“2014年P(guān)eproTech公司推出自己的流式細胞術(shù)產(chǎn)品品牌，即BioGems。BioGems意為生物鉆石，其產(chǎn)品涵蓋多種熒光標記的流式抗體、具有生物活性的功能性抗體，以及流式細胞術(shù)輔助試劑，如溶血劑和破膜劑等。BioGems產(chǎn)品全部在美國生產(chǎn)，相信其優(yōu)異的品質(zhì)和低于其它流式廠商的價位將能為廣大用戶提供更好的選擇。”

Biogems的流式抗體、ELISA試劑盒等產(chǎn)品一向具有價格優(yōu)勢。2017年Biogems將優(yōu)勢發(fā)揮到底，截止12月底推出一系列產(chǎn)品*活動。

一 Biogems流式抗體

步驟

人T細胞檢測用抗體

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品貨號	克隆號	同型對照	規(guī)格	單價
Anti-HumanCD3FITC	05131-50-25	UCHT1	Mouse IgG1, kappa	25 tests	560元
Anti-Human CD3 PE	05131-60-25	UCHT1	Mouse IgG1, kappa	25 tests	770元
Anti-Human CD3 APC	05131-80-25	UCHT1	Mouse IgG1, kappa	25 tests	910元
Anti-Human CD4 FITC	06121-50-25	RPA-T4	Mouse IgG1, kappa	25 tests	560元
Anti-Human CD4 PE	06111-60-25	OKT4	Mouse IgG1, kappa	25 tests	770元
Anti-Human CD4 APC	06121-80-25	RPA-T4	Mouse IgG1, kappa	25 tests	980元
Anti-Human CD8a FITC	06121-80-25	RPA-T8	Mouse IgG1, kappa	25 tests	630元
Anti-Human CD8a PE	10131-60-25	RPA-T8	Mouse IgG1, kappa	25 tests	700元
Anti-Human CD8a APC	10131-80-25	RPA-T8	Mouse IgG1, kappa	25 tests	980元

人TH1/TH2/TH17染色所需抗體及輔助試劑

產(chǎn)品名稱	產(chǎn)品編號	規(guī)格
Anti-Human CD3 PE	05111-60	25 test/100 tests
Anti-Human CD8a FITC	10111-50	25 test/100 tests
Anti-Human IFN gamma APC	80811-80	25 test/100 tests
Anti-Human IL-4 PE-Cy7	81111-77	25 test/100 tests
Anti-Human IL-17A PE	73821-60	25 test/100 tests
Mouse IgG1 Isotype Control APC	44212-80-100	100 mg
Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7	44212-77-100	100 mg
Mouse IgG1 Isotype Control PE	44212-60-100	100 mg
Brefeldin A	2031560-5mg	5 mg
Ionomycin (calcium salt)	5608212-1mg	1 mg
Phorbol 12-myristate 13-acetate	1652981-1mg	1 mg
Permeabilization Buffer (10X)	92110-00-150	150 ml
Transcription Factor Fixation/Permeabilization Diluent	92160-00-160	160 ml
Transcription Factor Fixation/Permeabilizatio Concentrate	92550-00-50	50 ml

人間充質(zhì)干細胞鑒定抗體

細胞表面流式染色操作步驟：人間充質(zhì)干細胞鑒定方案

1、準備細胞：取培養(yǎng)的細胞離心（300 g/5min），棄去上清, 加入一定量PBS洗滌一次，棄去上清，彈散細胞，細胞重懸到5*106~10*106之間；

2、取100 ml的細胞于EP管或流式管內(nèi)，分三管染色：

*管Anti-human CD90 FITC, Anti human CD105 APC，Anti-human CD45 PE-Cy7各加5 ml；

第二管 Anti-human HLA-RA FITC, Anti-human CD34 PE-Cy7， Anti-human CD73 APC各加5 ml；

第三管Mouse IgG1 K Isotype Control FITC 0.6 ml， Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7 1.2 ml，Mouse IgG1 Isotype Control APC 1.2 ml 。

3、加入相應(yīng)的抗體后混勻，建議彈管子，盡量不用槍頭直接吹打，室溫避光孵育15 min，染色過程中再混勻一次；

4、染色完成后加入1 ml的PBS洗滌細胞，離心300 g/5min；

5、棄去上清，彈散細胞，加入500 ml PBS重懸，上機檢測。

注意：a.同型對照是根據(jù)染色抗體的用量來計算的，所以每種同型對照可能加入量可能不一樣（具體可看后文同型對照章節(jié)的介紹）。

b.先上機檢測同型對照管，各檢測通道以這一管的信號設(shè)為陰性，在上機檢測抗體染色管。

c.zui后結(jié)果的顯示用峰圖來表示，每種抗體的檢測結(jié)果都與對應(yīng)的同型對照染色結(jié)果疊加展示（ overlay ）。

產(chǎn)品訂購信息

品牌	產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
BioGems	03011-50	Anti-Human CD90 (Thy-1) FITC	25 test/100 tests
BioGems	07111-77	Anti-Human CD45 PE-Cy7	25 test/100 tests
BioGems	17111-80	Anti-Human CD105 (Endoglin) APC	25 test/100 tests
BioGems	74111-50	Anti-Human HLA-DR FITC	25 test/100 tests
BioGems	06411-77	Anti-Human CD34 PE-Cy7	25 test/100 tests
BioGems	05811-80	Anti-Human CD73 APC	25 test/100 tests
BioGems	44212-50	Mouse IgG1 K Isotype Control FITC	100 mg
BioGems	44212-77	Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7	100 mg
BioGems	44212-80	Mouse IgG1 Isotype Control APC	100 mg

注意：細胞治療協(xié)會間充質(zhì)和組織干細胞委員會2006年提出了MSC鑒定的zui低標準，關(guān)于細胞表型的要求是表達CD90, CD105和CD73不表達CD45, CD34, CD14或CD11b, CD79a或CD19和HLA-DR；陽性指標都需要染色，陰性指標一般選擇2-3個指標，因為是做細胞表型鑒定，所以要配齊同型對照。

人NK細胞流式鑒定方案

品牌	產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
BioGems	05131-77	Anti-Human CD3 PE-Cy7	25 tests/100 tests
BioGems	08211-50	Anti-Human CD16 FITC	25 tests/100 tests
BioGems	08631-80	Anti-Human CD56 (NCAM) APC	25 tests/100 tests
BioGems	44212-77-100	Mouse IgG1 Isotype Control PE-Cy7	100 mg
BioGems	44212-50-100	Mouse IgG1 Isotype Control FITC	100 mg
BioGems	44212-80-100	Mouse IgG1 Isotype Control APC	100 mg

小鼠外周血淋巴細胞染色

品牌	產(chǎn)品編號	產(chǎn)品名稱	規(guī)格
BioGems	05122-80	Anti-Mouse CD3e APC	25 mg/100 mg
BioGems	06122-60	Anti-Mouse CD4 PE	25 mg/100 mg
BioGems	10122-50	Anti-Mouse CD8a FITC	25 mg/100 mg
BioGems	64010-00-100	10X RBC Lysis Buffer	100ml

人NK細胞流式和小鼠外周血淋巴細胞染色詳細操作步驟參見Biogems操作手冊。

二 CAR-T細胞治療產(chǎn)品³

T細胞刺激抗體²

“SAFIRE純化CD3單抗(clone: OKT3)可以與TCR復(fù)合物結(jié)合，激活T細胞；

SAFIRE純化CD28單抗(clone: CD28.2)是T細胞激活、增殖的輔助刺激分子。

SAFIRE(Sodium Azide Free Immensely Reduced Endotoxins) 類產(chǎn)品是BioGems品牌下的功能性抗體產(chǎn)品，經(jīng)特殊工藝生產(chǎn)、純化，具有諸多優(yōu)點”。

產(chǎn)品訂購信息

品牌	貨號	產(chǎn)品描述	包裝
PeproTech/BioGems	05121-25-500	Anti-Human CD3 SAFIRE Purified （克隆號OKT3）	500μg
PeproTech/BioGems	10311-25-500	Anti-Human CD28 SAFIRE Purified（克隆號CD28.2）	500μg

CAR-T細胞的檢測抗體

產(chǎn)品描述	熒光染料
Anti-Human CD3	FITC/PE/APC
Anti-Human CD4	FITC/PE/APC
Anti-Human CD8a	FITC/PE/APC
Anti-Human CD25	PE/ PerCP-Cy5.5/ PE-Cy7/APC
Anti-Human CD27	BG Violet 450/ FITC/ PE /PE-Cy7/APC/APC-Cy7
Anti-Human CD28	FITC/ PE /PerCP-Cy5.5/PE-Cy7/APC
Anti-Human CD45RA	BG Violet 450/ FITC/PerCP-Cy5.5 /PE-Cy7/APC
Anti-Human CD45RO	Biotin/FITC/PE/PerCP-Cy5.5/APC
Anti-Human CD56 (NCAM)	PE/APC/FITC/PE-Cy7/PE/FITC/APC
Anti-Human CD57	FITC
Anti-Human CD69	FITC/PE
Anti-Human CD107a (LAMP-1)	FITC/PE/APC
Anti-HumanCD127(IL-7 Receptorα)	PE/APC/PE-Cy5
Anti-Human CD184 (CXCR4)	Biotin/PE/APC
Anti-Human CD197 (CCR7)	FITC/PE
胞內(nèi)
Anti-Human IFN gamma	FITC/PE/PE-Cy7/APC
Anti-Human Perforin	FITC/PE/APC

CAR-T細胞因子產(chǎn)物鑒定

IL-2 和 IFN-γ ELISA 試劑盒

人	貨號
IL-2	PK60568
IFN-Gamma	PK01579

細胞凋亡

CD4和CD28抗體。參見CAR-T細胞的檢測抗體。

CFSE（Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester）稀釋分析

Biogems熒光染料CFSE是一種可穿透細胞膜的熒光染料，能與胞內(nèi)的細胞骨架蛋白中的游離胺基反應(yīng)，zui終形成具有熒光的蛋白復(fù)合物，CFSE染料隨著細胞的分裂增殖可被子代細胞均勻繼承，其含量的衰減與細胞分裂次數(shù)成正比，這種現(xiàn)象可以在488nm的激發(fā)光下，采用流式細胞儀檢測分析，通過檢測到細胞熒光強度不斷的降低，進一步分析得出細胞分裂增殖的情況。

訂購信息

品牌	產(chǎn)品描述	貨號	包裝	價格
PeproTech/BioGems	CFSE	63310-00-500	500ug	1120

重刺激和體外共培養(yǎng)

共培養(yǎng)3天后，CAR-T細胞用CD3和CD19抗體染色。

三PeproTech/BioGems ELISA試劑盒

Human	貨號	BioGems
EGF	PK01133	$5,040.00
HGF	PK14210	$5,180.00
IFN-Gamma	PK01579	$4,830.00
IL-1 Beta	PK01584	$4,830.00
IL-2	PK60568	$4,830.00
IL-4	PK05112	$4,830.00
IL-6	PK05231	$4,830.00
IL-10	PK22301	$4,830.00
IL-12	PK29459	$4,830.00
IL-13	PK35225	$5,460.00
IL-17A	PK16552	$4,830.00
PDL1	PK9NZQ7	$5,740.00
TGF-Beta1	PK01137	$5,740.00
TNF-Alpha	PK01375	$4,830.00
VEGF	PK15692	$5,110.00

四 PeproTech/BioGems *

BioGems 佛波酯PMA

PMA(Phorbol 12-myristate 13-acetate)是一種佛波酯，常用于激活某些類型的蛋白激酶C(PKC)，如group A (α, βI, βII, γ) 和group B (δ, ε, η, θ)異構(gòu)體。佛波酯(包括PMA)的結(jié)構(gòu)類似于二?；视?，可通過與PKC的C1域相互作用而活化PKC異構(gòu)體。通過PCK，PMA也活化某些MAP激酶途徑。PMA高濃度長時間作用于細胞可引起總PKC活性及其成瘤性的降低，而低濃度可能起保護作用。此外，PMA也促進造血分化。PMA的水溶性約是PDBu(phorbol-12,13-dibutyrate)的10倍，提示PMA更適合用于細胞學(xué)研究。

Biogems紅細胞裂解液（RBC Lysis Buffer）

4大優(yōu)勢：

*，有*

不含固定劑，溶血后細胞活性好

溶血充分，分群清晰

無菌，溶血后細胞可以繼續(xù)培養(yǎng)

產(chǎn)品名稱	貨號	規(guī)格	單價	*
Anti-Human CD3 SAFIRE Purified	05121-25-500	500 μg	￥4,130	￥1,652
Anti-Human CD28 SAFIRE Purified	10311-25-500	500 μg	￥3,640	￥1,456
Phorbol 12-myristate 13-acetate（PMA）	1652981-1mg	1mg	￥880	￥1,320
Brefeldin A	2031560-5mg	5mg	￥880
Ionomycin (calcium salt)	5608212-1mg	1mg	￥880
10X RBC Lysis Buffer	64010-00-100	100ml	￥700	￥500

Biogems破膜劑

貨號	產(chǎn)品描述	規(guī)格	單價	*
92550-00-50	Transcription Factor Fixation/Permeabilization Concentrate	50 ml	1050
92160-00-160	Transcription Factor Fixation/Permeabilization Dilute	160 ml	420
92110-00-150	Permeabilization Buffer(10X)	150 ml	1030
		總價	2500	1600

活動時間：截止2017年12月31日

參考：

1.派普泰克*資料.

2.J Clin Invest. 2011.CD28 costimulation improves expansion and persistence of chimeric antigen receptor–modified T cells in lymphoma patients.Barbara Savoldo,et al.

3.Blood 2014.Closely related T-memory stem cells correlate with in vivo expansion of CAR.CD19-T cells and are preserved by IL-7 and IL-15.Yang Xu,et al.

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