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翌圣生物科技（上海）股份有限公司
初級(jí)會(huì)員·12年
熒光定量pcr多重?zé)晒舛縋CR預(yù)混液(含UDG)
| 參考價(jià): | 面議 |
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)- 熒光定量pcr 產(chǎn)品型號(hào)
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問(wèn)次數(shù)：931更新時(shí)間：2022-11-07 14:49:07
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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | 11212ES03 |
|---|---|---|---|
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
產(chǎn)品介紹
產(chǎn)品描述
多重?zé)晒舛縋CR預(yù)混液(含UDG)本產(chǎn)品是2×Mix預(yù)混合試劑，能夠?qū)崿F(xiàn)在單個(gè)反應(yīng)孔中進(jìn)行多達(dá)四重的熒光定量PCR反應(yīng)。本產(chǎn)品含有基因改造的抗體法熱啟動(dòng)Taq酶，極大地提高了擴(kuò)增靈敏度和特異性。同時(shí)，本產(chǎn)品對(duì)多重反應(yīng)緩沖體系進(jìn)行了深度優(yōu)化，能夠提高反應(yīng)的擴(kuò)增效率，促進(jìn)低濃度模板的有效擴(kuò)增。本產(chǎn)品可用于基因分型和基因多重定量分析。本產(chǎn)品含有UDG酶，可有效防止氣溶膠污染的風(fēng)險(xiǎn)。
產(chǎn)品組分
組分編號(hào) | 組分名稱(chēng) | 產(chǎn)品編號(hào)/規(guī)格 | ||||
11212ES03 (1 mL) | 11212ES08 (5×1 mL) | 11212ES12 (12.5 mL) | 11212ES60 (20×5 mL) | 11212ES62 (125 mL) | ||
11212 | 2×Hieff Unicon® Universal TaqMan qPCR mix (UDG plus) | 1 mL | 5×1 mL | 12.5 mL | 20×5 mL | 125 mL |
運(yùn)輸與保存方式
冰袋運(yùn)輸。-20℃保存，有效期1年。
注意事項(xiàng)
一、關(guān)于操作
1）請(qǐng)于使用前確保產(chǎn)品*解凍并*混勻，短暫離心收集至管底后，置于冰上備用。
2）為避免樣品間交叉污染和氣溶膠污染，推薦在超凈臺(tái)中進(jìn)行反應(yīng)體系的配制。
3）使用過(guò)程中避免產(chǎn)品的反復(fù)凍融。
4）為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
二、實(shí)驗(yàn)方法
a) 引物設(shè)計(jì)
1. 引物必須具有特異性。
2. 引物的Tm值必須在58-60°C，而且各組引物的Tm差異應(yīng)控制在1-2°C。
3. 引物的長(zhǎng)度一般控制在15-30 bp之間。
b) 探針設(shè)計(jì)
1. TaqMan探針的Tm值要比對(duì)應(yīng)的引物高約10°C（68-70°C）。
2. TaqMan探針和引物間不能形成二聚體。
反應(yīng)體系f
組分 | 體積 (μL) | 終濃度 |
2×Hieff Unicon® Universal TaqMan qPCR mix (UDG plus) | 12.5 | 1× |
Primer mix (10 μM) | X | 0.1-0.5 μMa |
Probe mix (10 μM) | X | 50-250 nMb |
Rox reference dyec | 0.5 | 1× |
Template DNA/cDNAd | 1-10 | - |
ddH2O | up to 25e | - |
【注】：使用前務(wù)必充分混勻，避免劇烈震蕩產(chǎn)生過(guò)多氣泡。
a) 引物濃度：Primer Mix中包含多對(duì)引物，通常每條引物終濃度為0.2 μM，也可以根據(jù)情況在0.1-0.5 μM間進(jìn)行調(diào)整。
b) 探針濃度：Probe Mix中包含多條不同熒光信號(hào)的探針，每條探針的濃度可根據(jù)具體情況在50-250 nM間調(diào)整。
c) Rox reference dye：使用在Applied Biosystems 等Real Time PCR 擴(kuò)增儀上，用以校正孔與孔之間產(chǎn)生的熒光信號(hào)誤差；本產(chǎn)品不含Rox reference dye。如需，推薦使用貨號(hào)10200ES產(chǎn)品。
d) 模板稀釋?zhuān)簈PCR靈敏度*，建議將模板進(jìn)行稀釋使用。若模板為cDNA原液，則模板體積不超過(guò)總體積的1/10；
e) 反應(yīng)體系：推薦使用25 μL、30 μL或50 μL，以保證目的基因擴(kuò)增的有效性和重復(fù)性。
f) 體系配制：請(qǐng)于超凈工作臺(tái)內(nèi)配制，并使用無(wú)核酸酶殘留的槍頭、反應(yīng)管；推薦使用帶濾芯的槍頭。避免交叉污染和氣溶膠污染。
參考擴(kuò)增程序
循環(huán)步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
污染降解 | 25℃ | 10 min | 1 |
預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
變性 | 95℃ | 15 sec | 45 |
退火/延伸a | 60℃ | 30 secb |
【注】： a) 退火/延伸：溫度和時(shí)間可根據(jù)實(shí)驗(yàn)要求適當(dāng)調(diào)整。
b) 熒光信號(hào)采集：請(qǐng)按照儀器使用說(shuō)明書(shū)要求進(jìn)行實(shí)驗(yàn)程序設(shè)置，幾種常見(jiàn)儀器的時(shí)間設(shè)定如下：
20 sec：Applied Biosystems 7700, 7900HT, 7500 Fast
31 sec：Applied Biosystems 7300
32 sec：Applied Biosystems 7500
相關(guān)產(chǎn)品
產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix | 11211ES03/09/61 | 1 mL/5 mL/100 mL |
Hieff® anti-Taq DNA Polymerase Antibody Taq酶單克隆抗體 | 31301ES60/80/90/92/93/94 | 100 μg/1 mg/5 mg/10 mg/100 mg/1000 mg |
Uracil DNA Glycosylase (UDG), heat-labile 熱敏UDG | 10303ES60/76/96/98 | 100 U/500 U/10000 U/100000 U |
dUTP, 100 mM Solution 脫氧尿苷三磷酸溶液（100 mM） | 10128ES72/80/96/98 | 250 μL/1 mL/25 mL/500 mL |
HB220224
