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研究人員普遍認(rèn)為實驗室常用的塑料制品都有惰性，但有研究報道指出，諸如移液器吸頭和樣品管等常用實驗耗材會浸出油酸酰胺、芥酸酰胺和DiHEMDA 等化合物。對于生化細(xì)胞分析和生物細(xì)胞分析而言，這是一個需要考慮的重要因素，因為浸出化合物會對此類實驗產(chǎn)生抑制作用。

簡介

移液器吸頭用于實驗室液體轉(zhuǎn)移應(yīng)用，包括取樣、培養(yǎng)基制備和稀釋等。但在標(biāo)準(zhǔn)操作過程中，移液器吸頭會釋放出生物活性污染物，對蛋白質(zhì)活性產(chǎn)生負(fù)面影響，同時，實驗室常用的塑料制品會釋放出干擾性浸出物。

常見的遷移化合物包括油酰胺、芥酸酰胺、DiHEMDA DiHEMDA（雙(2- 羥乙基) 甲基十二烷基氯化銨）和bDtBPP（雙(2,4- 二叔丁基苯基) 磷酸酯)。

在本研究中，對賽多利斯Optifit 和Safetyspace® 濾芯吸頭及其低吸附型號使用無水乙醇及DMSO 萃取后采用HPLC、GC-MS和LC-MS法進行實驗室設(shè)備相關(guān)浸出物分析。

方法

實驗室設(shè)備相關(guān)的浸出物測試使用100 μl 的乙醇或DMSO浸潤各種移液器吸頭（200 μl Optifit 吸頭、Safetyspace® 濾芯吸頭和低吸附型號，將溶劑吸入移液器吸頭，保持5 秒鐘并直接排液到樣品試管中。多個同型號移液器吸頭（5 個移液器吸頭，總共500 μL，混合樣品）用于生成足以使用GC-MS 或LC-MS 進行實驗室設(shè)備相關(guān)浸出物分析的檢測量。

GC-MS

通過液-液萃取制備乙醇和水提取物，并進樣至色譜柱。通過使用內(nèi)標(biāo)2 - 氟聯(lián)苯（10 μg/ml）進行液體注射，使用甲苯-d8（0.1μ g/ml）進行頂空注射，進行半定量。

LC-MS

將乙醇和DMSO 提取物直接進樣至帶色譜柱的LC-MS 系統(tǒng)。通過目視比較樣品的基峰離子（BPI）色譜圖進行評估。

結(jié)果

對賽多利斯Optifit 吸頭和Safetyspace® 濾芯吸頭及其低吸附型號進行了GC-MS 和LC-MS 分析。

圖1. 使用GC-MS 對賽多利斯移液器吸頭無水乙醇萃取的化學(xué)浸出物進行分析。

圖2.使用LC-HRMS（ESI+）對賽多利斯移液器吸頭無水乙醇萃取的化學(xué)浸出物進行分析。

圖3.使用LC-HRMS（ESI-）對賽多利斯移液器吸頭DMSO萃取的化學(xué)浸出物進行分析。

圖4.使用LC-MS（ESI+）對賽多利斯移液器吸頭無水乙醇萃取的化學(xué)浸出物進行分析。

結(jié)論

從賽多利斯移液器吸頭中定量的浸出物水平低于文獻中報告的每種評估化合物的相關(guān)濃度（表1）。因此，在細(xì)胞培養(yǎng)實驗室操作或生物分析樣品的制備中使用賽多利斯Optifit 吸頭和Safetyspace® 濾芯吸頭及其低吸附型號預(yù)計不會對敏感的生物或生化分析產(chǎn)生干擾。

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