèi)和板間變異系數(shù)應(yīng)該控制在15%以內(nèi)。在選擇試劑盒時(shí),要通過閱讀相應(yīng)的說明書或咨詢廠家試劑盒的相關(guān)技術(shù)參數(shù)。
4.經(jīng)濟(jì)性
對(duì)于選擇進(jìn)口品牌的試劑盒還是國(guó)產(chǎn)品牌的試劑盒,可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)室課題經(jīng)費(fèi)以及各品牌的產(chǎn)品質(zhì)量和美譽(yù)度來(lái)自行選擇。國(guó)際知名品牌一般質(zhì)量可靠,文獻(xiàn)引用多。建議大家通過閱讀SCI文獻(xiàn),了解同行所使用的品牌。但國(guó)際品牌由于進(jìn)口和國(guó)際運(yùn)輸?shù)瘸杀据^高,因此售價(jià)也較高。
國(guó)產(chǎn)品牌,因?yàn)槭∪ゲ簧傥锪骱蛨?bào)關(guān)費(fèi)用,與國(guó)外進(jìn)口試劑盒相比價(jià)格上有比較大的優(yōu)惠,而且能提供比較靈活的包裝規(guī)格,如48tests小包裝。
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