對(duì)于每一個(gè)身經(jīng)百柱的分離純化研究員來說，液相色譜圖是他們打開未知物質(zhì)世界的大門，科研中的很多問題都能從色譜圖中得到很好的反映，有些問題可以通過改變?cè)O(shè)備參數(shù)得到解決，而有些問題則必須通過修改操作程序來解決，畢竟，正確選擇色譜柱和流動(dòng)相才是得到好的色譜圖的關(guān)鍵。小編在此根據(jù)大家實(shí)踐中可能會(huì)經(jīng)常遇到的一些液相色譜圖譜問題進(jìn)行了整理匯總，大家一起來看一下吧。 
 
一、拖尾峰

1.篩板阻塞：柱子兩頭的過濾篩板如果堵塞，樣品就會(huì)在篩板部分受阻而形成時(shí)間延遲，使得樣品在柱后流出時(shí)峰型形成拖尾。需要通過反沖色譜柱，或者更換篩板。
2.色譜柱塌陷：是指色譜柱由于其它原因引起了柱效率喪失，不能對(duì)物質(zhì)形成保留，使得物質(zhì)不在固定相上保留而隨流動(dòng)相流出，但是又還有一點(diǎn)柱效，因此形成拖尾。需要重新填充色譜柱或者更換色譜柱。
3.有污染：即樣品不在同一起跑線起跑，從后面開始跑得到達(dá)終點(diǎn)稍晚，表現(xiàn)出拖尾。更換色譜柱或者采用有機(jī)溶劑梯度洗脫1h以上，以沖洗柱子。
4.流動(dòng)相PH值選擇錯(cuò)誤：如某PH下有的樣品存在分子型和離子型的動(dòng)態(tài)平衡，離子型的陸續(xù)向分子型轉(zhuǎn)化就會(huì)表現(xiàn)出拖尾。調(diào)節(jié)PH值可抑制分子解離，改善拖尾，對(duì)于堿性化合物，相對(duì)較低的PH值更有利于得到對(duì)稱峰。
 
二、前沿峰

1.樣品過載：被保留的樣品在正常出峰時(shí)間前陸續(xù)出來，形成前沿峰。降低樣品含量。
2.樣品溶劑選擇不恰當(dāng)：當(dāng)樣品溶劑的洗脫能力大大強(qiáng)于流動(dòng)相時(shí)會(huì)出現(xiàn)前沿峰，例如，在反相色譜中用已腈做樣品溶劑，而流動(dòng)相的洗脫力較弱時(shí)會(huì)出現(xiàn)前沿峰。選擇流動(dòng)相或者接近流動(dòng)相的比例作為樣品溶劑。
3.色譜柱損壞：色譜柱柱效損失，不能對(duì)物質(zhì)形成保留。更換色譜柱。
4.在大峰前有小峰出現(xiàn)，假象前沿峰，即大峰前包埋了沒有分開的小峰。調(diào)整流動(dòng)相洗脫梯度。
 
三、基線漂移

1.柱溫波動(dòng)：即使是很小的溫度變化都會(huì)引起基線的波動(dòng)，通常影響示差檢測(cè)器、電導(dǎo)檢測(cè)器、較低靈敏度的紫外檢測(cè)器或其它光電類檢測(cè)器。使用柱溫箱，控制好柱子和流動(dòng)相的溫度，在檢測(cè)器之前使用熱交換器。
2.流動(dòng)相不均勻：流動(dòng)相條件變化引起的基線漂移大于溫度導(dǎo)致的漂移。使用HPLC級(jí)的溶劑，流動(dòng)相在使用前進(jìn)行脫氣處理。
3.流通池被污染或有氣體：用甲醇或其他強(qiáng)極性溶劑沖洗流通池。如有需要，可以用1N的硝酸(不要用鹽酸)。
4.流動(dòng)相配比不當(dāng)或流速變化：更改配比或流速，為避免這個(gè)問題可定期檢查流動(dòng)相組成及流速。
5.樣品中有強(qiáng)保留的物質(zhì)：以饅頭峰樣被洗脫出，從而表現(xiàn)出一個(gè)逐步升高的基線。使用保護(hù)柱，如有必要，在進(jìn)樣之間或在分析過程中，定期用強(qiáng)溶劑沖洗柱子。