1. 小分子量的融合肽：這類標(biāo)簽蛋白只有幾個(gè)氨基酸，如poly His，StrepII-tag，F(xiàn)LAG，c-myc-等，主要用于靶蛋白的純化，也可用于靶蛋白的輔助檢測(cè)，且由于分子量很小，幾乎不干涉靶蛋白的結(jié)構(gòu)，活性和功能，一般純化后不用去除標(biāo)簽，非常簡(jiǎn)單方便。目前zui常使用的是poly His標(biāo)簽蛋白，可使用金屬離子親和層析(IMAC)進(jìn)行純化，用梯度濃度咪唑溶液洗脫。當(dāng)靶蛋白為包涵體時(shí)，也可在變性條件下純化靶蛋白，容易實(shí)現(xiàn)規(guī)?；?，是目前應(yīng)用的方法。但是該方法也有自身的局限性，由于許多蛋白有內(nèi)在的組氨酸和/或半胱氨酸氨基酸殘基，其它的非特異蛋白與靶蛋白一起與金屬離子親和層析柱料發(fā)生結(jié)合，影響靶蛋白的純度；另外，咪唑可能會(huì)影響晶體學(xué)，NMR等實(shí)驗(yàn)；咪唑也會(huì)導(dǎo)致一些蛋白質(zhì)的聚集；由于金屬離子可吸附到NTA樹脂上，帶金屬離子中心的蛋白質(zhì)也不適合用該方法純化，另外Ni2+-NTA可被還原，在厭氧條件下也不適合使用該方法。

Strep-tagII，只有8個(gè)氨基酸(色氨酸-絲氨酸-組氨酸-脯氨酸-谷氨酰胺-苯丙氨酸-谷氨酸-賴氨酸)的小標(biāo)簽，該標(biāo)簽與固定在以Sepharose為基礎(chǔ)的基質(zhì)上的Strep-Tactin 配基特異性結(jié)合，并且Strep-tagII與Strep-Tactin的結(jié)合親和力比鏈霉抗生物素蛋白結(jié)合親和力多大約100倍，使得StrepTactin Sepharose 高性能適合純化Strep-tag II蛋白，得到的靶蛋白純度更高。純化均在生理?xiàng)l件下進(jìn)行，使用脫硫生物素溫和的洗脫很好地保護(hù)了靶蛋白的活性。Strep-tag II的*性能被越來(lái)越多的科研者認(rèn)識(shí)并應(yīng)用。

2. 大分子量增溶性融合蛋白：如GST (谷胱甘肽-S 轉(zhuǎn)移酶), MBP（麥芽糖結(jié)合蛋白），SUMO（泛素樣修飾蛋白），NusA（轉(zhuǎn)錄終止抗終止因子），TrxA（大腸桿菌硫氧還蛋白），DsbA（蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶）等，這類融合蛋白的主要功能是提高靶蛋白的可溶性，促進(jìn)靶蛋白正確折疊，提高穩(wěn)定性。其中GST標(biāo)簽蛋白可直接利用含有還原型谷胱甘肽瓊脂糖凝膠(Glutathione sepharose)親和樹脂進(jìn)行純化，MBP融合蛋白可通過交聯(lián)淀粉親和層析一步純化。其他幾個(gè)融合蛋白則不能直接純化，蛋白融合構(gòu)建時(shí)需要和用于純化的小標(biāo)簽聯(lián)用，如在靶蛋白N端融合His-SUMO的方式。但是由于這些融合蛋白的分子量比較大，容易影響到靶蛋白的構(gòu)象和功能，因此純化后需要切除，通常的方式是在融合蛋白和靶蛋白之間加入蛋白酶（一般有腸激酶，TEV，凝血酶，Xa因子）識(shí)別特異序列，切割后經(jīng)過親和層析，去除標(biāo)簽蛋白部分，得到靶蛋白，但會(huì)在靶蛋白N端殘留2-3個(gè)氨基酸，一般不會(huì)影響靶蛋白的結(jié)構(gòu)和活性，但有些蛋白的活性對(duì)N端的外源氨基酸很敏感，甚至多出一個(gè)外源氨基酸都會(huì)影響到蛋白的活性。

需要重點(diǎn)指出SUMO作為融合蛋白的一個(gè)重要優(yōu)點(diǎn)，即SUMO蛋白酶特異地識(shí)別完整的SUMO標(biāo)簽蛋白序列，*移除SUMO標(biāo)簽蛋白，不會(huì)殘留外源氨基酸。SUMO蛋白酶在較寬范圍的反應(yīng)環(huán)境體系中保持較高的活力，例如溫度（4～30℃）、pH（5.5～9.5）等。SUMO蛋白酶帶有多聚His標(biāo)簽，融合蛋白切割后可進(jìn)行親和層析純化，去除SUMO蛋白酶，得到天然的目的蛋白。針對(duì)SUMO的這一優(yōu)勢(shì)，目前科研人員對(duì)SUMO進(jìn)行改造，提高其穩(wěn)定性，開發(fā)了一系列SUMO融合表達(dá)產(chǎn)品，分別針對(duì)原核表達(dá)系統(tǒng)，酵母表達(dá)系統(tǒng)，昆蟲表達(dá)系統(tǒng)和哺乳動(dòng)物表達(dá)系統(tǒng)的表達(dá)載體和SUMO蛋白酶等，被越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。

3. 報(bào)告性融合蛋白：這類融合蛋白常用的有eGFP（增強(qiáng)型綠色熒光蛋白），eCFP（增強(qiáng)型青色熒光蛋白）和eYFP（增強(qiáng)型黃色熒光蛋白）等熒光蛋白，均由野生型熒光蛋白通過氨基酸突變而來(lái)，熒光強(qiáng)度更強(qiáng)、熒光性質(zhì)更穩(wěn)定。融合這些熒光蛋白，可進(jìn)行目標(biāo)基因的活細(xì)胞檢測(cè)，這些熒光蛋白自發(fā)熒光，無(wú)需使用抗體或原位雜交等技術(shù)，無(wú)需破碎組織細(xì)胞，直接通過熒光顯微鏡就可在活細(xì)胞狀態(tài)下實(shí)時(shí)觀察目的基因在細(xì)胞中的亞細(xì)胞定位和表達(dá)情況，可謂活細(xì)胞探針。如果兩個(gè)蛋白分別融合不同熒光蛋白，通過FRET原理，還可進(jìn)行活體細(xì)胞中蛋白互作的研究。熒光蛋白作為標(biāo)簽蛋白，還有以下優(yōu)勢(shì)：自發(fā)熒光，不用破碎組織細(xì)胞，觀察目的基因的實(shí)時(shí)定位和表達(dá)情況；熒光性質(zhì)穩(wěn)定，不受細(xì)胞內(nèi)其他產(chǎn)物的干擾；消耗低，檢測(cè)快速簡(jiǎn)便，靈敏度高且重現(xiàn)性好，非常適合高通量的藥物篩選。目前這些熒光蛋白已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于基團(tuán)表達(dá)調(diào)控、轉(zhuǎn)基因功能研究、蛋白在細(xì)胞中的功能定位、遷移變化及藥物篩選等。

重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司主營(yíng)產(chǎn)品：Lonza支原體檢測(cè)試劑盒,Stemcell胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)基,StemRD生長(zhǎng)分化因子 化工儀器網(wǎng) 設(shè)計(jì)制作，未經(jīng)允許翻錄必究.Copyright(C) http://www.syzwkj.com, All rights reserved.

以上信息由企業(yè)自行提供，信息內(nèi)容的真實(shí)性、準(zhǔn)確性和合法性由相關(guān)企業(yè)負(fù)責(zé)，化工儀器網(wǎng)對(duì)此不承擔(dān)任何保證責(zé)任。
溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買產(chǎn)品前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)及產(chǎn)品質(zhì)量。

性猛交XXXX乱大交派对,四虎影视WWW在线观看免费 ,137最大但人文艺术摄影,联系附近成熟妇女

干細(xì)胞無(wú)血清培養(yǎng)基

干細(xì)胞因子及添加物

細(xì)胞治療產(chǎn)品

細(xì)胞培養(yǎng)耗材

相關(guān)檢測(cè)試劑

其他生物試劑

細(xì)胞凍存

細(xì)胞重編程

蛋白質(zhì)/多肽

抗體/抗原

小型儀器設(shè)備

其他

核酸分析

細(xì)胞株

常用的融合蛋白分為哪幾類的呢