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當(dāng)前位置:武漢集思儀器設(shè)備有限公司>>技術(shù)文章>>HPLC色譜柱常見(jiàn)疑難解答(1)
請(qǐng)問(wèn):我的柱壓為什么一直很高?每天做完后我用于5%的甲醇0.2ml/min沖過(guò)液,第二天用甲醇沖30min后再進(jìn)行工作。
答:柱壓過(guò)高是HPLC柱用戶zui常碰到的問(wèn)題。其原因有多方面,而且常常并不是柱子本身的問(wèn)題,我建議你可按下面步驟檢查問(wèn)題的起因。
1、拆去保護(hù)柱(哪個(gè)是保護(hù)柱?),看柱壓是否還高,否則是保護(hù)柱的問(wèn)題,若柱壓仍高,再檢查;
2、把色譜柱從儀器上取下,看壓力是否下降,否則是管路堵塞,需清洗,若壓力下降,再檢查。
3、將柱子的進(jìn)出口反過(guò)來(lái)接在儀器上,用10倍柱體積的流動(dòng)相沖洗柱子,(此時(shí)不要連接檢測(cè)器,以防固體顆粒進(jìn)入檢測(cè)器)。這時(shí),如果柱壓仍不下降,再檢查;
4、更換柱子入口篩板,若柱壓下降,說(shuō)明你的溶劑或樣品含有顆粒雜質(zhì),正是這些雜質(zhì)將篩板堵塞引起壓力上升。若柱壓還高,請(qǐng)與柱子廠商。一般情況下,在進(jìn)樣器與保護(hù)柱之間接一個(gè)在線過(guò)濾器便可避免柱壓過(guò)高的問(wèn)題。
我看到你用5%的甲醇0.2ml/min沖過(guò)液,雖然流速很低,但你的水相占比例大,對(duì)柱子的壽命不好,不知道你的是長(zhǎng)柱還是短柱,柱壓有多高?請(qǐng)告知!
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