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Discovery® 反相酰胺 C16 高效液相色譜柱 

SupelcoDiscoveryRP-Amide色譜柱/Discovery反相酰胺C16液相色譜柱

Supelco Discovery 反相酰胺C16液相色譜柱的主要特點(diǎn)：

• 對(duì)極性化合物具有出色的保留能力和分離度 與 C18 柱相比具有*的選擇性

柱效高，峰形良好

疏水性比 C18 柱弱

可兼容 * 的含水流動(dòng)相

Discovery® 反相酰胺 C16 高效液相色譜柱

5 μm  L × I.D. 5 cm × 2.1 mm

5 μm  L × I.D. 10 cm × 2.1 mm 

5 μm  L × I.D. 15 cm × 2.1 mm

5 μm  L × I.D. 5 cm × 3 mm

5 μm  L × I.D. 15 cm × 3 mm

5 μm  L × I.D. 25 cm × 3 mm

5 μm  L × I.D. 12.5 cm × 4 mm

5 μm  L × I.D. 15 cm × 4 mm

5 μm  L × I.D. 25 cm × 4 mm

5 μm  L × I.D. 5 cm × 4.6 mm

5 μm  L × I.D. 10 cm × 4.6 mm

5 μm  L × I.D. 15 cm × 4.6 mm 

5 μm  L × I.D. 25 cm × 4.6 mm

在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質(zhì)，他們的類(lèi)型結(jié)構(gòu)、極性、酸堿性、分子量大小等等，

1.樣品是極性的且弱酸性的;就可以選擇C18在*酸性水溶液條件下檢測(cè)，即要選擇承受*純水且對(duì)極性化合物保留很好的色譜柱

2. 如果樣品極性太強(qiáng)，或酸性太強(qiáng);可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC(親水色譜)，也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱(缺點(diǎn)是離子對(duì)試劑平衡時(shí)間長(zhǎng)，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密，否 則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn)，另外離子對(duì)試劑很難洗下來(lái)，基本上用了離子對(duì)的色譜柱就不能再用于其它實(shí)驗(yàn))

3. 若樣品是堿性的;可選擇高純硅膠柱(高純硅膠缺少金屬雜質(zhì)，且硅膠端基封尾)或一些經(jīng)過(guò)修飾的C18柱(如極性嵌入技術(shù)或堿去活技術(shù)等)，他們都會(huì)減少堿性化合物的拖尾，一般會(huì)選擇中性或偏堿的條件下做，因?yàn)檫@樣可增加堿性樣品的保留

4.如果堿性化合物的極性太強(qiáng)，或堿性太強(qiáng);可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測(cè)(優(yōu)點(diǎn)是方法開(kāi)發(fā)簡(jiǎn)單，缺點(diǎn)是目前實(shí) 現(xiàn)這一技術(shù)的色譜柱品牌比較少，價(jià)格也高)或者選用HILIC色譜柱(硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經(jīng)典的檢測(cè)堿性樣品的方法)選擇強(qiáng)離子交換柱(缺點(diǎn) 是不能用來(lái)分析其它樣品，對(duì)流動(dòng)相pH要求比較精密，否則很難重復(fù)實(shí)驗(yàn))也有使用C18+強(qiáng)陰離子對(duì)試劑或強(qiáng)陰離子交換色譜柱；

液相色譜柱決定終分離效果，所以在選擇色譜柱時(shí)候有必要考慮清楚自己的需求。

首先液相色譜柱目前來(lái)說(shuō)分為正反相色譜柱，正相有SI等，反相有C18等。正相主要分離極性物質(zhì)，反相主要分離非極性物質(zhì)，氨基柱等主要分離二者之間的。

明確了色譜柱大概功能之后，確認(rèn)下自己樣品信息，基本就有點(diǎn)眉目了，方向?qū)α?，剩下的事情就是?xì)節(jié)了如：鍵合相、粒徑、孔徑、碳載量等

鍵合相：確定了正反相后基本就簡(jiǎn)單了，正相很簡(jiǎn)單，我們重點(diǎn)討論下反相，C18主要分離非極性和弱極性物質(zhì)，因?yàn)槭擎I合硅膠，所以C18也分好幾種有常規(guī)的如C18-A，耐純水的OL Apple C18-AQ、耐酸堿的OL Apple C18-EX等，如果發(fā)現(xiàn)C18保留很弱，調(diào)整流動(dòng)相也不行，這個(gè)時(shí)候可以考慮C8甚至C4等。

粒徑：色譜法追求的是高效、高分辨、高速等。目前來(lái)說(shuō)亞2um填料或者2UM核殼填料是很理想的模型，基本具備“三高”特征尤其是高速，線(xiàn)速度不在影響分離度，不過(guò)附帶的缺點(diǎn)就是高壓，要升級(jí)相應(yīng)的硬件，成本高昂，需要謹(jǐn)慎考慮。

5um填料普遍，目前來(lái)說(shuō)*可以勝任各種日常檢測(cè)，即使有特殊要求，3um色譜填料基本上也能全覆蓋，不過(guò)該模型下線(xiàn)速度和分離度是成反比的。

孔徑：目前很多60~300A都有，甚至更高或者更低的。開(kāi)孔的填料多了個(gè)類(lèi)似分子篩功能，所以選擇孔徑一定要關(guān)注分子量，蛋白（分子量5000以上）一般都需要在160A以上，多肽（分子量上限在3000左右）在120A左右，一般快速柱孔徑都很小，可以縮短樣品路徑。所以上還有無(wú)孔硅膠柱子，也很適合蛋白分離，*解決蛋白分子量大和太粘稠堵住孔徑問(wèn)題。

碳載量：快速柱碳載量很低，如A家等，省時(shí)間，省溶劑，但分析部分復(fù)雜樣品如中藥等有點(diǎn)力不從心，這個(gè)時(shí)候可以考慮英國(guó)OL Apple色譜柱，碳載量15~23%，碳載量數(shù)值就像河床的水草，越高代表越密集，保留樣品能力越強(qiáng)，越有可能分離開(kāi)難分離物質(zhì)。