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目前市面上商品化的反相色譜柱各式各樣,時(shí)常讓實(shí)驗(yàn)人員眼花繚亂,產(chǎn)生幸福的煩惱,很難快速選擇合適的色譜柱。通常我們會(huì)從鍵合相類型、鍵合相在硅膠表面的覆蓋率、是否封端、封端類型等方面去選擇反相色譜柱。但是還可以從已表征色譜柱的參數(shù),通過量化數(shù)值去快速選擇合適的反相色譜柱。
色譜柱表征體系
色譜柱表征體系通過量化分析色譜柱中影響溶質(zhì)保留行為的特征,對(duì)色譜柱進(jìn)行分類,從而指導(dǎo)實(shí)際工作中色譜柱的選擇。有效的色譜柱表征體系應(yīng)具有以下特點(diǎn):
(1)考慮了對(duì)色譜柱選擇性有貢獻(xiàn)的所有因素;
(2)每一個(gè)柱參數(shù)表征一種專屬的溶質(zhì)—色譜柱相互作用;
(3)能夠得到大部分商業(yè)柱的色譜柱參數(shù);
(4)對(duì)于特定色譜柱,不同實(shí)驗(yàn)室能夠得到 可重現(xiàn)的色譜柱參數(shù);
(5)在特定實(shí)驗(yàn)條件下測(cè)定的色譜柱參數(shù)能應(yīng)用到任何流動(dòng)相或任何柱溫下的分離。
目前上比較成熟的色譜柱表征體系有4個(gè),分別是由Snyder、Euerby、Hoogmartens和USP色譜柱工作小組領(lǐng)導(dǎo)完成。其中,由Snyder等基于反相色譜保留機(jī)制提出的疏水消除模型,理論基礎(chǔ)較堅(jiān)實(shí),對(duì)色譜柱選擇性的表征較全面,與其余3個(gè)體系的柱參數(shù)本質(zhì)上并無區(qū)別,均取自代表性溶質(zhì)的保留值,參數(shù)測(cè)定方法簡(jiǎn)便,實(shí)現(xiàn)選擇相似或者不同色譜柱的目的。由于USP網(wǎng)站公開常用色譜柱的參數(shù),USP方法表征的色譜參數(shù)更方便我們篩選色譜柱。
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