單脫氫抗壞血酸還原酶測(cè)試盒

單脫氫抗壞血酸還原酶測(cè)試盒標(biāo)本必須為液體，不含沉淀。包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等。1ml的全血可得到0.5ml的血清或血漿。每個(gè)標(biāo)本量收集體積＝100ul×檢測(cè)種類。

◇      血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◇      血漿：應(yīng)根a據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％(v/v)抗凝劑(0.1M檸檬酸鈉或1% heparin 或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◇      尿液、胸腹水、腦脊液：用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◇      細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
◇      組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin(抑肽酶)。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

1.快速提?。?5分鐘快速基因組DNA提取，無(wú)需組織裂解試劑，實(shí)驗(yàn)過(guò)程無(wú)需調(diào)pH值、離心；
2.快速分型擴(kuò)增：45分鐘快速高效擴(kuò)增；
3.擴(kuò)增試劑：分熱啟動(dòng)型和非熱啟動(dòng)型兩種，含有染料，擴(kuò)增后可直接電泳；
4.減少繁瑣步驟，降低污染風(fēng)險(xiǎn)；
5.高通量操作：可在PCR儀上批量處理樣本；
6.擴(kuò)增產(chǎn)物末端加A，且可進(jìn)行下游酶切、測(cè)序等；
7.節(jié)約成本，提取+擴(kuò)增，合計(jì)低于6元。

屬進(jìn)口分裝試劑盒類產(chǎn)品。公司還有血清、細(xì)胞、抗體、細(xì)胞因子、實(shí)驗(yàn)試劑、移液器、實(shí)驗(yàn)耗材、實(shí)驗(yàn)儀器及實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)等等產(chǎn)品，歡迎新老客戶。

水貂的綠膿桿菌外毒素A能用小鼠的ELISA試劑盒檢驗(yàn)嗎？

導(dǎo)向抗癌藥物—凍干重組人促黃體激素釋放激素-綠膿桿菌外毒素A融合蛋白已進(jìn)入“我國(guó)水貂病毒性腸炎病原分離、鑒定、特異性診斷及同源組織滅活疫苗的研究”

小鼠尾靜脈采血，如何從全血中制備ELISA用血清，有什么原則嗎？

放4℃過(guò)夜，然后4℃離心，取上清即可用于ELISA。

【生物分子】 抗生素/抗真菌素 維生素 氨基酸 核苷酸 脂 糖類 白三烯 前列腺素 藥物結(jié)合物 抗氧化劑 藥理活性化合物 類固醇激素結(jié)合物 半抗原反應(yīng) 半抗原載體結(jié)合物 放射性核素 血小板活化素 tRNA 活性染料和化合物 親和素/鏈霉親和素
【蛋白質(zhì)/抗原/多肽】 免疫球蛋白 封閉肽 人蛋白和抗原 小鼠蛋白和抗原 細(xì)菌蛋白和抗原 病毒蛋白和抗原 植物蛋白和抗原 其它蛋白和抗原 細(xì)胞質(zhì)蛋白 總蛋白 膜蛋白 核蛋白 細(xì)胞裂解和提取物 線粒體蛋白 細(xì)胞裂解 組織提取 重組細(xì)胞因子 
【常用生化試劑】EDTA DTT Tris SDS MOPS HEPES 水 分子生物學(xué)緩沖液 蛋白生化緩沖液 去垢劑 染色試劑 溶劑 酸堿 化學(xué)試劑 其它生化試劑
【PCR/RT-PCR/qPCR】PCR試劑 PCR對(duì)照 特異性PCR試劑盒 PCR克隆試劑盒 RNA 載體及構(gòu)建 PCR克隆載體 M13克隆載體 細(xì)菌克隆載體 文庫(kù)及構(gòu)建 cDNA文庫(kù) 基因組文庫(kù) 噬菌體展示文庫(kù)
【酶】限制性內(nèi)切酶 蛋白酶 核酸酶 激酶 聚合酶 連接酶
【cDNA及合成純化】cDNA全長(zhǎng)基因 RNA cDNA合成 cDNA相關(guān)試劑
【核酸/蛋白合成】Oligo純化 核酸合成柱 核酸合成試劑
【克隆與表達(dá)】克隆基因 克隆試劑盒 克隆篩選
【表達(dá)分析】 Northern印跡分析 分支DNA和mRNA定量
【蛋白分析】 PAGE凝膠制備 蛋白電泳試劑 預(yù)制蛋白凝膠
【核酸純化】 DNA凝膠純化 DNA提取純化 PCR產(chǎn)物純化
【RNAi技術(shù)】 siRNA 反義寡核苷酸 RNAi定量 RNAi文庫(kù)
【蛋白檢測(cè)】 Western印跡 報(bào)告基因檢測(cè) 蛋白檢測(cè)試劑盒
【實(shí)驗(yàn)動(dòng)物】 轉(zhuǎn)基因動(dòng)物 小鼠 大鼠 模式動(dòng)物
【臨床檢測(cè)試劑】 生化檢測(cè) 遺傳學(xué)檢測(cè) 血液檢測(cè)
【相關(guān)檢驗(yàn)試劑】 食品安全檢測(cè) 藥品安全檢測(cè)
【蛋白純化】 蛋白提取 蛋白透析 蛋白定量 蛋白穩(wěn)定
【細(xì)胞培養(yǎng)】 血清 血清替代物 細(xì)胞培養(yǎng)基 細(xì)胞 細(xì)胞株 感受態(tài)細(xì)胞 新鮮細(xì)胞分離
【干細(xì)胞】 干細(xì)胞/祖細(xì)胞 原代細(xì)胞 干細(xì)胞培養(yǎng)基
【蛋白修飾】 蛋白標(biāo)記 載體蛋白結(jié)合 其它
【細(xì)胞生物學(xué)檢測(cè)】 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞分離 細(xì)胞增殖
【藥物篩選】 熒光素細(xì)胞活力/增殖/毒性檢測(cè)
【免疫檢測(cè)】 放射性免疫檢測(cè) 化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)

　　Q1. 液體培養(yǎng)基的保存是冷藏好？還是冷凍好？

　　要冷藏??！因?yàn)橐后w培養(yǎng)基經(jīng)冷凍后再經(jīng)溶化時(shí)，其溶液的pH值會(huì)發(fā)生改變，溶液往往變堿，某些成分溶解也會(huì)受到影響對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)不利。故液體培養(yǎng)基一定要存放在冷藏箱中，通常液體培養(yǎng)基在冷藏條件下可存放6個(gè)月 ~ 一年。

　　Q2. 液體培養(yǎng)基中谷氨酰胺的作用，及使用方法。

　　幾乎所有的細(xì)胞對(duì)谷氨酰胺有較高的要求，細(xì)胞需要谷氨酰胺合成蛋白質(zhì)，在缺少谷氨酰胺時(shí)，細(xì)胞生長(zhǎng)不良而死亡。所以，各種培養(yǎng)液中都含有較大量的谷氨酰胺。谷氨酰胺在溶液中很不穩(wěn)定，應(yīng)置-20 ?C冰凍保存，用前加入培養(yǎng)基中儲(chǔ)存兩周。

 現(xiàn)在一般完整的試劑盒應(yīng)該有一下幾個(gè)組成：

 （1）已包被抗原或抗體的固相載體（免疫吸附劑）；

（2）酶標(biāo)記的抗原或抗體（結(jié)合物）；

（3）酶的底物；

（4）陰性對(duì)照品和陽(yáng)性對(duì)照品（定性測(cè)定中），參考標(biāo)準(zhǔn)品和控制血清（定量測(cè)定中）；

（5）結(jié)合物及標(biāo)本的稀釋液；

（6）洗滌液，在板式ELISA中，常用的稀釋液為含0.05%吐溫20磷酸緩沖鹽水；

（7）酶反應(yīng)終止液，常用的HRP反應(yīng)終止液為硫酸，其濃度按加量及比色液的體積而異，在板式ELISA中一般采用3mol/L。

1. 放射免疫測(cè)定 放射免疫測(cè)定是將同位素分析的高靈敏度與抗原抗體反應(yīng)的特異性相結(jié)合，方法大多采用競(jìng)爭(zhēng)法原理。待檢的細(xì)胞因子與放射性同位素標(biāo)記的細(xì)胞因子競(jìng)爭(zhēng)與細(xì)胞因子抗體（多克隆抗體或單克隆抗體）結(jié)合，再通過(guò)分離劑分離結(jié)合狀態(tài)的標(biāo)記物，計(jì)數(shù)后根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線即可計(jì)算出細(xì)胞因子的量。本法具有靈敏度高，特異性強(qiáng)、準(zhǔn)確性好等特點(diǎn)。 

2.ELISA測(cè)定 2-1.酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)（ELISPOT） 檢測(cè)試劑盒是基于定量夾心ELISA法原理，將刺激后的細(xì)胞滴加到包被在貼PVDF微孔中，放置于37℃孵育。在孵育的過(guò)程中，細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子即會(huì)被包被的抗體所捕獲，以下的過(guò)程與一般的ELISA實(shí)驗(yàn)相同，用不溶性的酶聯(lián)底物進(jìn)行顯色，每一個(gè)顯色點(diǎn)（斑點(diǎn)）既代表一個(gè)分泌細(xì)胞因子的細(xì)胞。通過(guò)的ELISPOT分析儀或在顯微鏡下進(jìn)行計(jì)數(shù)，就可以進(jìn)行分析。

ELISPOT法用于檢測(cè)單個(gè)細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子，綜合了普通ELISA方法的高特異性和準(zhǔn)確定量的優(yōu)點(diǎn)，而且具有生物活性分析得出與功能相關(guān)的結(jié)果的優(yōu)點(diǎn)。 2-2.雙抗夾心ELISA法 雙抗體夾心法需制備針對(duì)細(xì)胞因子不同位點(diǎn)的兩個(gè)單克隆抗體，一個(gè)抗體作為固相抗體用于包被，另一個(gè)作為標(biāo)記抗體?？刹捎贸Ｒ?guī)雙抗夾心法，也可采用一步法。由于血清中細(xì)胞因子的含量很低。

常規(guī)ELISA法不能滿足要求，需引入生物素－親合素系統(tǒng)來(lái)提高靈敏度，即加入樣品后加入生物素標(biāo)記的另一個(gè)抗體，再加入親合素及生物素化的酶，再加入底物進(jìn)行顯色，顏色與待檢的細(xì)胞因子量呈正比。