NAD激酶試劑盒
NAD激酶試劑盒標(biāo)本必須為液體,不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個標(biāo)本量收集體積=100ul×檢測種類。
◇ 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇ 血漿:
應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,加入10%(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇ 尿液、胸腹水、腦脊液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇ 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
◇ 組織標(biāo)本:
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存,如有必要,可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取,無需組織裂解試劑,實驗過程無需調(diào)pH值、離心;
2.快速分型擴(kuò)增:45分鐘快速高效擴(kuò)增;
3.擴(kuò)增試劑:分熱啟動型和非熱啟動型兩種,含有染料,擴(kuò)增后可直接電泳;
4.減少繁瑣步驟,降低污染風(fēng)險;
5.高通量操作:可在PCR儀上批量處理樣本;
6.擴(kuò)增產(chǎn)物末端加A,且可進(jìn)行下游酶切、測序等;
7.節(jié)約成本,提取+擴(kuò)增,合計低于6元。
屬進(jìn)口分裝試劑盒類產(chǎn)品。公司還有血清、細(xì)胞、抗體、細(xì)胞因子、實驗試劑、移液器、實驗耗材、實驗儀器及實驗技術(shù)服務(wù)等等產(chǎn)品,歡迎新老客戶。
水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗嗎?
導(dǎo)向抗癌藥物—凍干重組人促黃體激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白已進(jìn)入“我國水貂病毒性腸炎病原分離、鑒定、特異性診斷及同源組織滅活疫苗的研究”
小鼠尾靜脈采血,如何從全血中制備ELISA用血清,有什么原則嗎?
放4℃過夜,然后4℃離心,取上清即可用于ELISA。
細(xì)胞株
Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好?還是冷凍好?
要冷藏?。∫驗橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時,其溶液的pH值會發(fā)生改變,溶液往往變堿,某些成分溶解也會受到影響對細(xì)胞生長不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中,通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個月 ~ 一年。
Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用,及使用方法。
幾乎所有的細(xì)胞對谷氨酰胺有較高的要求,細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì),在缺少谷氨酰胺時,細(xì)胞生長不良而死亡。所以,各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定,應(yīng)置-20 ?C冰凍保存,用前加入培養(yǎng)基中。加有谷氨酰胺的液體培養(yǎng)基4 ?C 冰箱儲存兩周以上時,應(yīng)重新加入原來量的谷氨酰胺?;A(chǔ)醫(yī)學(xué)細(xì)胞中心在其服務(wù)項目中配制分裝了高濃度(100倍)的谷氨酰胺溶液(1ml/支)。每支1ml的谷氨酰胺加到99ml*培養(yǎng)基中,其終濃度為2mM/ml培養(yǎng)基。包裝為粉紅色,-24?C保存
Q3.細(xì)胞計數(shù)及存活測試
1、原理:
(1)計算細(xì)胞數(shù)目可用血球計數(shù)盤或是Coultercounter粒子計數(shù)器自動計數(shù)。
(2)血球計數(shù)盤一般有二個chambers,每個chamber中細(xì)刻9個1mm2大正方形,其中4個角落之正方形再細(xì)刻16個小格,深度均為0.1mm。當(dāng)chamber上方蓋上蓋玻片后,每個大正方形之體積為1mm2×0.1mm=1.0x10-4ml。使用時,計數(shù)每個大正方形內(nèi)之細(xì)胞數(shù)目,乘以稀釋倍數(shù),再乘以104,即為每ml中之細(xì)胞數(shù)目。
(3)存活測試之步驟為dyeexclusion,利用染料會滲入死細(xì)胞中而呈色。