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高效液相色譜法(HPLC)是上個(gè)世紀(jì)七十年代迅速發(fā)展起來的一項(xiàng)高效、快速的分析分離技術(shù),是現(xiàn)代分離測試的重要手段。
色譜法的分離原理是:溶于流動相(mobile phase)中的各組分經(jīng)過固定相時(shí),由于與固定相(station phase)發(fā)生作用(吸附、分配、排阻、親和)的大小、強(qiáng)弱不同,在固定相中滯留時(shí)間不同,從而先后從固定相中流出。又稱為色層法、層析法。
高效液相色譜法(HPLC)是在經(jīng)典的液相色譜法基礎(chǔ)上發(fā)展起來的,其以液體作為流動相,并采用顆粒極細(xì)的高效固定相的柱色譜分離技術(shù)。其分離機(jī)制與常規(guī)柱色譜相同,但填料更加精細(xì),需高壓泵推動,柱效高,分析速度快。
與氣相色譜不同的是液相色譜中流動相亦參與組分的分離過程,其組成、比例和pH值可靈活調(diào)節(jié),分離模式多樣。在實(shí)際操作中主要通過改變流動相的組成來調(diào)節(jié)樣品在色譜柱的保留值和選擇性,從而使不同樣品得到分離。
高效液相色譜法(HPLC)的應(yīng)用范圍十分廣泛,對樣品的適用性廣,不受分析對象揮發(fā)性和熱穩(wěn)定性的限制,幾乎所有的化合物包括高沸點(diǎn)、極性、離子型化合物和大分子物質(zhì)均可用高效液相色譜法分析測定,因而彌補(bǔ)了氣相色譜法的不足。在目前已知的有機(jī)化合物中,可用氣相色譜分析的約占20% ,而80% 則需用高效液相色譜來分析。
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