液相色譜儀是屬于易學(xué)難用的儀器，特別講究 “正確使用” 和經(jīng)驗(yàn)。液相工作者接觸最多的是流動相，流動相是造成液相色譜各種問題的主要源頭。液相色譜儀*常見的故障一是堵，二是漏。

“

堵”的原因之一：配制流動相時(shí)細(xì)菌污染。

堵塞的主要位置就是在液相色譜儀色譜柱的前端，最主要原因就是流動相里有雜質(zhì)，雜質(zhì)的主要來源就是細(xì)菌。  

首先我們要認(rèn)識到，一般的國產(chǎn)甲醇其實(shí)不需要額外過濾處理，直接使用沒有問題。即使是有些固態(tài)微粒雜質(zhì)，也能在液相流路系統(tǒng)最前端的過濾頭上排除，真正容易引起問題的，是水中的細(xì)菌。新制備的純水在室內(nèi)放置幾天就會長菌，而這些細(xì)菌雖然肉眼不可見，卻足以堵塞柱填料顆粒的空隙，造成柱子很快報(bào)廢。時(shí)間過久,濾頭黏附細(xì)菌導(dǎo)致泵液不準(zhǔn)

解決液相色譜儀“堵”的方法很簡單，就是確保水的可靠性。這里有兩種方式推薦：

（1）理想的方式當(dāng)然是購買實(shí)驗(yàn)室zhuan用純水機(jī)，既方便又可靠，質(zhì)量也放心。wei一的缺點(diǎn)就是價(jià)格不菲。

（2） 成箱購買市售品牌純凈水，如500ml 一支的怡寶或娃哈哈，這些水的質(zhì)量足以應(yīng)付液相色譜的要求。

這里特別指出一個(gè)細(xì)節(jié)：在絕大多數(shù)書本上，凡談到配制流動相都會談到最后有一個(gè)過濾的步驟。

在運(yùn)用多元液相色譜儀時(shí)的一種不良運(yùn)用習(xí)氣容易造成活動相剛開始沒有長菌，在運(yùn)用時(shí)卻產(chǎn)生了細(xì)菌污染。

舉一個(gè)例子：50％的甲醇水活動相，有兩種運(yùn)用方式。一種方式是在液相色譜儀上機(jī)前就配好混合在一同，另一種方式是在流路A放純甲醇，流路B放純水。后一種有明顯的優(yōu)點(diǎn)簡單，而且不需求實(shí)驗(yàn)者另個(gè)計(jì)算配比混合，其次就是比例jing確，能得到保存時(shí)間反復(fù)性*的實(shí)驗(yàn)效果。

但是，后一種方式有一個(gè)致命的缺陷是純水在活動相瓶中幾天時(shí)間就會長細(xì)菌（很多狀況下不只僅用純水作活動相，而是用緩沖鹽溶液，自身就是優(yōu)質(zhì)肥料，細(xì)菌長得更疾速），一旦有細(xì)菌柱子就壞得很快。

所以這種方式*好是每次實(shí)驗(yàn)都用新制備的純水，并且在每次實(shí)驗(yàn)后把水相換掉，換成甲醇沖洗潔凈。

但是由于液相色譜儀柱子的梗塞是不可逆的，所以，還是比較推薦di一種方式，寧可犧牲較小的保留時(shí)間重復(fù)性，也不要用純水溶液作為流動相的一組。

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